| 研究论文目录 | 第1-6页 |
| 文献综述目录 | 第6-7页 |
| 图形目录 | 第7-8页 |
| 表格目录 | 第8-9页 |
| 研究论文:黄粉虫抗冻蛋白基因的克隆与应用研究 | 第9-62页 |
| 中文摘要 | 第9-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 1 引言 | 第15-18页 |
| 2 材料和方法 | 第18-30页 |
| ·生物材料 | 第18页 |
| ·试剂 | 第18-19页 |
| ·菌株及载体 | 第19-21页 |
| ·培养基 | 第21-23页 |
| ·微生物培养基 | 第21-23页 |
| ·主要的生物信息数据库和专业软件 | 第23页 |
| ·专业网站 | 第23页 |
| ·专业软件 | 第23页 |
| ·生物材料的预处理及相关基因的诱导表达 | 第23-24页 |
| ·黄粉虫预处理及抗冻蛋白基因诱导表达 | 第23页 |
| ·甘薯材料处理及冷胁迫相关基因的诱导表达 | 第23-24页 |
| ·目的基因的克隆 | 第24-26页 |
| ·黄粉虫总RNA的提取 | 第24页 |
| ·甘薯总RNA的提取 | 第24页 |
| ·mRNA纯化 | 第24-25页 |
| ·RNA质量的检测 | 第25页 |
| ·黄粉虫抗冻蛋白基因的RT-PCR克隆 | 第25页 |
| ·SAMS编码区RT-PCR扩增 | 第25-26页 |
| ·目的片段与质粒载体连接 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态制备与转化 | 第26-27页 |
| ·质粒的大量制备 | 第27页 |
| ·目的基因的表达及其产物的纯化 | 第27-28页 |
| ·目的基因的表达 | 第27-28页 |
| ·包涵体蛋白的纯化、溶解与复性 | 第28页 |
| ·TmAFP的特性分析和应用研究 | 第28-30页 |
| ·抗冻蛋白冰结合分析 | 第28页 |
| ·抗冻活性检验 | 第28页 |
| ·大肠杆菌转化效率的鉴定 | 第28-29页 |
| ·保存时间对感受态细胞转化效率的影响 | 第29页 |
| ·保存温度对感受态细胞转化效率的影响 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-51页 |
| ·黄粉虫抗冻蛋白编码序列的克隆和序列分析 | 第30-33页 |
| ·黄粉虫抗冻蛋白编码序列的克隆 | 第30页 |
| ·黄粉虫抗冻蛋白的编码序列的分析 | 第30-31页 |
| ·黄粉虫抗冻蛋白基因的同源性分析 | 第31-32页 |
| ·黄粉虫抗冻蛋白高级结构预测 | 第32-33页 |
| ·黄粉虫抗冻蛋白基因的表达与纯化及其产物特性分析 | 第33-36页 |
| ·黄粉虫抗冻蛋白原核表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·黄粉虫抗冻蛋白基因的表达与纯化 | 第35-36页 |
| ·黄粉虫抗冻蛋白特性分析 | 第36-38页 |
| ·黄粉虫抗冻蛋白活性分析 | 第36-37页 |
| ·TmAFP体外抗冻活性分析 | 第37-38页 |
| ·黄粉虫抗冻蛋白在制备大肠杆菌感受态细胞中的应用 | 第38-40页 |
| ·抗冻蛋白浓度对大肠杆菌感受态转化效率的影响 | 第38-39页 |
| ·保存时间与对大肠杆菌转化效率的关系 | 第39-40页 |
| ·保存温度与大肠杆菌感受态细胞转化效率的关系 | 第40页 |
| ·抗冻蛋白基因甘薯表达质粒构建 | 第40-44页 |
| ·抗冻蛋白基因甘薯组成型表达质粒构建 | 第40-42页 |
| ·抗冻蛋白基因甘薯块根特异型表达质粒构建 | 第42-44页 |
| ·甘薯S-腺苷甲硫氨酸合成酶编码序列的克隆和序列分析 | 第44-49页 |
| ·甘薯SAMS编码区的克隆 | 第44-45页 |
| ·甘薯SAMS编码区序列分析 | 第45-47页 |
| ·甘薯SAMS高级结构与活性中心预测 | 第47-49页 |
| ·甘薯SAMS基因的表达 | 第49-51页 |
| ·融合表达质粒载体pET-SAMS的构建 | 第49-50页 |
| ·甘薯SAMS融合表达 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| ·黄粉虫抗冻蛋白及其应用 | 第51页 |
| ·甘薯S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因 | 第51-52页 |
| ·甘薯转抗冻蛋白基因材料的建立 | 第52-53页 |
| 5 小结 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 文献综述:抗冻蛋白及其应用研究进展 | 第62-77页 |
| 摘要 | 第63-64页 |
| 1 引言 | 第64页 |
| 2 抗冻蛋白种类及其结构 | 第64-67页 |
| ·鱼类中的抗冻蛋白 | 第64-66页 |
| ·抗冻糖蛋白(AFGP) | 第65页 |
| ·Ⅰ型抗冻蛋白(AFPⅠ) | 第65页 |
| ·Ⅱ型抗冻蛋白(AFPⅡ) | 第65页 |
| ·Ⅲ型抗冻蛋白(AFPⅢ) | 第65-66页 |
| ·Ⅳ型抗冻蛋白(AFPⅣ) | 第66页 |
| ·昆虫中的抗冻蛋白 | 第66-67页 |
| ·细菌中的抗冻蛋白 | 第67页 |
| ·植物中的抗冻蛋白 | 第67页 |
| 3 抗冻蛋白的抗冻机制 | 第67-69页 |
| 4 抗冻蛋白的应用 | 第69-71页 |
| ·在农业上的作用 | 第69页 |
| ·对非极地鱼的保护作用 | 第69页 |
| ·在食品科学中的应用 | 第69页 |
| ·在医学上的应用 | 第69-70页 |
| ·在工业上的应用 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 在读期间主要科研成绩 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |