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双启动子表达载体的构建以及酯酶B1基因的表达

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-10页
缩写说明第10-11页
1 引言第11-21页
   ·农药残留及其危害第11-13页
     ·农药残留第11-12页
     ·残留危害第12-13页
   ·农药降解的影响因素第13页
   ·微生物在农药降解中的应用第13-16页
     ·农药降解微生物的分离?筛选第14-15页
     ·降解途径与机理第15-16页
     ·降解农药微生物的发展方向第16页
   ·蚊虫抗性酯酶研究进展第16-18页
     ·酯酶与蚊虫抗药性第16-17页
     ·酯酶 B1 与农药降解第17-18页
     ·基因工程与蛋白质工程第18页
   ·决定外源基因表达水平的影响因素第18-21页
     ·原核生物转录水平的影响因素第19页
     ·原核生物翻译水平的影响因素第19-21页
2 材料与方法第21-33页
   ·材料第21-22页
     ·菌株与质粒第21页
     ·主要药品及试剂第21-22页
     ·主要仪器第22页
   ·实验方法第22-33页
     ·菌种保存第22页
     ·碱法小量提取质粒DNA第22-23页
     ·质粒 pRLdp 的构建与鉴定第23-28页
     ·质粒 pRLdp-B1 的构建(双启动子表达载体)第28-29页
     ·工程菌生长曲线测定第29页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白表达状况第29-32页
     ·工程菌表达产物的活性测定第32-33页
       ·工程菌的酶活检测方法第32-33页
       ·工程菌浓度对解毒能力的影响第33页
       ·反应时间对解毒能力的影响第33页
3 结果与分析第33-42页
   ·双启动子表达载体的构建及鉴定第33-37页
     ·双启动子表达载体的构建第33-35页
     ·双启动子表达载体的鉴定第35-37页
       ·菌落 PCR 法鉴定阳性克隆第35-36页
       ·阳性克隆的酶切电泳鉴定第36-37页
   ·质粒 pRLdp-B1 的构建与工程菌的鉴定第37-38页
     ·质粒 pRLdp-B1 的构建第37-38页
     ·质粒 pRLdp-B1 的鉴定第38页
   ·工程菌生长曲线测定第38-39页
     ·接种量对酶活的影响第38-39页
     ·工程菌生长曲线测定第39页
   ·酯酶活性分析第39-41页
     ·不同菌液浓度对酯酶活性的影响第39-40页
     ·反应时间对酯酶活性的影响第40-41页
   ·表达产物的 SDS-PAGE 分析第41-42页
4 讨论第42-44页
   ·体外重组第42-43页
   ·双启动子表达载体的构建第43-44页
   ·基因工程菌发酵研究第44页
5 结论第44-45页
参考文献第45-52页
致谢第52-53页
在读期间发表论文第53页

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