中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
一. 文献综述 | 第9-23页 |
1.1 水稻雄性不育的分子生物学研究进展 | 第9-17页 |
1.1.1 植物雄性不育的现象及其意义 | 第9页 |
1.1.2 植物雄性不育的遗传理论 | 第9-10页 |
1.1.3 水稻雄性不育的细胞生物学基础 | 第10-12页 |
1.1.4 水稻雄性不育的生理生化特征 | 第12-13页 |
1.1.5 水稻线粒体基因组与细胞质雄性不育的研究 | 第13-17页 |
1.2 分子标记技术及其发展状况 | 第17-23页 |
1.2.1 遗传标记的发展及种类 | 第17-19页 |
1.2.2 DNA分子标记的种类和特点 | 第19-20页 |
1.2.3 RAPD的基本原理及其应用 | 第20-23页 |
二. 引言 | 第23-25页 |
三. 实验思路 | 第25-26页 |
四. 材料与方法 | 第26-35页 |
4.1 实验材料 | 第26-29页 |
4.1.1 生物材料 | 第26页 |
4.1.2 主要化学试剂 | 第26页 |
4.1.3 克隆载体及宿主菌 | 第26页 |
4.1.4 主要仪器设备 | 第26-27页 |
4.1.5 主要缓冲液组成及溶液配制 | 第27-29页 |
4.2 实验方法 | 第29-35页 |
4.2.1 水稻线粒体黄化苗的培育 | 第29-30页 |
4.2.2 水稻线粒体DNA的提取 | 第30页 |
4.2.3 水稻线粒体DNA的RAPD条件优化 | 第30页 |
4.2.4 RAPD引物的筛选及差异片段的标记 | 第30-31页 |
4.2.5 特异扩增片段的回收及连接 | 第31页 |
4.2.6 特异扩增片段DNA的克隆 | 第31-32页 |
4.2.7 重组质粒的酶切鉴定 | 第32页 |
4.2.8 重组质粒的PCR鉴定 | 第32页 |
4.2.9 探针制备及Southern杂交分析 | 第32-34页 |
4.2.10 水稻Ⅱ-32不育系,保持系和杂种一代的线粒体RNA的提取 | 第34页 |
4.2.11 探针制备及RNA斑点杂交分析 | 第34页 |
4.2.12 序列测定和分析 | 第34-35页 |
五. 结果与分析 | 第35-46页 |
5.1 水稻线粒体DNA的检测 | 第35页 |
5.2 RAPD条件的优化 | 第35-37页 |
5.3 引物筛选的结果 | 第37-39页 |
5.4 差异片段OPJ18-1000、OPJ18-1400的回收和克隆 | 第39-40页 |
5.5 水稻Ⅱ-32不育系、保持系、杂种一代RNA的提纯 | 第40页 |
5.6 差异片段的组织特异性分析 | 第40-42页 |
5.7 差异片段的测序和序列分析 | 第42-46页 |
六. 讨论 | 第46-50页 |
6.1 影响RAPD反应的因素 | 第46-47页 |
6.2 水稻线粒体RNA的提取 | 第47页 |
6.3 水稻线粒体DNA的提取 | 第47-48页 |
6.4 线粒体DNA与细胞质雄性不育 | 第48页 |
6.5 水稻细胞质雄性不育的深入研究 | 第48-50页 |
七. 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
缩略词表 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
附录 | 第59页 |