摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
1 文献综述 | 第10-25页 |
·大豆抗孢囊线虫(SCN)病研究进展 | 第10-14页 |
·大豆孢囊线虫生理小种的划分与分布 | 第10-12页 |
·大豆孢囊线虫生理小种的划分 | 第10-12页 |
·大豆孢囊线虫生理小种的分布 | 第12页 |
·大豆孢囊线虫病的抗性鉴定与防治 | 第12-14页 |
·大豆孢囊线虫的抗性鉴定 | 第12-14页 |
·大豆孢囊线虫病的鉴定方法 | 第12-13页 |
·大豆品种抗孢囊线虫病的鉴定标准 | 第13-14页 |
·大豆孢囊线虫的防治 | 第14页 |
·DNA分子标记在大豆抗孢囊线虫病研究中的应用 | 第14-15页 |
·大豆抗孢囊线虫(SCN)病的遗传学研究 | 第15-18页 |
·分子生物学技术在基因检测中的应用 | 第18-22页 |
·PCR技术 | 第18-21页 |
·PCR技术简述 | 第18-19页 |
·PCR技术的应用 | 第19-21页 |
·PCR在植物病理学中的应用 | 第19页 |
·克隆基因、进行序列分析 | 第19-20页 |
·鉴定抗病基因 | 第20页 |
·病原菌的分类、鉴定 | 第20-21页 |
·病原的检测、鉴定 | 第21页 |
·Southern blotting | 第21-22页 |
·PCR产物克隆的研究现状 | 第22页 |
·本研究的研究意义、研究内容及实验设计 | 第22-25页 |
·本研究的研究意义 | 第22-23页 |
·本研究的研究内容 | 第23-24页 |
·本研究的实验设计 | 第24-25页 |
2 材料和方法 | 第25-35页 |
·试验材料 | 第25页 |
·试验方法 | 第25-35页 |
·田间种植方法 | 第25-26页 |
·大豆基因组DNA提取 | 第26页 |
·PCR实验程序 | 第26-27页 |
·PCR引物 | 第26-27页 |
·PCR反应体系 | 第27页 |
·PCR反应程序 | 第27页 |
·PCR仪器 | 第27页 |
·PCR扩增产物的电泳检测 | 第27页 |
·PCR-Southern杂交 | 第27-32页 |
·杂交溶液的配制 | 第28-29页 |
·所需母液 | 第28页 |
·所需工作液 | 第28-29页 |
·PCR扩增产物的回收 | 第29页 |
·探针的制备 | 第29-30页 |
·转膜和固定 | 第30-31页 |
·分子杂交 | 第31页 |
·免疫检测(显色) | 第31-32页 |
·回收片段克隆 | 第32-34页 |
·感受态细胞的制备 | 第32页 |
·连接 | 第32页 |
·转化 | 第32-33页 |
·重组子筛选 | 第33-34页 |
·菌落筛选 | 第33页 |
·目的DNA片段筛选 | 第33-34页 |
·质粒提取 | 第33-34页 |
·阳性克隆PCR鉴定 | 第34页 |
·阳性克隆双酶切鉴定 | 第34页 |
·目的片段的测序与分析 | 第34页 |
·序列分析 | 第34-35页 |
3 结果与分析 | 第35-44页 |
·大豆基因组DNA电泳图谱与引物筛选分析 | 第35-36页 |
·大豆基因组DNA电泳图谱分析 | 第35页 |
·引物筛选分析 | 第35-36页 |
·大豆品种抗孢囊线虫病的PCR扩增产物的比较分析 | 第36-39页 |
·经常规鉴定的大豆品种PCR对照扩增 | 第36-37页 |
·PCR-Southern杂交结果分析 | 第37-38页 |
·未经常规鉴定的大豆品种的PCR特异扩增产物的分析 | 第38-39页 |
·大豆品种抗孢囊线虫病的PCR特异扩增片段的回收与克隆 | 第39-41页 |
·特异扩增片段的回收与重扩增 | 第39页 |
·连接产物的转化结果 | 第39-40页 |
·重组质粒的筛选与鉴定 | 第40-41页 |
·重组质粒的PCR扩增鉴定结果 | 第40页 |
·阳性克隆的双酶切鉴定结果 | 第40-41页 |
·大豆抗孢囊线虫病的PCR特异扩增片段的测序与分析 | 第41-44页 |
4 讨论与结论 | 第44-47页 |
·应用分子生物学技术进行大豆抗孢囊线虫病检测的意义 | 第44-45页 |
·关于大豆抗孢囊线虫病分子检测体系的建立 | 第45页 |
·关于大豆抗孢囊线虫病抗病相关基因片段的克隆 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
附录1 英汉宿略词 | 第53-54页 |
附录2 部分试剂配方 | 第54-55页 |
附录3 pMD18-T载体及DNA分子量标准参照物 | 第55-56页 |
附录4 甜菜抗孢囊线虫病基因HsI~(pro-1)序列 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |