| 引言 | 第1-9页 |
| 材料与方法 | 第9-19页 |
| 1 主要材料 | 第9-11页 |
| ·菌株和质粒 | 第9页 |
| ·酶和试剂 | 第9页 |
| ·主要仪器设备 | 第9-10页 |
| ·引物设计及合成 | 第10页 |
| ·培养基 | 第10-11页 |
| 2 主要方法 | 第11-19页 |
| ·运动发酵单胞菌的复苏培养及菌种保存 | 第11页 |
| ·运动发酵单胞菌基因组DNA 的制备 | 第11-12页 |
| ·聚合酶链反应 | 第12-13页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第13-14页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第14页 |
| ·adhB 基因片段TA 克隆构建重组质粒pGEMA | 第14-17页 |
| ·adhB 置换ldh 构建重组质粒pMDLA | 第17-19页 |
| 实验结果 | 第19-21页 |
| 1 PCR 法扩增得到adhB 基因片段 | 第19页 |
| 2 重组质粒pGEMA 的构建及鉴定 | 第19页 |
| 3 反向PCR 法诱导ldh 基因缺失突变 | 第19页 |
| 4 重组质粒pMDLA 的构建和鉴定 | 第19-21页 |
| 讨论 | 第21-27页 |
| 1 反向PCR 法在诱导ldh 缺失突变中的应用 | 第21-23页 |
| 2 酶切位点的设计 | 第23-24页 |
| 3 运动发酵单胞菌在医学领域中应用的扩展 | 第24-27页 |
| 结论 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-32页 |
| 附图和附表 | 第32-38页 |
| 中文摘要 | 第38-40页 |
| 英文摘要 | 第40-43页 |
| 附录综述 | 第43-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 导师及作者简介 | 第52-53页 |