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环境中雌二醇等微量荷尔蒙物质的免疫分析、化学发光分析研究

中文摘要第1-9页
ABSTRACT第9-21页
第一章 绪论第21-51页
   ·环境荷尔蒙概述第21-28页
     ·环境荷尔蒙概念的产生第21-22页
     ·环境荷尔蒙问题大事年表第22-23页
     ·环境荷尔蒙的危害第23-25页
     ·环境荷尔蒙的作用机制第25页
     ·环境荷尔蒙的种类第25-27页
     ·我国对环境荷尔蒙问题研究的重视第27-28页
   ·目前环境荷尔蒙分析研究的现状及分析检测的发展方向第28-34页
     ·环境荷尔蒙的分析检测现状第28-33页
     ·环境荷尔蒙监测分析的发展方向第33-34页
   ·免疫分析基础第34-40页
     ·免疫分析概述第34-37页
       ·抗体抗原反应特性第34页
       ·抗体作为分析试剂第34-35页
       ·常用的标记免疫分析原理第35-37页
     ·免疫分析检测方法第37-40页
     ·展望第40页
   ·本课题的主要研究内容第40-41页
   ·参考文献第41-51页
第二章 雌二醇完全抗原的合成、抗体的制备第51-65页
   ·引言第51-52页
   ·实验部分第52-56页
     ·仪器与试剂第52-54页
     ·雌二醇半抗原的修饰及完全抗原的制备第54页
     ·雌二醇半抗原衍生物的鉴定第54页
     ·雌二醇半抗原与蛋白质偶联结合物的鉴定第54页
     ·免疫动物实验第54-55页
     ·抗血清效价的测定第55页
     ·抗血清的特异性测定第55-56页
     ·抗血清的纯化第56页
   ·结果与讨论第56-62页
     ·雌二醇-3-羧甲基醚的制备第56-57页
     ·雌二醇-3-羧甲基醚的鉴定第57-58页
     ·雌二醇-3-羧甲基醚-BSA的制备第58页
     ·雌二醇-3-羧甲基醚-BSA结合物的结合比测定第58-59页
     ·免疫动物及抗血清效价的测定第59-60页
     ·抗血清的特异性第60-61页
     ·抗体的纯化与保存第61-62页
   ·小结第62-63页
   ·参考文献第63-65页
第三章 利用生物素-亲合素放大系统电化学酶联免疫分析测定水中雌二醇第65-81页
   ·引言第65-66页
   ·实验部分第66-69页
     ·仪器与试剂第66-67页
     ·缓冲溶液第67-68页
     ·抗体的制备第68页
     ·包被原的制备第68页
     ·生物素化抗体的制备第68-69页
     ·邻苯二胺(OPD)-H_2O_2-HRP伏安分析方法第69页
     ·ECIA测量步骤第69页
   ·结果与讨论第69-76页
     ·邻苯二胺的电化学特性第69-71页
     ·酶催化反应条件及伏安测量条件第71-73页
     ·免疫反应条件第73-74页
     ·免疫测量模式及工作曲线第74-75页
     ·样品分析第75-76页
   ·小结第76页
   ·参考文献第76-81页
第四章 利用免疫反应柱流动注射化学发光免疫分析法测定雌二醇第81-95页
   ·引言第81-82页
   ·实验部分第82-85页
     ·试剂第82页
     ·缓冲溶液第82-83页
     ·抗体的制备第83页
     ·辣根过氧化物酶标记抗体第83-84页
     ·免疫柱的制备第84页
     ·仪器与操作步骤第84-85页
   ·结果与讨论第85-90页
     ·免疫反应模式第85页
     ·流动注射化学发光测量条件第85-87页
     ·免疫反应条件第87-88页
     ·免疫柱的稳定性第88-89页
     ·测定雌二醇的工作曲线第89页
     ·应用第89-90页
   ·小结第90页
   ·参考文献第90-95页
第五章 雌三醇人工抗原的合成、抗体的制备第95-107页
   ·引言第95-96页
   ·实验部分第96-99页
     ·仪器与试剂第96-97页
     ·雌三醇半抗原的修饰及完全抗原的制备第97-98页
     ·雌三醇半抗原衍生物的鉴定第98页
     ·雌三醇半抗原与蛋白质偶联结合物的鉴定第98页
     ·免疫动物实验第98页
     ·抗血清效价的测定第98-99页
     ·抗血清的特异性测定第99页
     ·抗血清的纯化第99页
   ·结果与讨论第99-103页
     ·雌三醇-3-羧甲基醚的制备第99-100页
     ·雌三醇-3-羧甲基醚的鉴定第100-101页
     ·雌三醇-3-羧甲基醚-BSA的制备第101页
     ·雌三醇-3-羧甲基醚-BSA结合物的结合比测定第101页
     ·免疫动物及抗血清效价的测定第101-102页
     ·抗血清的特异性第102-103页
     ·抗体的纯化与保存第103页
   ·小结第103页
   ·参考文献第103-107页
第六章 甲基红-H_2O_2-HRP伏安酶联免疫分析法测定雌三醇第107-119页
   ·引言第107-108页
   ·实验部分第108-111页
     ·仪器与试剂第108-109页
     ·抗体的制备第109页
     ·甲基红(MR)-H_2O_2-HRP伏安分析体系的建立第109-110页
     ·雌三醇的电化学免疫分析测定第110-111页
   ·结果与讨论第111-116页
     ·甲基红的电化学特性第111页
     ·辣根过氧化物酶催化反应条件第111-113页
     ·HRP的测定第113-114页
     ·伏安酶联免疫分析测定雌三醇的条件第114-115页
     ·测定雌三醇的工作曲线第115页
     ·回收率实验第115-116页
     ·样品测定第116页
   ·小结第116-117页
   ·参考文献第117-119页
第七章 流动注射化学发光免疫分析法测定雌三醇第119-131页
   ·引言第119-120页
   ·实验部分第120-123页
     ·试剂第120页
     ·缓冲溶液第120-121页
     ·抗体的制备第121页
     ·包被原的制备第121页
     ·辣根过氧化物酶标抗体的制备第121-122页
     ·免疫柱的制备第122-123页
     ·仪器与操作步骤第123页
   ·结果与讨论第123-126页
     ·免疫反应模式第123-124页
     ·流动注射化学发光测量条件的选择第124页
     ·免疫反应条件的选择第124-125页
     ·免疫反应柱的稳定性第125页
     ·工作曲线与检出限第125-126页
     ·方法应用第126页
   ·小结第126-127页
   ·参考文献第127-131页
第八章 己烯雌酚人工抗原的合成、抗体的制备第131-143页
   ·引言第131-132页
   ·实验部分第132-135页
     ·主要仪器第132页
     ·主要试剂第132-133页
     ·己烯雌酚单羧甲基醚的合成第133页
     ·己烯雌酚单羧甲基醚与载体蛋白的偶联第133-134页
     ·己烯雌酚抗体的制备第134-135页
       ·多克隆抗体的制备第134页
       ·兔血清抗体效价测定第134-135页
       ·兔血清抗体的特异性第135页
   ·结果与讨论第135-140页
     ·己烯雌酚单羧甲基醚半抗原的合成及鉴定第135-137页
     ·己烯雌酚单羧甲基醚与载体蛋白结合及鉴定第137-139页
       ·己烯雌酚单羧甲基醚与载体蛋白结合反应第137-138页
       ·偶联验证第138页
       ·结合比测定第138-139页
     ·抗血清效价的鉴定第139-140页
     ·抗体的特异性第140页
     ·抗体的纯化与保存第140页
   ·小结第140-141页
   ·参考文献第141-143页
第九章 电化学免疫分析方法测定己烯雌酚第143-151页
   ·引言第143-144页
   ·实验部分第144-146页
     ·主要仪器第144页
     ·主要试剂第144-145页
     ·缓冲溶液第145页
     ·抗体的制备第145页
     ·包被原的制备第145页
     ·测定方法第145-146页
   ·结果与讨论第146-149页
     ·免疫反应模式第146页
     ·底物的选择及测量条件第146页
     ·免疫反应条件第146-147页
     ·工作曲线第147-148页
     ·样品分析第148-149页
   ·小结第149页
   ·参考文献第149-151页
第十章 流动注射阻抑化学发光法测定己烯雌酚第151-159页
   ·引言第151-152页
   ·实验部分第152-153页
     ·仪器与试剂第152页
     ·实验方法第152-153页
   ·结果与讨论第153-156页
     ·化学发光反应动力学曲线第153页
     ·反应介质的选择第153页
     ·鲁米诺溶液用量的影响第153-154页
     ·N-溴代丁二酰亚胺用量的影响第154-155页
     ·工作曲线与检出限第155页
     ·共存物质的影响第155页
     ·样品分析第155-156页
   ·小结第156页
   ·参考文献第156-159页
第十一章 双酚A的流动注射化学发光法测定第159-167页
   ·引言第159-160页
   ·实验部分第160-161页
     ·仪器与试剂第160页
     ·实验方法第160-161页
   ·结果与讨论第161-165页
     ·化学发光信号曲线第161-162页
     ·反应介质的选择第162页
     ·鲁米诺溶液浓度的影响第162页
     ·K_3Fe(CN)_6溶液浓度的影响第162-163页
     ·工作曲线与检出限第163页
     ·干扰实验第163页
     ·样品分析第163-164页
     ·化学发光反应机理初探第164-165页
   ·小结第165页
   ·参考文献第165-167页
第十二章 双酚A完全抗原、抗体的制备及ECIA方法的建立第167-177页
   ·引言第167-168页
   ·实验部分第168-171页
     ·主要仪器第168页
     ·主要试剂第168-169页
     ·完全抗原的制备及鉴定第169页
     ·双酚A抗体的制备第169-170页
       ·多克隆抗体的制备第169-170页
       ·抗血清效价的测定第170页
     ·BPA的免疫分析第170-171页
   ·结果与讨论第171-175页
     ·4,4-二苯基羟基戊酸与载体蛋白结合反应第171-172页
     ·偶联验证第172页
     ·结合比测定第172页
     ·抗血清的效价鉴定第172-173页
     ·抗血清的特异性第173页
     ·抗血清的免疫分析法应用第173-175页
       ·免疫反应条件第173页
       ·工作曲线第173-175页
       ·血清及桶装纯净水中BPA的测定第175页
   ·小结第175页
   ·参考文献第175-177页
第十三章 增强化学发光酶免疫分析法测定双酚A第177-185页
   ·引言第177-178页
   ·实验部分第178-180页
     ·仪器与试剂第178-179页
     ·实验方法第179-180页
       ·包被原的制备第179页
       ·抗双酚A抗体的制备第179页
       ·化学发光测定方法的建立第179页
       ·双酚A的测定第179-180页
   ·结果与讨论第180-183页
     ·化学发光反应条件的选择第180-181页
     ·抗BPA抗血清浓度的选择第181-182页
     ·IgG-HRP稀释比的选择第182页
     ·BPA测定的工作曲线及检出限第182-183页
     ·水样中BPA的测定第183页
   ·小结第183-184页
   ·参考文献第184-185页
总结第185-187页
攻读博士学位期间已发表或待发表的学术论文第187-191页
致谢第191页

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