| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-9页 |
| 第1章 引言 | 第9-31页 |
| ·苏云金芽胞杆菌及应用基础 | 第9-12页 |
| ·苏云金芽胞杆菌基本特征 | 第9-10页 |
| ·杀虫晶体蛋白的分类 | 第10-11页 |
| ·晶体蛋白编码基因的定位与表达 | 第11页 |
| ·杀虫晶体蛋白的作用机制 | 第11-12页 |
| ·苏云金芽胞杆菌毒素蛋白的结构与功能 | 第12-22页 |
| ·毒素蛋白的一级结构 | 第12页 |
| ·毒素蛋白的高级结构 | 第12-16页 |
| ·毒素蛋白的结构与功能的关系 | 第16-20页 |
| ·结构域交换在Bt毒素蛋白进化中的作用 | 第20-22页 |
| ·苏云金芽胞杆菌杀蚊毒素在不同宿主中的表达 | 第22-29页 |
| ·芽胞杆菌杀蚊毒素简介 | 第22-24页 |
| ·Bt杀蚊毒素基因在大肠杆菌和芽胞杆菌中的表达 | 第24-25页 |
| ·Bt杀蚊毒素在水生微生物中的表达 | 第25-29页 |
| ·本研究的主要基础与目的意义 | 第29-31页 |
| 第2章 苏云金杆菌以色列亚种杀虫蛋白CytlAa在离中不粘柄菌中的表达 | 第31-45页 |
| ·材料与方法 | 第31-38页 |
| ·菌株和质粒 | 第31-32页 |
| ·培养基及试剂 | 第32-33页 |
| ·cytlAa基因的PCR扩增 | 第33-34页 |
| ·质粒DNA的分子生物学操作 | 第34页 |
| ·重组质粒的构建 | 第34-36页 |
| ·Ae菌株的转化及重组子的鉴定 | 第36-37页 |
| ·外源蛋白表达的检测:SDS-PAGE及Western blot | 第37页 |
| ·总RNA的提取和RNA电泳 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-43页 |
| ·重组质粒的构建 | 第38页 |
| ·Ae重组子的质粒鉴定 | 第38-40页 |
| ·Ae重组子中杀蚊蛋白基因的表达 | 第40-42页 |
| ·Ae和E.coli菌株总RNA的比较 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第3章 CytlAa和Cryl1Aa毒素蛋白在离中不粘柄菌中的共表达 | 第45-59页 |
| ·材料与方法 | 第45-49页 |
| ·质粒、菌株和培养基 | 第45-46页 |
| ·供试蚊虫 | 第46页 |
| ·重组质粒pSODCryPCyt20的构建 | 第46页 |
| ·Ae菌株的转化及重组子的生长特性 | 第46页 |
| ·生物测定 | 第46-48页 |
| ·Ae重组子经紫外线处理后的杀蚊活性 | 第48页 |
| ·总RNA的提取和RT-PCR | 第48-49页 |
| ·结果 | 第49-57页 |
| ·重组质粒的构建与Ae重组子的质粒鉴定 | 第49-51页 |
| ·Ae重组子的生长曲线 | 第51页 |
| ·Ae重组子中杀蚊蛋白基因表达的检测 | 第51-52页 |
| ·Ae重组子的毒力测定 | 第52-53页 |
| ·重组子Ae-CPC20经紫外线处理后的杀蚊活性 | 第53-55页 |
| ·Ae重组子中基因的RT-PCR检测 | 第55-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| 第4章 苏云金杆菌Cryl1杂交毒素蛋白的表达 | 第59-70页 |
| ·材料与方法 | 第59-64页 |
| ·菌株和质粒 | 第59页 |
| ·培养基及培养方法 | 第59-60页 |
| ·点突变 | 第60-63页 |
| ·质粒DNA的分子生物学操作 | 第63页 |
| ·Bt伴胞晶体的检测 | 第63页 |
| ·生物测定 | 第63-64页 |
| ·结果 | 第64-68页 |
| ·构建Cryl1杂交毒素重组质粒pSVABB | 第64-65页 |
| ·杂交毒素Cryl1ABB晶体形态观察 | 第65-66页 |
| ·杂交毒素Cryl1ABB的蛋白质检测 | 第66-67页 |
| ·杂交毒素Cryl1ABB的杀蚊活性 | 第67-68页 |
| ·讨论 | 第68-70页 |
| 第5章 苏云金杆菌Cryl杂交毒素蛋白的表达 | 第70-83页 |
| ·材料与方法 | 第70-74页 |
| ·菌株和质粒 | 第70页 |
| ·培养基及培养方法 | 第70-71页 |
| ·点突变 | 第71-72页 |
| ·质粒DNA的分子生物学操作 | 第72-73页 |
| ·Bt伴胞晶体的检测 | 第73页 |
| ·生物测定 | 第73-74页 |
| ·结果 | 第74-81页 |
| ·重组质粒pCR1CM的构建与测序鉴定 | 第74-75页 |
| ·质粒pCR1CM多克隆位点上KpnI的移除 | 第75页 |
| ·杂交毒素重组质粒pDS1CAA的构建 | 第75页 |
| ·杂交毒素Cry1CAA晶体形态观察 | 第75-78页 |
| ·杂交毒素Cry1CAA的蛋白质检测 | 第78-79页 |
| ·杂交毒素Cry1CAA的毒力测定 | 第79-81页 |
| ·讨论 | 第81-83页 |
| 第6章 结论与工作展望 | 第83-85页 |
| 1 Cyt1Aa和Cry11Aa毒素蛋白在离中不粘柄菌中的表达 | 第83页 |
| 2 Cry1和Cry11的杂交毒素蛋白的表达 | 第83页 |
| 3 工作展望 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-102页 |
| 附录 | 第102-110页 |
| 发表文章 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111页 |
