| 第一章 前言 | 第1-19页 |
| 1. 冠状病毒的概述 | 第9-11页 |
| ·冠状病毒分类 | 第10页 |
| ·人类的冠状病毒感染 | 第10-11页 |
| 2. SARS-CoV的分子生物学 | 第11-19页 |
| ·SARS冠状病毒的形态学 | 第11页 |
| ·SARS冠状病毒基因组学研究 | 第11-12页 |
| ·SARS冠状病毒相关蛋白的研究 | 第12-16页 |
| ·SARS冠状病毒入侵宿主细胞 | 第16-17页 |
| ·SARS的临床表现、诊断与治疗 | 第17-19页 |
| 第二章 材料 | 第19-21页 |
| 第三章 方法 | 第21-32页 |
| 1. SARS病毒刺突蛋白S2基因片段表达载体的构建 | 第21-24页 |
| 2. SARS刺突蛋白片段在大肠杆菌中的表达 | 第24-26页 |
| ·S_2蛋白的诱导表达 | 第24页 |
| ·包涵体的洗涤、裂解 | 第24-25页 |
| ·层析纯化 | 第25页 |
| ·脱盐 | 第25页 |
| ·Western Blot检测 | 第25-26页 |
| 3. 研究用乳糖替代IPTG在工程菌的发酵过程中作为诱导剂的影响因素 | 第26-27页 |
| ·乳糖诱导浓度的确定 | 第26页 |
| ·甘油和葡萄糖作为碳源时对乳糖、异乳糖诱导效果的影响 | 第26-27页 |
| ·使用乳糖作为诱导剂在发酵罐中高效表达S_2蛋白 | 第27页 |
| 4. 抗SARS S2单克隆抗体的制备 | 第27-32页 |
| ·所需试剂的配制 | 第27-29页 |
| ·免疫程序及细胞融合 | 第29-30页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株的筛选 | 第30-31页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株的克隆化 | 第31页 |
| ·抗SARS S_2单克隆抗体的检测 | 第31-32页 |
| 第四章 结果 | 第32-45页 |
| 1. SARS病毒刺突蛋白S2基因片段表达载体的构建 | 第32-35页 |
| ·SARS刺突蛋白S2基因片段的扩增结果 | 第32-33页 |
| ·酶切法验证所构建的表达载体 | 第33-34页 |
| ·SARS S_2基因测序结果 | 第34-35页 |
| 2. SARS刺突蛋白片段在大肠杆菌中的表达 | 第35-39页 |
| ·诱导表达的S_2蛋白的SDS-PAGE分析 | 第35-36页 |
| ·诱导表达的S_2蛋白在细胞内以包涵体形式存在 | 第36页 |
| ·包涵体的洗涤、裂解 | 第36-37页 |
| ·DEAE-Sepharose FF离子交换层析纯化S_2蛋白 | 第37-38页 |
| ·脱盐 | 第38页 |
| ·大肠杆菌表达SARS S_2蛋白的免疫印迹分析 | 第38-39页 |
| 3. 研究用乳糖替代IPTG在工程菌的发酵过程中作为诱导剂的影响因素 | 第39-43页 |
| ·乳糖诱导浓度的确定 | 第39-40页 |
| ·不同碳源对乳糖和异乳糖的诱导作用的不同影响. | 第40-42页 |
| ·使用乳糖在发酵罐中诱导表达目的蛋白 | 第42-43页 |
| 4. 抗SARS S_2单克隆抗体的制备 | 第43-45页 |
| ·抗SARS S_2单克隆抗体的筛选 | 第43-44页 |
| ·抗SARS S_2单克隆抗体的检测 | 第44-45页 |
| 第五章 讨论 | 第45-56页 |
| 1. SARS病毒刺突蛋白片段基因的选择 | 第45-48页 |
| 2. 目的蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第48-49页 |
| 3. 诱导剂的选择与优化 | 第49-52页 |
| 4. 表达产物的纯化 | 第52-53页 |
| 5. SARS S2蛋白片段血清学鉴定 | 第53-54页 |
| 6. 抗SARS刺突蛋白单克隆抗体 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 中文摘要 | 第63-65页 |
| 英文摘要 | 第65-69页 |
| 致谢 | 第69-71页 |
| 导师简介 | 第71-72页 |
| 作者简介 | 第72页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文及参与的科研课题 | 第72页 |
