苦荞SSR引物的开发及其应用研究
| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-25页 |
| 1.苦荞 | 第12-13页 |
| ·概述 | 第12页 |
| ·苦荞是粮药兼备的重要资源 | 第12-13页 |
| 2.分子标记概述 | 第13-15页 |
| ·限制性片断长度多态性 | 第13页 |
| ·随机扩增多态性DNA | 第13-14页 |
| ·扩增片段长度多态性 | 第14页 |
| ·简单重复序列 | 第14-15页 |
| 3.SSR引物开发概述 | 第15-19页 |
| ·传统的SSR标记开发策略 | 第16页 |
| ·富集法开发SSR引物策略 | 第16-18页 |
| ·从ESTs中开发SSR标记 | 第18-19页 |
| 4.DNA分子杂交概述 | 第19-21页 |
| 5.本研究的意义 | 第21-22页 |
| 参考文献 | 第22-25页 |
| 第二章 现有引物的筛选 | 第25-35页 |
| 1.材料与方法 | 第25-29页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·总DNA提取 | 第25-26页 |
| ·SSR-PCR反应体系及扩增条件 | 第26-28页 |
| ·各引物退火温度的确定 | 第28页 |
| ·结果检测 | 第28-29页 |
| 2.结果与讨论 | 第29-32页 |
| ·总DNA提取 | 第29页 |
| ·PCR条件的优化 | 第29-32页 |
| ·多态性检测 | 第32页 |
| 3.小结 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-35页 |
| 第三章 基于Genbank数据库的微卫星引物开发 | 第35-38页 |
| 1.材料与方法 | 第35页 |
| ·数据库搜索 | 第35页 |
| ·多态性检测 | 第35页 |
| 2.结果与分析 | 第35-36页 |
| 3.小结 | 第36页 |
| 参考文献 | 第36-38页 |
| 第四章 基于锚定PCR的微卫星引物开发 | 第38-43页 |
| 1.材料与方法 | 第38-40页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·DNA提取 | 第39页 |
| ·引物开发 | 第39页 |
| ·SSR位点多态性评价 | 第39-40页 |
| 2.结果与讨论 | 第40-42页 |
| ·5′-端锚定PCR | 第40页 |
| ·连接转化 | 第40页 |
| ·重组质粒的酶切及PCR验证 | 第40-41页 |
| ·插入片段的测序及SSR引物设计 | 第41页 |
| ·SSR位点多态性检测 | 第41-42页 |
| 3.小结 | 第42页 |
| 参考文献 | 第42-43页 |
| 第五章 基于多重富集的长微卫星引物开发策略初探 | 第43-49页 |
| 1.材料与方法 | 第43-45页 |
| ·模板 | 第43页 |
| ·5′-锚定PCR | 第43页 |
| ·杂交 | 第43-44页 |
| ·Dynabeads~(?)纯化 | 第44-45页 |
| ·连接转化 | 第45页 |
| ·重组质粒的酶切验证 | 第45页 |
| ·测序及特异引物设计 | 第45页 |
| 2.结果与分析 | 第45-47页 |
| ·5′-锚定PCR | 第45页 |
| ·杂交、纯化 | 第45-46页 |
| ·连接、转化及筛选 | 第46页 |
| ·SSR位点测序及引物设计 | 第46-47页 |
| 3.小结 | 第47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 结束语 | 第49-50页 |
| 附录 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
