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Ⅰ 1-脱氧-D-木酮糖 5-磷酸合酶催化机理的初步探索; Ⅱ 1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸/1-脱氧-D-木酮糖合成的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
英文缩略语表第8-10页
第一章 绪论第10-24页
   ·萜类化合物的简介第10-11页
     ·萜类化合物的定义及分类第10-11页
     ·萜类化合物的生理功能第11页
   ·萜类化合物的生源途径第11-14页
     ·萜类化合物的两条生物合成途径第11页
     ·MVA途径第11-12页
     ·MEP途径第12-14页
     ·两条生物合成途径的关系第14页
   ·MEP途径关键酶的研究进展第14-17页
     ·DXS第14-16页
     ·DXR第16-17页
   ·DX/DXP合成方法的研究进展第17-24页
     ·化学法制备DX/DXP第18-21页
     ·酶法合成DX/DXP第21-24页
第二章 DXS的诱导表达、纯化以及酶机理探究第24-39页
   ·材料与仪器第24-26页
     ·菌株第24页
     ·试剂第24页
     ·主要仪器第24页
     ·主要溶液配方第24-26页
     ·培养基第26页
   ·实验方法第26-31页
     ·重组蛋白RcDXS、EcDXS的大量诱导表达第26页
     ·SDS-PAGE电泳检测诱导表达结果第26-27页
     ·重组蛋白DXS的亲和层析纯化第27页
     ·DXS蛋白浓度的测定第27页
     ·重组蛋白DXS的浓缩及保存第27页
     ·凝胶排阻层析法二次纯化重组蛋白DXS第27-28页
     ·二次纯化后DXS蛋白浓度测定第28页
     ·重组DXS蛋白催化机理研究第28-31页
   ·实验结果与讨论第31-38页
     ·重组蛋白DXS的诱导表达结果第31页
     ·重组蛋白DXS的亲和层析纯化结果第31-33页
     ·Bradford法测定Ni-NTA纯化的DXS蛋白浓度结果第33页
     ·凝胶排阻层析法对DXS的二次纯化结果第33-35页
     ·Bradford法测定二次纯化后的DXS蛋白浓度结果第35页
     ·D-GAP鉴定结果第35页
     ·纸色谱法检测DXP的结果第35-36页
     ·LC-MS法检测DXP的结果第36-38页
   ·本章小结第38-39页
第三章 DX/DXP合成方法的研究第39-56页
   ·材料与仪器第39页
     ·试剂第39页
     ·主要仪器第39页
   ·实验方法第39-46页
     ·DX参照品的合成第39-40页
     ·以D-甘油醛为底物合成DX第40页
     ·薄层色谱检测DX第40页
     ·DX的纯化第40-41页
     ·DX的鉴定第41页
     ·化学法-酶法合成DXP第41页
     ·化学法-酶法合成DXP方法的建立第41-42页
     ·化学法-酶法合成DXP反应监测-HPLC方法的建立第42页
     ·HPLC法检测反应产物第42页
     ·化学法-酶法合成DXP条件的优化第42-44页
     ·化学法-酶法合成DXP方法的确立第44-45页
     ·纸色谱检测DXP第45页
     ·DXP的纯化及鉴定第45页
     ·化学法-酶法合成DX第45页
     ·化学法-酶法合成DX的纯化及鉴定第45-46页
   ·实验结果与讨论第46-54页
     ·薄层色谱检测DX结果第46-47页
     ·DX的纯化结果第47-48页
     ·DX的氢谱鉴定结果第48页
     ·DX标准品和反应产物的HPLC检测结果第48-49页
     ·L-GPO用量的优化结果第49-50页
     ·catalase用量的优化结果第50页
     ·pH条件的优化结果第50-51页
     ·温度条件实验的结果第51-52页
     ·磷酸盐的优化结果第52页
     ·底物Na_2HPO_4和R-glycidol比例的优化第52-53页
     ·纸色谱检测DXP结果第53-54页
     ·DXP纯化和鉴定结果第54页
     ·化学法-酶法合成DX的鉴定结果第54页
   ·本章小结第54-56页
结论第56-57页
参考文献第57-62页
附录第62-65页
致谢第65页

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