中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
第一章 前言 | 第9-16页 |
·拟南芥(Arabidopsis thaliana L.) | 第9-10页 |
·茉莉素(jasnonates,JAs)的生物合成及信号传导途径 | 第10-12页 |
·茉莉素(JAS)是一类新型的植物内源激素 | 第10页 |
·茉莉素的生物合成 | 第10-11页 |
·茉莉素的信号传导途径 | 第11-12页 |
·核黄素(Riboflavin,RIB) | 第12-15页 |
·核黄素及其生物合成 | 第12-13页 |
·2,4-二氧四氢蝶啶合成酶和核黄素合成酶的作用机理 | 第13-14页 |
·核黄素与植物抗性系统 | 第14-15页 |
·本研究的目的 | 第15-16页 |
第二章 材料与方法 | 第16-24页 |
·材料 | 第16-17页 |
·植物材料 | 第16页 |
·培养基 | 第16页 |
·质粒 | 第16页 |
·菌株 | 第16-17页 |
·细菌人工载体(BAC) | 第17页 |
·抗生素 | 第17页 |
·其他化学试剂 | 第17页 |
·方法 | 第17-24页 |
·拟南芥的培养及生长条件 | 第17页 |
·突变株的筛选 | 第17页 |
·微量DNA的提取 | 第17-18页 |
·分子标记的设计 | 第18-19页 |
·农杆菌感受态的制备 | 第19页 |
·大肠杆菌和农杆菌的转化及鉴定 | 第19页 |
·拟南芥的遗传转化及鉴定 | 第19-20页 |
·RT-PCR | 第20页 |
·叶绿素含量的测定 | 第20页 |
·Northern杂交分析 | 第20-22页 |
(1) 样品的处理 | 第20页 |
(2) RNA的提取 | 第20-21页 |
(3) 探针的DIG标记 | 第21页 |
(4) RNA甲醛变性胶电泳 | 第21页 |
(5) 转膜 | 第21页 |
(6) Northem杂交 | 第21-22页 |
·Western杂交分析 | 第22-23页 |
(1) 总蛋白的提取 | 第22页 |
(2) SDS-PAGE电泳 | 第22页 |
(3) Western杂交 | 第22-23页 |
·病原菌接种 | 第23-24页 |
第三章 结果与分析 | 第24-45页 |
·cos1突变株的筛选与鉴定 | 第24-35页 |
·拟南芥cos1突变株的筛选 | 第24-25页 |
·cos1突变株的鉴定 | 第25-35页 |
(1) cos1的表现型分析 | 第25-26页 |
(2) cos1的根对茉莉素反应的敏感性分析 | 第26-27页 |
(3) cos1的茉莉素诱导基因的表达分析 | 第27-28页 |
(4) cos1突变能组成型抑制coi1-2在植物衰老方面的缺陷 | 第28-31页 |
(5) cos1突变与植物抗性反应 | 第31-33页 |
(6) cos1表现组成型的乙烯三重效应,在乙烯信号链上处于ETR1的下游且与乙烯的另一负调控子CTR1有累加效应 | 第33-35页 |
·cos1基因的图谱定位及克隆 | 第35-38页 |
·cos1基因的图谱定位 | 第35-37页 |
·重组质粒的构建 | 第37-38页 |
(1) F6E13 BAC的酶切位点分析 | 第37页 |
(2) F6E13 BAC质粒的提取 | 第37页 |
(3) 酶切、连接、转化及阳性克隆的鉴定 | 第37-38页 |
·cos1基因的互补及功能分析 | 第38-45页 |
·农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第38页 |
·转化子的鉴定 | 第38-39页 |
·亚克隆重组质粒的构建、拟南芥的遗传转转化及转化子的筛选 | 第39-41页 |
(1) 亚克隆重组质粒的构建 | 第39页 |
(2) 拟南芥的遗传转化及转化子的筛选 | 第39-41页 |
·cos1基因及其功能分析 | 第41-45页 |
(1) cos1突变株的突变位点分析 | 第41-43页 |
(2) 外源核黄素能部分互补cos1突变的表现型 | 第43页 |
(3) cos1基因 | 第43-45页 |
第四章 讨论 | 第45-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
缩写词表 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
作者简历 | 第56页 |