中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-9页 |
第一章 水稻条纹病毒研究进展 | 第9-19页 |
·病毒粒子形态及传毒介体 | 第9-10页 |
·病毒的理化特性 | 第10-11页 |
·物理特性 | 第10页 |
·化学特性 | 第10-11页 |
·病毒分类地位 | 第11页 |
·病毒的基因组结构、功能及表达策略 | 第11-16页 |
·基因组末端保守序列 | 第11-12页 |
·基因组结构及功能 | 第12-14页 |
·RdRp | 第13页 |
·CP、病害特异性蛋白 | 第13-14页 |
·可能编码运动蛋白的基因片段 | 第14页 |
·病毒的复制与转录机制 | 第14-16页 |
·RSV的基因工程 | 第16页 |
·RSV进化上的亲缘关系 | 第16-18页 |
·RSV病害控制策略 | 第18-19页 |
第二章 单克隆抗体技术及其在植物病毒中的应用 | 第19-38页 |
1 单克隆抗体技术概述 | 第20-30页 |
·抗体的基本结构 | 第20-21页 |
·杂交瘤技术的基本原理 | 第21-23页 |
·杂交瘤技术的基本流程 | 第23-25页 |
·动物免疫 | 第23-24页 |
·细胞融合 | 第24页 |
·杂交瘤细胞的筛选 | 第24-25页 |
·杂交瘤细胞的克隆 | 第25页 |
·单克隆抗体的制备 | 第25页 |
·杂交瘤细胞的冻存 | 第25页 |
·单克隆抗体和多克隆抗体的比较 | 第25-26页 |
·单克隆抗体技术的发展 | 第26-29页 |
·杂交瘤技术的拓展 | 第26-28页 |
·基因工程抗体的发展 | 第28-29页 |
·单克隆抗体的基因工程 | 第29-30页 |
2 单克隆抗体在植物病毒中的应用 | 第30-34页 |
·病害诊断和检测 | 第30-31页 |
·病毒分类与株系鉴定 | 第31-33页 |
·病毒蛋白抗原结构分析 | 第33页 |
·作为探针分析病毒基因产物的功能 | 第33-34页 |
3 植物病毒学中常用的免疫检测技术 | 第34-38页 |
·沉淀法 | 第34-35页 |
·酶联免疫吸附测定法 | 第35-36页 |
·免疫印迹检测 | 第36页 |
·免疫胶体金技术 | 第36页 |
·免疫捕获反转录PCR | 第36-38页 |
第三章 研究目的意义及技术路线 | 第38-40页 |
1 研究目的意义 | 第38-39页 |
2 研究的技术路线 | 第39-40页 |
第四章 材料与方法 | 第40-51页 |
1 材料 | 第40-44页 |
·毒源 | 第40页 |
·灰飞虱 | 第40页 |
·BALB/c小鼠 | 第40页 |
·用于单克隆抗体制备的材料 | 第40-41页 |
·常用缓冲液配方 | 第41-43页 |
·设备与仪器 | 第43-44页 |
2 方法 | 第44-51页 |
·植物病毒的纯化 | 第44-45页 |
·病毒提纯 | 第44-45页 |
·病毒粒子的电镜观察 | 第45页 |
·提纯病毒紫外检测 | 第45页 |
·单克隆抗体的制备及检测方法 | 第45-48页 |
·免疫动物 | 第45-46页 |
·细胞融合及培养 | 第46页 |
·杂交瘤细胞的单克隆化及扩增 | 第46页 |
·杂交瘤细胞株的保存和复苏 | 第46-47页 |
·腹水抗体制备及纯化 | 第47-48页 |
·腹水抗体制备 | 第47页 |
·单抗的纯化 | 第47-48页 |
·酶联免疫吸附分析法 | 第48页 |
·Western blot | 第48-50页 |
·SDS-PAGE | 第48-49页 |
·电转移 | 第49页 |
·Western blot | 第49-50页 |
·酶标抗体的制备及定量测定 | 第50-51页 |
第五章 RSV单克隆抗体的制备及检测应用 | 第51-62页 |
1 材料与方法 | 第51-53页 |
·病毒提纯 | 第51页 |
·单克隆抗体的制备 | 第51页 |
·单克隆抗体效价的测定 | 第51-52页 |
·检测灵敏度测定 | 第52页 |
·单克隆抗体特异性检测 | 第52页 |
·Western blot分析 | 第52页 |
·灰飞虱检测灵敏度的测定 | 第52页 |
·田间灰飞虱带毒率测定 | 第52-53页 |
2 结果与分析 | 第53-60页 |
·病毒提纯 | 第53页 |
·病毒粒子的电镜观察 | 第53页 |
·细胞的融合、杂交瘤细胞的筛选和克隆 | 第53-54页 |
·细胞冻存复苏及腹水抗体的制备 | 第54-55页 |
·单克隆抗体含量测定 | 第55页 |
·单克隆抗体的效价测定 | 第55-56页 |
·单克隆抗体对不同植物病毒特异性测定 | 第56页 |
·单克隆抗体对提纯病毒及病叶的检测灵敏度确定 | 第56-57页 |
·间接ELISA方阵试验测定病叶最佳工作浓度 | 第57-58页 |
·Western blot检测 | 第58页 |
·灰飞虱最佳稀释度的测定 | 第58-59页 |
·大田灰飞虱带毒率的检测 | 第59-60页 |
3 讨论 | 第60-62页 |
第六章 灰飞虱体内RSV检测方法的建立 | 第62-70页 |
1 材料与方法 | 第62-64页 |
·酶标抗体的制备 | 第62页 |
·酶标抗体效价的测定 | 第62页 |
·酶标抗体最佳工作浓度的测定 | 第62-63页 |
·直接与间接ELISA的比较 | 第63页 |
·直接ELISA | 第63页 |
·间接ELISA | 第63页 |
·直接DIBA和间接DIBA | 第63-64页 |
·直接DIBA | 第63-64页 |
·间接DIBA法 | 第64页 |
2 结果与分析 | 第64-69页 |
·酶标抗体的制备 | 第64页 |
·酶标抗体效价的测定 | 第64-65页 |
·直接ELISA方阵试验确定酶标抗体最佳工作浓度 | 第65-67页 |
·直接ELISA与间接ELISA检测结果比较 | 第67页 |
·DIBA最适条件的建立 | 第67-68页 |
·间接DIBA检测灰飞虱体的内RSV | 第67页 |
·直接DIBA检测灰飞虱体内的RSV | 第67-68页 |
·DIBA法检测灰飞虱体内的RSV | 第68页 |
·间接ELISA与直接DIBA对灰飞虱体内RSV的检测 | 第68页 |
·应用直接DIBA法检测田间灰飞虱的带毒率 | 第68-69页 |
3 讨论 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-79页 |
致谢 | 第79页 |