播娘蒿抗寒基因COR的克隆及其生物信息学分析与表达研究
| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-14页 |
| 第一章 播娘蒿抗寒基因DsCOR基因的克隆 | 第14-27页 |
| 1.材料与方法 | 第14-21页 |
| ·材料 | 第14-16页 |
| ·实验用种子 | 第14页 |
| ·菌种和克隆载体、试剂盒、工具酶和其它试剂 | 第14-16页 |
| ·引物和测序 | 第16页 |
| ·方法 | 第16-21页 |
| ·材料的培养 | 第16页 |
| ·播娘蒿总RNA的提取 | 第16页 |
| ·引物设计 | 第16-17页 |
| ·播娘蒿DsCOR EST片段的克隆 | 第17-19页 |
| ·播娘蒿抗寒基因DsCOR的克隆 | 第19-21页 |
| ·3’RACE | 第19-20页 |
| ·5’RACE | 第20-21页 |
| 2.结果 | 第21-24页 |
| ·播娘蒿总RNA的提取结果 | 第21-22页 |
| ·简并引物扩增的结果 | 第22-23页 |
| ·3’RACE的结果 | 第23-24页 |
| ·5’RACE的结果 | 第24页 |
| 3.讨论 | 第24-27页 |
| ·播娘蒿DsCOR基因简并引物的设计 | 第24-25页 |
| ·总RNA的提取 | 第25页 |
| ·播娘蒿DsCOR的克隆 | 第25-26页 |
| ·转化效率的提高 | 第26-27页 |
| 第二章 播娘蒿DsCOR序列结构分析 | 第27-39页 |
| 1.分析方法 | 第27-28页 |
| ·核苷酸序列分析 | 第27页 |
| ·核酸GC含量分布 | 第27页 |
| ·序列相似性比对 | 第27页 |
| ·序列读框分析 | 第27页 |
| ·加A信号位点预测 | 第27页 |
| ·蛋白质序列分析 | 第27-28页 |
| ·蛋白质性质分析 | 第27页 |
| ·蛋白质序列跨膜结构分析 | 第27页 |
| ·二级结构的预测 | 第27-28页 |
| ·信号肽预测 | 第28页 |
| ·叶绿体定位预测 | 第28页 |
| ·蛋白家族分析 | 第28页 |
| ·系统发育分析 | 第28页 |
| 2.结果 | 第28-36页 |
| ·核苷酸序列分析 | 第28-31页 |
| ·核酸GC含量分布 | 第28-29页 |
| ·序列相似性比对 | 第29-30页 |
| ·序列读框分析 | 第30-31页 |
| ·加A信号位点预测 | 第31页 |
| ·蛋白质序列分析 | 第31-36页 |
| ·蛋白质性质分析 | 第31页 |
| ·蛋白质序列跨膜结构分析 | 第31页 |
| ·二级结构的预测 | 第31-34页 |
| ·信号肽预测 | 第34页 |
| ·叶绿体定位预测 | 第34-35页 |
| ·蛋白质家族分析 | 第35页 |
| ·系统发育分析 | 第35-36页 |
| 3.讨论 | 第36-39页 |
| ·加A信号位点预测 | 第36页 |
| ·蛋白家组成的差异 | 第36-38页 |
| ·跨膜结构分析 | 第38页 |
| ·信号肽预测结果分析 | 第38页 |
| ·蛋白家族预测的结果分析 | 第38-39页 |
| 第三章 播娘蒿抗寒基因DsCOR的原核表达 | 第39-52页 |
| 1.材料和方法 | 第39-46页 |
| ·材料 | 第39-41页 |
| ·菌种和载体和工具酶与试剂盒 | 第39页 |
| ·试剂 | 第39-41页 |
| ·引物和测序 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-46页 |
| ·播娘蒿DsCOR基因ORF的克隆 | 第41页 |
| ·表达载体pET32—bx的构建 | 第41-44页 |
| ·融合蛋白的诱导表达及SDS—PAGE检测 | 第44-45页 |
| ·融合蛋白表达条件的确定 | 第45-46页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第46页 |
| 2.结果 | 第46-49页 |
| ·克隆播娘高Usc0R ORF的结果 | 第46-47页 |
| ·表达载体pET32—bx的构建的结果 | 第47页 |
| ·融合蛋白的诱导表达及SDS-PAGE检测 | 第47-48页 |
| ·融合蛋白表达条件的确定 | 第48页 |
| ·融合蛋白纯化的结果 | 第48-49页 |
| 3.讨论 | 第49-52页 |
| ·播娘蒿DsCOR蛋白的作用 | 第49-50页 |
| ·表达载体与受体菌 | 第50页 |
| ·影响目的基因表达的因素 | 第50-52页 |
| 展望 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 声明 | 第55-56页 |
| 综述 | 第56-83页 |
| 参考文献 | 第83-91页 |
| 在校期间学习情况 | 第91页 |
