缩写词及专用名词 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
文献综述 | 第10-24页 |
1.常用的目的基因克隆技术 | 第10-11页 |
2.图位克隆技术的原理 | 第11-13页 |
3.大片段DNA插入文库(Large Size insert genomic library)发展史 | 第13-16页 |
4.TAC文库研究进展 | 第16-22页 |
5.本论文立题依据、研究内容、技术路线 | 第22-24页 |
材料和方法 | 第24-35页 |
1.实验材料 | 第24页 |
2.实验方法 | 第24-35页 |
·质粒质量检测 | 第24-26页 |
·质粒载体的酶切及脱磷酸化 | 第26-27页 |
·高分子量核DNA的制备 | 第27-33页 |
·细胞核的分离 | 第27-28页 |
·细胞核的低溶点琼脂糖胶块包埋 | 第28页 |
·胶块裂 | 第28页 |
·含高分子量核DNA的琼脂糖胶块清洗 | 第28-29页 |
·含高分子量核DNA的琼脂糖胶块质量检测、纯化及保存 | 第29页 |
·部分酶切最佳酶用量的确定 | 第29-30页 |
·高分子量核DNA大量酶切 | 第30页 |
·电洗脱 | 第30-32页 |
·DNA浓缩 | 第32-33页 |
·大片段DNA与载体DNA的连接和转化 | 第33-35页 |
·大片段DNA与载体DNA的连接 | 第33页 |
·连接产物的转化 | 第33-34页 |
·TAC克隆保存 | 第34页 |
·重组克隆的分析 | 第34-35页 |
实验结果与分析 | 第35-44页 |
1.pYLTAC17载体检测 | 第35-38页 |
·载体制备 | 第35-36页 |
·载体检测 | 第36-38页 |
·质粒载体的酶切及脱磷酸化 | 第38页 |
2.高分子量核DNA的制备 | 第38-40页 |
·细胞核液镜检与定浓度 | 第38-39页 |
·含高分子量核DNA的琼脂糖胶块质量检测、纯化 | 第39-40页 |
3.大量部分酶切最佳条件的确定 | 第40-42页 |
4.大片段DNA的连接与转化 | 第42-44页 |
讨论 | 第44-46页 |
1.TAC载体优势 | 第44页 |
2.高效TAC文库构建体系的建立 | 第44-45页 |
3.对实验过程的优化 | 第45-46页 |
结论 | 第46-47页 |
附录 | 第47-52页 |
参考文献 | 第52-62页 |
个人简历 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |