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TGEV含A、D抗原位点S基因片断的真核表达

摘要第1-8页
Abstract第8-9页
1 前言第9-19页
   ·病毒的一般生物学第9-10页
     ·形态学特征第9页
     ·理化特征第9-10页
     ·TGEV 生物学特征第10页
   ·分子生物学特性研究进展第10-15页
     ·TGEV 基因组结构及其表达方式第10-12页
     ·非结构蛋白第12-13页
     ·结构蛋白第13-15页
   ·TGEV S 蛋白在制备诊断和疫苗制品的应用价值第15-18页
     ·S 蛋白在制备诊断制品上的应用第15-17页
     ·TGEV S 蛋白在的疫苗制品上的应用第17-18页
   ·本研究的目的和意义第18-19页
2 材料与方法第19-29页
   ·材料第19-21页
     ·病毒与细胞第19页
     ·质粒与菌种第19页
     ·实验动物第19页
     ·抗体试剂第19页
     ·引物第19页
     ·主要试剂第19-20页
     ·主要仪器设备第20-21页
   ·实验方法第21-29页
     ·S_1 基因的PCR 扩增及纯化第21-22页
     ·纯化后目的片断与pMD–18T 载体连接及鉴定第22-23页
     ·S_1 基因真核表达转移载体的构建第23-25页
     ·S_1 基因在昆虫细胞中的表达第25-27页
     ·动物免疫及ELISA 检测第27-29页
3 结果第29-34页
   ·TGEV S_1 基因的扩增第29页
   ·重组克隆载体质粒pMD18-T-S_1 的酶切及PCR 鉴定第29-30页
   ·重组质粒pMel-Bac C-S_1 的酶切及PCR 鉴定第30页
   ·TGEV S_1 基因的真核表达第30-33页
     ·重组病毒的获得第30-31页
     ·重组pMel-Bac C-S_1 病毒的纯化第31-32页
     ·S_1 基因表达产物的SDS-PAGE 分析第32页
     ·TGEV S 蛋白表达产物的含量测定第32-33页
     ·S_1 蛋白表达产物的Western-blot 分析第33页
   ·ELISA 检测第33-34页
     ·间接ELISA 检测抗原第33页
     ·间接ELISA 检测抗体第33-34页
4 讨论第34-37页
   ·目的基因片段的选择第34页
   ·S 基因A,D 抗原位点在昆虫表达系统中的表达第34-35页
   ·重组S 蛋白的免疫原性和反应原性第35-37页
5 结论第37-38页
参考文献第38-44页
附录第44-47页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第47-48页
致谢第48页

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