| 第一章 文献综述 | 第1-21页 |
| ·抗病毒基因工程的策略 | 第10-15页 |
| ·病毒自身基因介导的抗性及其应用 | 第10-11页 |
| ·CP基因的抗病毒策略 | 第10页 |
| ·病毒复制酶基因介导的抗病性 | 第10-11页 |
| ·利用植物自身的抗病基因介导的策略 | 第11页 |
| ·利用植物源抗病毒活性物质基因 | 第11-12页 |
| ·直接或间接作用于病毒核酸的策略 | 第12-14页 |
| ·病毒反义 RNA(Antisense RNA)介导的病毒抗性 | 第12-13页 |
| ·核酶(Ribozyme，Rz)基因介导的病毒抗性 | 第13-14页 |
| ·sRNA分解酶基因 | 第14页 |
| ·其他的抗病毒基因工程策略 | 第14-15页 |
| ·病毒卫星 RNA(Satellite RNA)介导病毒抗性 | 第14-15页 |
| ·PVY在烟草上的危害 | 第15页 |
| ·PVY的研究进展 | 第15-19页 |
| ·PVY的生物学特性 | 第15-16页 |
| ·PVY株系研究 | 第16-17页 |
| ·PVY转基因抗病育种的研究 | 第17-19页 |
| ·PVY转基因抗病育种的发展前景 | 第19-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-32页 |
| ·材料 | 第21-24页 |
| ·方法 | 第24-32页 |
| ·基本实验方法 | 第24页 |
| ·质粒 DNA的小量提取 | 第24页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第24-25页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第25页 |
| ·根癌农杆菌 LBA4404感受态的制备 | 第25页 |
| ·质粒 DNA的 Kit提取 | 第25-26页 |
| ·重组质粒 DNA转入农杆菌 | 第26页 |
| ·冻融法回收目的基因片段 | 第26页 |
| ·烟草的遗传转化 | 第26-27页 |
| ·转基因植物的 GUS活性检测 | 第27页 |
| ·辣椒 RNA提取 | 第27页 |
| ·反转录合成cDNA | 第27-28页 |
| ·TaKaRa公司的突变试剂盒操作步骤 | 第28-29页 |
| ·eif4E基因 PCR扩增反应条件 | 第29页 |
| ·PCR反应体系 | 第29页 |
| ·北京天根科技有限公司琼脂糖凝胶 DNA回收试剂盒 | 第29-30页 |
| ·含目的基因的农杆菌的鉴定 | 第30页 |
| ·质粒 DNA的大量提取 | 第30-31页 |
| ·TaKaRa pMD 18-T Vector kit | 第31页 |
| ·烟草 DNA的提取 | 第31-32页 |
| 第三章 结果与分析 | 第32-59页 |
| ·eif4E基因的克隆与测序 | 第32-38页 |
| ·利用 RT-PCR方法克隆eif4E基因 | 第32-33页 |
| ·pMD18-T-eif4E载体的构建 | 第33-35页 |
| ·eif4E基因的测序结果与分析 | 第35-38页 |
| ·eif4E-pvr2基因的克隆 | 第38-46页 |
| ·eif4E-pvr2基因的序列分析及突变引物设计 | 第38-40页 |
| ·利用点突变的方法克隆eif4E-pvr2基因 | 第40-42页 |
| ·eif4E-pvr2基因的测序结果 | 第42-46页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第46-54页 |
| ·中间载体pEIFPAK8的构建 | 第46-47页 |
| ·中间载体pEIF4A的构建 | 第47-48页 |
| ·中间载体pEIF121的构建 | 第48-50页 |
| ·植物表达载体pEIF2301的构建 | 第50-51页 |
| ·植物表达载体pmEIF2301的构建 | 第51-54页 |
| ·烟草的遗传转化 | 第54-56页 |
| ·转基因烟草的 GUS检测结果 | 第56-57页 |
| ·转基因烟草的 PCR检测 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-59页 |
| 第四章 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简历 | 第68页 |
