| 文献综述 | 第1-16页 |
| 1 生物素生物合成操纵元基因的研究 | 第10-13页 |
| ·生物素生物合成操纵元的结构 | 第10-11页 |
| ·生物素生物合成操纵元各基因的特点和功能 | 第11页 |
| ·生物素生物合成操纵元的转录和表达 | 第11-12页 |
| ·实验室条件下生物素生物合成操纵元基因的表达效果 | 第12页 |
| ·bioW、bioB基因的高表达抑制菌的生长现象 | 第12-13页 |
| 2 表达系统的研究 | 第13-16页 |
| ·细菌表达系统 | 第13-14页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第13-14页 |
| ·芽孢杆菌表达系统 | 第14页 |
| ·酵母表达系统 | 第14-15页 |
| ·昆虫表达系统 | 第15页 |
| ·哺乳动物细胞表达系统 | 第15-16页 |
| 实验研究 | 第16-46页 |
| 大肠杆菌枯草杆菌穿梭载体的构建及优化 | 第16页 |
| 1 材料与方法 | 第16-34页 |
| ·材料 | 第16-18页 |
| ·菌株和质粒 | 第16页 |
| ·酶和生化试剂 | 第16-17页 |
| ·PCR引物和基因测序 | 第17页 |
| ·表达元件、枯草杆菌bio基因序列 | 第17页 |
| ·核糖体结合位点RBS的序列 | 第17-18页 |
| ·主要仪器设备 | 第18页 |
| ·方法 | 第18-34页 |
| ·枯草芽孢杆菌基因组的提取 | 第18页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第18-19页 |
| ·DNA的胶回收 | 第19页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第19-20页 |
| ·枯草芽孢杆菌电转化感受态细胞的制备及转化 | 第20-21页 |
| ·枯草芽孢杆菌化学感受态的制备及转化 | 第21-22页 |
| ·β－半乳糖苷酶酶活的测定方法 | 第22页 |
| ·蛋白质的SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第22-26页 |
| ·生物素的微生物测定 | 第26-28页 |
| ·生物素的液相分析 | 第28-29页 |
| ·各所需基因或片断的反应体系和反应程序 | 第29-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-44页 |
| ·大肠杆菌枯草杆菌穿梭载体的构建 | 第34-36页 |
| ·大肠杆菌枯草杆菌表达载体GJ01的构建 | 第36-38页 |
| ·载体功能的检测 | 第38-39页 |
| ·表达载体的优化 | 第39-40页 |
| ·枯草芽孢杆菌生物素操纵元基因bioW、bioB表达载体的构建 | 第40-41页 |
| ·bioW、bioB基因的高表达对宿主菌的生长抑制作用 | 第41-44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第44页 |
| ·枯草杆菌中的质粒不稳定性 | 第44页 |
| ·枯草杆菌的转化 | 第44-45页 |
| ·穿梭和表达载体的构建 | 第45页 |
| ·bioW、bioB基因的高表达对宿主菌的生长抑制现象 | 第45-46页 |
| 结 论 | 第46-52页 |
| 致 谢 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
