摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1 前言 | 第9-19页 |
·病毒的一般生物学 | 第9-10页 |
·形态学特征 | 第9页 |
·理化特征 | 第9-10页 |
·TGEV 生物学特征 | 第10页 |
·分子生物学特性研究进展 | 第10-15页 |
·TGEV 基因组结构及其表达方式 | 第10-12页 |
·非结构蛋白 | 第12-13页 |
·结构蛋白 | 第13-15页 |
·TGEV S 蛋白在制备诊断和疫苗制品的应用价值 | 第15-18页 |
·S 蛋白在制备诊断制品上的应用 | 第15-17页 |
·TGEV S 蛋白在的疫苗制品上的应用 | 第17-18页 |
·本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-29页 |
·材料 | 第19-21页 |
·病毒与细胞 | 第19页 |
·质粒与菌种 | 第19页 |
·实验动物 | 第19页 |
·抗体试剂 | 第19页 |
·引物 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19-20页 |
·主要仪器设备 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-29页 |
·S_1 基因的PCR 扩增及纯化 | 第21-22页 |
·纯化后目的片断与pMD–18T 载体连接及鉴定 | 第22-23页 |
·S_1 基因真核表达转移载体的构建 | 第23-25页 |
·S_1 基因在昆虫细胞中的表达 | 第25-27页 |
·动物免疫及ELISA 检测 | 第27-29页 |
3 结果 | 第29-34页 |
·TGEV S_1 基因的扩增 | 第29页 |
·重组克隆载体质粒pMD18-T-S_1 的酶切及PCR 鉴定 | 第29-30页 |
·重组质粒pMel-Bac C-S_1 的酶切及PCR 鉴定 | 第30页 |
·TGEV S_1 基因的真核表达 | 第30-33页 |
·重组病毒的获得 | 第30-31页 |
·重组pMel-Bac C-S_1 病毒的纯化 | 第31-32页 |
·S_1 基因表达产物的SDS-PAGE 分析 | 第32页 |
·TGEV S 蛋白表达产物的含量测定 | 第32-33页 |
·S_1 蛋白表达产物的Western-blot 分析 | 第33页 |
·ELISA 检测 | 第33-34页 |
·间接ELISA 检测抗原 | 第33页 |
·间接ELISA 检测抗体 | 第33-34页 |
4 讨论 | 第34-37页 |
·目的基因片段的选择 | 第34页 |
·S 基因A,D 抗原位点在昆虫表达系统中的表达 | 第34-35页 |
·重组S 蛋白的免疫原性和反应原性 | 第35-37页 |
5 结论 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-44页 |
附录 | 第44-47页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第47-48页 |
致谢 | 第48页 |