中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
缩写说明 | 第10-11页 |
1 引言 | 第11-21页 |
·农药残留及其危害 | 第11-13页 |
·农药残留 | 第11-12页 |
·残留危害 | 第12-13页 |
·农药降解的影响因素 | 第13页 |
·微生物在农药降解中的应用 | 第13-16页 |
·农药降解微生物的分离?筛选 | 第14-15页 |
·降解途径与机理 | 第15-16页 |
·降解农药微生物的发展方向 | 第16页 |
·蚊虫抗性酯酶研究进展 | 第16-18页 |
·酯酶与蚊虫抗药性 | 第16-17页 |
·酯酶 B1 与农药降解 | 第17-18页 |
·基因工程与蛋白质工程 | 第18页 |
·决定外源基因表达水平的影响因素 | 第18-21页 |
·原核生物转录水平的影响因素 | 第19页 |
·原核生物翻译水平的影响因素 | 第19-21页 |
2 材料与方法 | 第21-33页 |
·材料 | 第21-22页 |
·菌株与质粒 | 第21页 |
·主要药品及试剂 | 第21-22页 |
·主要仪器 | 第22页 |
·实验方法 | 第22-33页 |
·菌种保存 | 第22页 |
·碱法小量提取质粒DNA | 第22-23页 |
·质粒 pRLdp 的构建与鉴定 | 第23-28页 |
·质粒 pRLdp-B1 的构建(双启动子表达载体) | 第28-29页 |
·工程菌生长曲线测定 | 第29页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白表达状况 | 第29-32页 |
·工程菌表达产物的活性测定 | 第32-33页 |
·工程菌的酶活检测方法 | 第32-33页 |
·工程菌浓度对解毒能力的影响 | 第33页 |
·反应时间对解毒能力的影响 | 第33页 |
3 结果与分析 | 第33-42页 |
·双启动子表达载体的构建及鉴定 | 第33-37页 |
·双启动子表达载体的构建 | 第33-35页 |
·双启动子表达载体的鉴定 | 第35-37页 |
·菌落 PCR 法鉴定阳性克隆 | 第35-36页 |
·阳性克隆的酶切电泳鉴定 | 第36-37页 |
·质粒 pRLdp-B1 的构建与工程菌的鉴定 | 第37-38页 |
·质粒 pRLdp-B1 的构建 | 第37-38页 |
·质粒 pRLdp-B1 的鉴定 | 第38页 |
·工程菌生长曲线测定 | 第38-39页 |
·接种量对酶活的影响 | 第38-39页 |
·工程菌生长曲线测定 | 第39页 |
·酯酶活性分析 | 第39-41页 |
·不同菌液浓度对酯酶活性的影响 | 第39-40页 |
·反应时间对酯酶活性的影响 | 第40-41页 |
·表达产物的 SDS-PAGE 分析 | 第41-42页 |
4 讨论 | 第42-44页 |
·体外重组 | 第42-43页 |
·双启动子表达载体的构建 | 第43-44页 |
·基因工程菌发酵研究 | 第44页 |
5 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
在读期间发表论文 | 第53页 |