| 缩写词 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-39页 |
| 1 植物体胚发生的生理生化与分子生物学研究进展 | 第15-22页 |
| ·研究植物体细胞胚胎发生生理生化与分子生物学的意义 | 第15-16页 |
| ·植物体胚发生的生理生化与分子生物学研究进展 | 第16-22页 |
| 2 植物基因同源克隆的原理和方法 | 第22-26页 |
| ·PCR扩增克隆 | 第22页 |
| ·文库筛选 | 第22页 |
| ·RACE法 | 第22-24页 |
| ·同源基因序列的搜寻 | 第24-25页 |
| ·PCR引物的设计 | 第25-26页 |
| 3 APX的研究进展 | 第26-37页 |
| ·APX作用的机理 | 第27-28页 |
| ·抗坏血酸——谷光甘肽循环活性氧清除机制实现的条件 | 第28-29页 |
| ·胁迫对APX活性的影响 | 第29页 |
| ·酶活性调节的方式 | 第29页 |
| ·分子克隆信息 | 第29-31页 |
| ·同工酶的情况 | 第31-35页 |
| ·多基因家族、等位基因? | 第35页 |
| ·转基因植物中APX大量表达的结果 | 第35-36页 |
| ·转基因植物反义表达 | 第36页 |
| ·APX与体胚的关系 | 第36-37页 |
| ·今后研究展望 | 第37页 |
| 4 龙眼体胚发生研究的现况 | 第37页 |
| 5.本研究的主要内容及目的 | 第37-39页 |
| 第二章 龙眼体胚发生的同步化调控及其生物大分子的动态变化 | 第39-50页 |
| 第一节 龙眼体胚发生的同步化调控 | 第39-40页 |
| 1 材料与方法 | 第39页 |
| ·供试材料 | 第39页 |
| ·方法 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-40页 |
| 第二节 龙眼体胚发生发育过程中生物大分子的动态变化 | 第40-50页 |
| 1 材料与方法 | 第40-44页 |
| ·供试材料 | 第40-41页 |
| ·试样采集 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-50页 |
| ·淀粉含量的变化 | 第44页 |
| ·核酸、蛋白质的变化 | 第44页 |
| ·生物大分子合成的顺序 | 第44页 |
| ·酶代谢 | 第44-50页 |
| 第三章 龙眼体胚发生过程中APX活性的变化 | 第50-57页 |
| 第一节 龙眼体胚发生过程中APX活性的变化 | 第50-53页 |
| 1 材料与方法 | 第50-51页 |
| ·供试材料 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-53页 |
| ·龙眼体胚发生发育过程中的APX酶活性 | 第51-53页 |
| ·H_2O_2的浓度与酶活性、龙眼体胚APX同工酶的关系 | 第53页 |
| ·初酶液的稳定性 | 第53页 |
| ·龙眼体胚APX活性测定时应注意的事项 | 第53页 |
| 第二节 温度条件对龙眼胚性培养物的APX活性的影响 | 第53-57页 |
| 1 材料与方法 | 第54页 |
| ·供试材料 | 第54页 |
| ·方法 | 第54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-57页 |
| ·不同温度下酶活性 | 第54-55页 |
| ·龙眼体胚APX至少存在叶绿体型和胞浆型两种同工酶 | 第55页 |
| ·高温可诱导APX的表达 | 第55页 |
| ·试验的温度对比设计时的阀值设定 | 第55-57页 |
| 第四章 龙眼胞浆型APX 3′末端序列的同源克隆 | 第57-74页 |
| 第一节 龙眼愈伤组织RNA的提取与分离 | 第57-60页 |
| 1 材料与方法 | 第57-58页 |
| ·供试材料 | 第57页 |
| ·试剂 | 第57页 |
| ·龙眼愈伤组织总RNA的提取方法 | 第57-58页 |
| 2 结果分析 | 第58-60页 |
| ·龙眼胚性愈伤组织总RNA的提取结果 | 第58页 |
| ·紫外透射仪检测RNA浓度的结果 | 第58页 |
| ·RNA的基础知识,提取时的注意事项 | 第58-60页 |
| 第二节 龙眼胞浆型APX3′末端序列的同源克隆 | 第60-74页 |
| 1 材料与试剂 | 第60-61页 |
| ·材料 | 第60页 |
| ·菌株与试剂 | 第60-61页 |
| 2 方法 | 第61-68页 |
| ·龙眼胞浆型APX 3′末端序列的获得 | 第61-64页 |
| ·PCR扩增的目的片段的回收 | 第64页 |
| ·回收片段的连接 | 第64页 |
| ·连接产物的转化 | 第64-66页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第66-67页 |
| ·插入片段的质粒检测 | 第67-68页 |
| ·测序 | 第68页 |
| 3 结果与分析 | 第68-74页 |
| ·龙眼胞浆型APX 3′末端序列的获得 | 第68-69页 |
| ·扩增产物的克隆和重组子的筛选 | 第69页 |
| ·克隆片段的测序及分析 | 第69-70页 |
| ·龙眼APX序列Blast的结果 | 第70页 |
| ·龙眼cAPX酶切位点分析 | 第70-71页 |
| ·龙眼cAPX编码蛋白质序列的推导 | 第71页 |
| ·龙眼体胚胞浆型APX克隆的意义 | 第71页 |
| ·APX进化上的保守性 | 第71-72页 |
| ·龙眼体胚胞浆型APX今后的应用 | 第72-74页 |
| 第五章 讨论 | 第74-77页 |
| 1 APX在植物体胚发生过程中的作用 | 第74-75页 |
| ·龙眼不同阶段胚性培养物APX的表达与其酶活性的关系 | 第74页 |
| ·温度对龙眼胚性培养物APX活性的影响 | 第74页 |
| ·APX同工酶问题 | 第74-75页 |
| 2 龙眼胞浆型APX克隆中存在的难点和解决方法 | 第75-76页 |
| 3 龙眼体胚APX今后的研究与应用展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-88页 |
| 附录1 | 第88-92页 |
| 附录2 | 第92-97页 |
| 附录3 | 第97-106页 |
| 附录4 | 第106-108页 |
| 附录5 | 第108-110页 |
| 致谢 | 第110页 |