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小麦种质贵农775抗条锈病基因标记的相关片段克隆及荧光原位杂交

摘要第1-12页
Abstract第12-13页
第一章 前言(文献综述)第13-34页
 1. 小麦抗条锈病基因的研究第13-14页
   ·植物的抗病性第13-14页
   ·小麦抗条锈病基因及抗源第14页
 2. 小麦抗条锈病基因遗传研究方法第14-19页
   ·常规杂交法第17页
   ·基因推导法第17-18页
   ·非整倍体法第18页
   ·主效基因与微效基因第18-19页
   ·抗条锈病基因的连锁及显隐性第19页
 3. 异源遗传物质的鉴定第19-20页
   ·形态学标记鉴定第19-20页
   ·生化标记鉴定第20页
   ·细胞学标记鉴定第20页
     ·染色体配对分析第20页
     ·染色体核型分析第20页
     ·染色体分带第20页
 4. 染色体原位杂交技术第20-27页
   ·原位杂交组织化学技术的起源及发展第20-21页
   ·染色体制片技术和探针制备技术的进展第21-24页
     ·染色体制片技术和探针制备技术的发展第21-22页
     ·探针制备技术的进展第22-24页
   ·玻片的处理第24-25页
   ·原位杂交技术在植物研究中的应用第25-27页
     ·应用于中期及间期细胞遗传学分析第26页
     ·染色体结构变异鉴定第26页
     ·检测基因扩增和缺失第26页
     ·基因或者特异性 DNA序列的定位第26-27页
     ·染色体RNA和基因组进化的研究第27页
 5. 分子标记技术第27-30页
   ·限制性片段长度多态性标记(RFLP)第28页
   ·随机扩增多态性DNA标记(RAPD)第28-29页
   ·特征序列扩增区(SCAR)标记技术第29页
   ·扩增片段长度多态性(AFLP)第29-30页
   ·简单序列重复标记(SSR)第30页
 6. 分子标记技术在小麦抗锈病基因研究中的应用第30-32页
 7. 簇毛麦有益基因的利用第32页
 8. 本研究的目的意义、思路和论文设计第32-34页
   ·本研究的目的第32页
   ·研究的主要内容第32-33页
   ·论文设计采取的技术路线第33-34页
第二章 实验材料、方法与实验过程第34-44页
 1. 实验材料与试剂和设备第34-36页
   ·材料第34页
   ·仪器设备第34页
   ·常用溶液与试剂第34-36页
 2. 分子实验方法第36-39页
   ·小麦基因组 DNA提取第36页
   ·DNA检测第36-37页
   ·RAPD标记及克隆、测序、转SCAR的流程第37-39页
     ·特异扩增片段的回收第37-38页
     ·特异性片段的克隆第38-39页
 3. 荧光原位杂交方法第39-44页
   ·簇毛麦基因组 DNA抽提第39页
   ·质粒的少量提取第39-40页
   ·载玻片处理第40页
   ·染色体玻片制备第40-41页
   ·探针的合成第41页
   ·荧光原位杂交和图像分析第41-44页
第三章 结果与分析第44-57页
 1. 贵农775抗条锈病基因的分子标记第44-48页
   ·与抗条锈病基因YrGA连锁的RAPD标记第44页
   ·贵农775抗条锈病基因YrGA的SCAR标记的回检第44-48页
     ·特异片段的回收效果第44页
     ·重组质粒的PCR检测第44-45页
     ·测序与结果分析第45-47页
     ·YrGA的特异引物设计及SCAR标记第47页
     ·SCAR标记与YrGA基因的连锁分析第47-48页
     ·SCAR_(S2018R-s)和 SCAR_(S2018L-1)引物组合与 Pm21C和 Pm21D组合同时检测贵农775和扬麦5号第48页
 2. 贵农775中抗条锈病的特异性分子标记的连锁分析第48-53页
   ·S2018标记的特异性位点与抗病基因YrGA的遗传距离估算第52-53页
   ·SCARs2018RL标记的特异性位点与抗病基因YrGA的遗传距离估算第53页
 3. 荧光原位杂交第53-55页
   ·基因组原位杂交第53页
   ·S2018特异探针与贵农775中期染色体原位杂交第53-55页
 4. 贵农775抗条锈病基因的来源鉴定第55-57页
第四章 结论与讨论第57-61页
 1. 主要结论第57页
 2. 小麦抗病种质贵农775在抗病育种的应用第57-58页
 3. 簇毛麦有益基因在小麦抗病育种中的应用第58页
 4. 遗传距离的估算第58-59页
 5. 关于荧光原位杂交在麦类作物中的应用第59页
 6. 荧光原位杂交试验过程中应注意的要点第59-60页
   ·染色体制片第59页
   ·封阻DNA的用量第59-60页
 7. 荧光原位杂交优化设计第60-61页
   ·染色体制片是关键第60页
   ·硫酸葡聚糖和甲酰胺的用量探索第60页
   ·提高杂交信号检测效率的探索第60-61页
 8. 关于外源遗传物质的鉴定第61页
本研究的创新之处第61-62页
致谢第62-63页
参考文献第63-69页
附录 1第69-70页
附录 2第70-71页

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