摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
第一章 前言(文献综述) | 第13-34页 |
1. 小麦抗条锈病基因的研究 | 第13-14页 |
·植物的抗病性 | 第13-14页 |
·小麦抗条锈病基因及抗源 | 第14页 |
2. 小麦抗条锈病基因遗传研究方法 | 第14-19页 |
·常规杂交法 | 第17页 |
·基因推导法 | 第17-18页 |
·非整倍体法 | 第18页 |
·主效基因与微效基因 | 第18-19页 |
·抗条锈病基因的连锁及显隐性 | 第19页 |
3. 异源遗传物质的鉴定 | 第19-20页 |
·形态学标记鉴定 | 第19-20页 |
·生化标记鉴定 | 第20页 |
·细胞学标记鉴定 | 第20页 |
·染色体配对分析 | 第20页 |
·染色体核型分析 | 第20页 |
·染色体分带 | 第20页 |
4. 染色体原位杂交技术 | 第20-27页 |
·原位杂交组织化学技术的起源及发展 | 第20-21页 |
·染色体制片技术和探针制备技术的进展 | 第21-24页 |
·染色体制片技术和探针制备技术的发展 | 第21-22页 |
·探针制备技术的进展 | 第22-24页 |
·玻片的处理 | 第24-25页 |
·原位杂交技术在植物研究中的应用 | 第25-27页 |
·应用于中期及间期细胞遗传学分析 | 第26页 |
·染色体结构变异鉴定 | 第26页 |
·检测基因扩增和缺失 | 第26页 |
·基因或者特异性 DNA序列的定位 | 第26-27页 |
·染色体RNA和基因组进化的研究 | 第27页 |
5. 分子标记技术 | 第27-30页 |
·限制性片段长度多态性标记(RFLP) | 第28页 |
·随机扩增多态性DNA标记(RAPD) | 第28-29页 |
·特征序列扩增区(SCAR)标记技术 | 第29页 |
·扩增片段长度多态性(AFLP) | 第29-30页 |
·简单序列重复标记(SSR) | 第30页 |
6. 分子标记技术在小麦抗锈病基因研究中的应用 | 第30-32页 |
7. 簇毛麦有益基因的利用 | 第32页 |
8. 本研究的目的意义、思路和论文设计 | 第32-34页 |
·本研究的目的 | 第32页 |
·研究的主要内容 | 第32-33页 |
·论文设计采取的技术路线 | 第33-34页 |
第二章 实验材料、方法与实验过程 | 第34-44页 |
1. 实验材料与试剂和设备 | 第34-36页 |
·材料 | 第34页 |
·仪器设备 | 第34页 |
·常用溶液与试剂 | 第34-36页 |
2. 分子实验方法 | 第36-39页 |
·小麦基因组 DNA提取 | 第36页 |
·DNA检测 | 第36-37页 |
·RAPD标记及克隆、测序、转SCAR的流程 | 第37-39页 |
·特异扩增片段的回收 | 第37-38页 |
·特异性片段的克隆 | 第38-39页 |
3. 荧光原位杂交方法 | 第39-44页 |
·簇毛麦基因组 DNA抽提 | 第39页 |
·质粒的少量提取 | 第39-40页 |
·载玻片处理 | 第40页 |
·染色体玻片制备 | 第40-41页 |
·探针的合成 | 第41页 |
·荧光原位杂交和图像分析 | 第41-44页 |
第三章 结果与分析 | 第44-57页 |
1. 贵农775抗条锈病基因的分子标记 | 第44-48页 |
·与抗条锈病基因YrGA连锁的RAPD标记 | 第44页 |
·贵农775抗条锈病基因YrGA的SCAR标记的回检 | 第44-48页 |
·特异片段的回收效果 | 第44页 |
·重组质粒的PCR检测 | 第44-45页 |
·测序与结果分析 | 第45-47页 |
·YrGA的特异引物设计及SCAR标记 | 第47页 |
·SCAR标记与YrGA基因的连锁分析 | 第47-48页 |
·SCAR_(S2018R-s)和 SCAR_(S2018L-1)引物组合与 Pm21C和 Pm21D组合同时检测贵农775和扬麦5号 | 第48页 |
2. 贵农775中抗条锈病的特异性分子标记的连锁分析 | 第48-53页 |
·S2018标记的特异性位点与抗病基因YrGA的遗传距离估算 | 第52-53页 |
·SCARs2018RL标记的特异性位点与抗病基因YrGA的遗传距离估算 | 第53页 |
3. 荧光原位杂交 | 第53-55页 |
·基因组原位杂交 | 第53页 |
·S2018特异探针与贵农775中期染色体原位杂交 | 第53-55页 |
4. 贵农775抗条锈病基因的来源鉴定 | 第55-57页 |
第四章 结论与讨论 | 第57-61页 |
1. 主要结论 | 第57页 |
2. 小麦抗病种质贵农775在抗病育种的应用 | 第57-58页 |
3. 簇毛麦有益基因在小麦抗病育种中的应用 | 第58页 |
4. 遗传距离的估算 | 第58-59页 |
5. 关于荧光原位杂交在麦类作物中的应用 | 第59页 |
6. 荧光原位杂交试验过程中应注意的要点 | 第59-60页 |
·染色体制片 | 第59页 |
·封阻DNA的用量 | 第59-60页 |
7. 荧光原位杂交优化设计 | 第60-61页 |
·染色体制片是关键 | 第60页 |
·硫酸葡聚糖和甲酰胺的用量探索 | 第60页 |
·提高杂交信号检测效率的探索 | 第60-61页 |
8. 关于外源遗传物质的鉴定 | 第61页 |
本研究的创新之处 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
附录 1 | 第69-70页 |
附录 2 | 第70-71页 |