| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语英汉对照 | 第9-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-34页 |
| ·引言 | 第15-16页 |
| ·植物激素在水稻根发育中的研究 | 第16-25页 |
| ·茉莉酸作用的分子机理研究 | 第16-20页 |
| ·其他植物激素在水稻根发育过程中分子生物学研究 | 第20-24页 |
| ·展望 | 第24-25页 |
| ·植物类受体激酶蛋白的研究进展 | 第25-28页 |
| ·双向电泳研究策略 | 第28-32页 |
| ·蛋白质组学研究方法 | 第29-30页 |
| ·蛋白质组学在水稻中的应用 | 第30-31页 |
| ·展望 | 第31-32页 |
| ·博士论文立题依据与研究策略 | 第32-34页 |
| ·研究背景 | 第32-33页 |
| ·研究内容与研究策略 | 第33页 |
| ·科学目标 | 第33-34页 |
| 第二章 OsRMC 基因的克隆和表达分析 | 第34-57页 |
| 第一节 材料与方法 | 第34-50页 |
| 1. 实验材料 | 第34-35页 |
| ·植物材料 | 第34页 |
| ·质粒和菌种 | 第34页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第34-35页 |
| ·仪器设备 | 第35页 |
| 2. 方法 | 第35-50页 |
| ·相关基本分子生物学操作 | 第35-37页 |
| ·细菌的培养和菌种的保存 | 第35页 |
| ·大肠杆菌热击转化感受态的制备和转化 | 第35-36页 |
| ·质粒抽提 | 第36页 |
| ·核酸电泳 | 第36-37页 |
| ·凝胶回收 | 第37页 |
| ·农杆菌电击感受态制备和转化 | 第37页 |
| ·双向电泳 | 第37-41页 |
| ·蛋白的提取 | 第37-38页 |
| ·电泳 | 第38-40页 |
| ·凝胶图象分析 | 第40页 |
| ·蛋白质胶内消化 | 第40-41页 |
| ·差异蛋白的肽质量指纹谱分析 | 第41页 |
| ·数据检索 | 第41页 |
| ·OsRMC 基因克隆 | 第41-42页 |
| ·水稻Total RNA 的提取 | 第41-42页 |
| ·RT-PCR 分离OsRMC 基因 | 第42页 |
| ·原核表达融合蛋白 | 第42-44页 |
| ·表达载体构建 | 第42-43页 |
| ·GST-OsRMC 融合蛋白的诱导表达 | 第43页 |
| ·GST-OsRMC 蛋白的纯化 | 第43-44页 |
| ·OsRMC 抗体的制备 | 第44页 |
| ·Western blot 分析 | 第44页 |
| ·水稻蛋白的提取 | 第44页 |
| ·蛋白电泳和Western blot 检测 | 第44页 |
| ·OsRMC 表达模式 | 第44-50页 |
| ·RT-PCR 分析OsRMC 组织表达特异性 | 第44-45页 |
| ·DIG 标记探针的原位杂交 | 第45-50页 |
| 第二节 结果与分析 | 第50-57页 |
| 1. 超表达OsRAA1 水稻根的蛋白组分析 | 第50-52页 |
| 2. 基因OsRMC 的克隆和序列分析 | 第52-54页 |
| 3.W estern blot 检测双向电泳的结果 | 第54-55页 |
| ·融合蛋白的原核表达和抗体制备 | 第54-55页 |
| ·Western blot 检测 | 第55页 |
| ·RMC 的表达模式变化 | 第55-57页 |
| ·OsRMC 的表达组织特异性 | 第55-56页 |
| ·RNA 原位杂交 | 第56-57页 |
| 第三章 OsRMC 生理功能研究 | 第57-91页 |
| 第一节 材料与方法 | 第57-76页 |
| 1. 实验材料 | 第57-58页 |
| ·植物材料 | 第57页 |
| ·质粒和菌种 | 第57页 |
| ·工具酶、试剂及主要仪器 | 第57-58页 |
| 2. 实验方法 | 第58-76页 |
| ·载体RNAiOsRMC 对农杆菌的转化 | 第58-59页 |
| ·RNAiOsRMC 载体的构建 | 第58页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第58页 |
| ·重组质粒对农杆菌的转化 | 第58页 |
| ·农杆菌阳性克隆的鉴定 | 第58-59页 |
