神经致幻型毒菌205(Psilocybe sp.)的初步鉴定及生物学特性研究
| 中文摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第一章 研究综述 | 第12-27页 |
| 1 有关毒菌 | 第12页 |
| 2 神经致幻型毒菌 | 第12-17页 |
| ·神经致幻型毒菌的种类与分布 | 第13-14页 |
| ·神经致幻型毒菌的研究和人工驯化 | 第14-15页 |
| ·神经致幻型毒的应用 | 第15-17页 |
| 3 真菌的分类研究 | 第17-23页 |
| ·传统的真菌分类 | 第17-18页 |
| ·核酸技术在真菌分类与鉴定中的作用 | 第18-23页 |
| ·研究对象 | 第18-19页 |
| ·DNA分子标记技术 | 第19-21页 |
| ·序列测定 | 第21-23页 |
| ·分子性状的定量计算与进化树构建 | 第23页 |
| 4 有关裸盖伞 | 第23-26页 |
| ·裸盖伞的分类地位 | 第23-24页 |
| ·裸盖伞的种类及分布 | 第24-25页 |
| ·裸盖伞物种的特征 | 第25页 |
| ·目前对裸盖伞研究存在的问题 | 第25-26页 |
| 5 本论文立题意义及研究的主要内容 | 第26-27页 |
| 第二章 菌种的初步鉴定 | 第27-39页 |
| 第一节 205及其混生菌的分离纯化 | 第27-32页 |
| 1 材料和方法 | 第27-28页 |
| ·供试菌株 | 第27页 |
| ·供试培养基 | 第27页 |
| ·分离前的主要工作 | 第27页 |
| ·分离纯化方法 | 第27-28页 |
| ·菌落培养观察 | 第28页 |
| ·菌丝体制样及染色 | 第28页 |
| ·染样镜检及显微照相 | 第28页 |
| 2 结果 | 第28-29页 |
| ·利用菌丝片段分离法分纯的结果 | 第28页 |
| ·纯培养物的菌落特征 | 第28-29页 |
| ·205的菌落特征 | 第28-29页 |
| ·点枝顶孢的菌落特征 | 第29页 |
| 3 讨论 | 第29-32页 |
| ·确定为205的依据 | 第29页 |
| ·菌丝片段分离法的原理 | 第29页 |
| ·单孢分离法对同属中其他种类的影响 | 第29-32页 |
| 第二节 经典分类学方法鉴定205 | 第32-39页 |
| 1 材料与方法 | 第33页 |
| ·研究材料 | 第33页 |
| ·方法 | 第33页 |
| ·培养皿特征观察 | 第33页 |
| ·子实体特征观察 | 第33页 |
| ·超微结构观察 | 第33页 |
| ·超微结构的观察 | 第33页 |
| 2 结果 | 第33-34页 |
| ·菌丝形态特征 | 第33页 |
| ·子实体特征 | 第33-34页 |
| ·显微结构和扫描电镜结果 | 第34页 |
| 3 讨论 | 第34-39页 |
| 第三章 205的分子鉴定 | 第39-56页 |
| 1 材料与方法 | 第39-40页 |
| ·实验材料 | 第39页 |
| ·菌丝体培养 | 第39页 |
| ·仪器设备 | 第39-40页 |
| ·试剂盒 | 第40页 |
| 2 研究方法 | 第40-43页 |
| ·205基因组DNA的提取 | 第40页 |
| ·ITS区域特异性PCR扩增 | 第40-41页 |
| ·引物及引物序列 | 第40-41页 |
| ·PCR扩增体系 | 第41页 |
| ·PCR产物的凝胶回收纯化 | 第41页 |
| ·PCR产物的T/A克隆和转化 | 第41-42页 |
| ·克隆体系 | 第41页 |
| ·CaCl_2法制备感受态细胞 | 第41-42页 |
| ·转化 | 第42页 |
| ·PCR验证重组质粒 | 第42-43页 |
| ·PCR扩增产物测序 | 第43页 |
| 3 结果与讨论 | 第43-55页 |
| ·PCR扩增结果分析 | 第43-44页 |
| ·菌落PCR验证插入片段大小 | 第44页 |
| ·双酶切验证阳性克隆 | 第44-45页 |
| ·DNA序列数据的分析 | 第45页 |
| ·BLAST分析 | 第45-55页 |
| 4 本章小结与讨论 | 第55-56页 |
| 第四章 纯化205的生物学特性研究 | 第56-64页 |
| 1 材料和方法 | 第56页 |
| ·供试菌株 | 第56页 |
| ·仪器设备 | 第56页 |
| ·培养基 | 第56页 |
| 2 菌丝体生长量的测定方法 | 第56-57页 |
| ·测菌丝干重 | 第56页 |
| ·测平板菌丝直径 | 第56页 |
| ·试验方法 | 第56-57页 |
| ·最适温度的确定 | 第56页 |
| ·最适初始pH的确定 | 第56-57页 |
| ·最佳氮源的确定 | 第57页 |
| ·最佳碳源的确立 | 第57页 |
| ·最佳碳氮比(C/N)的研究 | 第57页 |
| ·无机盐对菌丝体生长的影响 | 第57页 |
| 3 结果 | 第57-62页 |
| ·最适生长温度 | 第58页 |
| ·最适pH | 第58-59页 |
| ·最适氮源 | 第59-60页 |
| ·最适碳源 | 第60-61页 |
| ·最佳碳氮比(C/N)的研究 | 第61-62页 |
| ·四种无机盐对菌丝体生长的影响 | 第62页 |
| 4 讨论 | 第62-63页 |
| 5 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 在读期间发表文章 | 第68页 |