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水稻线粒体不育基因RAPD标记筛选、克隆测序及特异性分析

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
一. 文献综述第9-23页
 1.1 水稻雄性不育的分子生物学研究进展第9-17页
  1.1.1 植物雄性不育的现象及其意义第9页
  1.1.2 植物雄性不育的遗传理论第9-10页
  1.1.3 水稻雄性不育的细胞生物学基础第10-12页
  1.1.4 水稻雄性不育的生理生化特征第12-13页
  1.1.5 水稻线粒体基因组与细胞质雄性不育的研究第13-17页
 1.2 分子标记技术及其发展状况第17-23页
  1.2.1 遗传标记的发展及种类第17-19页
  1.2.2 DNA分子标记的种类和特点第19-20页
  1.2.3 RAPD的基本原理及其应用第20-23页
二. 引言第23-25页
三. 实验思路第25-26页
四. 材料与方法第26-35页
 4.1 实验材料第26-29页
  4.1.1 生物材料第26页
  4.1.2 主要化学试剂第26页
  4.1.3 克隆载体及宿主菌第26页
  4.1.4 主要仪器设备第26-27页
  4.1.5 主要缓冲液组成及溶液配制第27-29页
 4.2 实验方法第29-35页
  4.2.1 水稻线粒体黄化苗的培育第29-30页
  4.2.2 水稻线粒体DNA的提取第30页
  4.2.3 水稻线粒体DNA的RAPD条件优化第30页
  4.2.4 RAPD引物的筛选及差异片段的标记第30-31页
  4.2.5 特异扩增片段的回收及连接第31页
  4.2.6 特异扩增片段DNA的克隆第31-32页
  4.2.7 重组质粒的酶切鉴定第32页
  4.2.8 重组质粒的PCR鉴定第32页
  4.2.9 探针制备及Southern杂交分析第32-34页
  4.2.10 水稻Ⅱ-32不育系,保持系和杂种一代的线粒体RNA的提取第34页
  4.2.11 探针制备及RNA斑点杂交分析第34页
  4.2.12 序列测定和分析第34-35页
五. 结果与分析第35-46页
 5.1 水稻线粒体DNA的检测第35页
 5.2 RAPD条件的优化第35-37页
 5.3 引物筛选的结果第37-39页
 5.4 差异片段OPJ18-1000、OPJ18-1400的回收和克隆第39-40页
 5.5 水稻Ⅱ-32不育系、保持系、杂种一代RNA的提纯第40页
 5.6 差异片段的组织特异性分析第40-42页
 5.7 差异片段的测序和序列分析第42-46页
六. 讨论第46-50页
 6.1 影响RAPD反应的因素第46-47页
 6.2 水稻线粒体RNA的提取第47页
 6.3 水稻线粒体DNA的提取第47-48页
 6.4 线粒体DNA与细胞质雄性不育第48页
 6.5 水稻细胞质雄性不育的深入研究第48-50页
七. 结论第50-51页
参考文献第51-57页
缩略词表第57-58页
致谢第58-59页
附录第59页

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