| ·根癌农杆菌介导的水稻转化 | 第59-60页 |
| ·幼胚愈伤组织的诱导 | 第59页 |
| ·共培养及转化、筛选、分化 | 第59-60页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第60-65页 |
| ·转化植株的组织化学分析 | 第60页 |
| ·转基因水稻植株分子鉴定 | 第60-65页 |
| ·OsRMC-GFP 亚细胞定位 | 第65-66页 |
| ·载体构建 | 第65页 |
| ·载体p81121GFP-OsRMC 对农杆菌的转化 | 第65页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥转化 | 第65-66页 |
| ·OsRMC-GFP 亚细胞定位观察 | 第66页 |
| ·OsRAA1-GFP 亚细胞定位 | 第66-68页 |
| ·pGFP221-OsRAA1 载体构建 | 第66页 |
| ·基因枪轰击 | 第66-68页 |
| ·荧光显微镜观察 | 第68页 |
| ·酵母双杂分析OsRMC 与OsRAA1 的互作 | 第68-72页 |
| ·质粒载体的构建 | 第68页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第68-69页 |
| ·LiAc 介导的质粒向酵母细胞的小规模转化 | 第69-70页 |
| ·半乳糖苷酶活性检测 | 第70-72页 |
| ·转基因水稻的表型观察 | 第72-76页 |
| ·激素及抑制剂处理转基因水稻 | 第72页 |
| ·茉莉酸和生长素对OsRMC 表达的影响 | 第72-73页 |
| ·光照对OsRMC 表达的影响 | 第73页 |
| ·茉莉酸信号转导途径标记基因的RT-PCR | 第73页 |
| ·根向地性分析 | 第73-74页 |
| ·生长素含量的测定 | 第74页 |
| ·PI 染色观察根细胞 | 第74页 |
| ·根尖细胞有丝分裂周期的观察 | 第74页 |
| ·胁迫处理 | 第74-76页 |
| 第二节 结果与分析 | 第76-91页 |
| 1.R NAiOsRMC 转基因水稻表型观察 | 第76-77页 |
| 2. 转基因水稻分子鉴定 | 第77-78页 |
| 3.R NAiOsRMC 转基因水稻初生根表型分析 | 第78-79页 |
| ·转基因水稻根细胞大小的变化 | 第78-79页 |
| ·转基因水稻根尖细胞有丝分裂周期的分析 | 第79页 |
| 4 茉莉酸和生长素对OsRMC 表达的影响 | 第79-85页 |
| ·RNAiOsRMC 转基因水稻根对生长素的响应 | 第80-81页 |
| ·RNAiOsRMC 转基因水稻对茉莉酸的响应 | 第81-85页 |
| ·黑暗条件下根对茉莉酸响应的分析 | 第81-82页 |
| ·光照条件下根对茉莉酸响应的分析 | 第82-83页 |
| ·第二叶鞘对茉莉酸响应的分析 | 第83-84页 |
| ·转基因水稻对茉莉酸信号转导途径和合成途径部分基因的影响 | 第84-85页 |
| 5. RNAiOsRMC 转基因水稻向地性分析 | 第85-86页 |
| 6. RNAiOsRMC 转基因水稻对盐和干旱胁迫的响应变化 | 第86-87页 |
| 7. OsRMC 与OsRAA1 互作分析 | 第87-89页 |
| ·OsRMC-GFP 亚细胞定位 | 第87-88页 |
| ·OsRAA1-GFP 的亚细胞定位 | 第88页 |
| ·OsRMC 与OsRAA1 的酵母双杂 | 第88-89页 |
| 8. 茉莉酸和生长素对水稻根发育影响的比较分析 | 第89-91页 |
| 第四章 讨论 | 第91-96页 |
| 1. OsRMC 是膜定位的蛋白 | 第91页 |
| 2. OsRMC 是茉莉酸信号转导的负调控因子 | 第91-92页 |
| 3. OsRMC 参与根弯曲和卷曲过程的调控 | 第92-93页 |
| 4. 茉莉酸信号转导受生长素信号转导的影响 | 第93-96页 |
| 第五章 论文结论 | 第96-98页 |
| 1. 研究特色与创新之处 | 第96页 |
| 2. 主要结论 | 第96页 |
| 3. 研究展望 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-112页 |
| 附录 | 第112-114页 |
| 个人简介 | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
