| Ⅰ 前言 | 第1-19页 |
| ·HCV基因组结构及其蛋白功能 | 第7-9页 |
| ·HCV的生活特性 | 第9-10页 |
| ·当前主要的HCV体外细胞复制模型 | 第10-12页 |
| ·当前主要的HCV动物模型 | 第12-13页 |
| ·RNA干扰现象的发现 | 第13-14页 |
| ·RNA干扰的分子机制 | 第14-16页 |
| ·RNA干扰在抗人类恶性病毒方面的研究进展 | 第16-19页 |
| Ⅱ 材料与方法 | 第19-30页 |
| ·材料 | 第19-21页 |
| ·病人血清与细胞 | 第19页 |
| ·质粒和菌株 | 第19页 |
| ·细菌与细胞培养所用溶液 | 第19-20页 |
| ·提取病毒RNA所用的试剂与溶液 | 第20页 |
| ·RT反应所用试剂 | 第20页 |
| ·其他反应所用试剂 | 第20-21页 |
| ·PCR产物的回收，克隆，鉴定所用试剂与溶液 | 第21页 |
| ·碱裂解法小量提质粒试剂 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-30页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第21-22页 |
| ·RT反应 | 第22页 |
| ·引物设计与合成 | 第22-23页 |
| ·PCR反应 | 第23页 |
| ·PCR或酶切产物的回收 | 第23-24页 |
| ·PCR回收产物与pGEM-T载体法的连接与转化 | 第24-25页 |
| ·重组质粒的筛选与鉴定 | 第25-26页 |
| ·EGFP-5’UTR的构建 | 第26页 |
| ·pGL3／CMV与pGL3／CMV-5’UTR的构建 | 第26-27页 |
| ·表达小干涉RNA载体pSilencer-5’UTR的构建 | 第27-28页 |
| ·细胞培养 | 第28页 |
| ·DNA的转染 | 第28-29页 |
| ·绿色荧光的观察与荧光素酶活性的检测 | 第29页 |
| ·细胞核的染色 | 第29-30页 |
| Ⅲ 结果与分析 | 第30-35页 |
| ·从血清中HCV5’UTR的扩增与序列测定 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的筛选与鉴定 | 第31页 |
| ·以HCV 5’UTR为前导序列的报告基因能够正常表达 | 第31-32页 |
| ·针对5’UTR设计的小干扰RNA能特异性地抑制含有5’UTR的报告基因的表达 | 第32-35页 |
| Ⅳ 讨论 | 第35-37页 |
| 研究总结 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-45页 |
| 附录 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46页 |
