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利用HSP70基因人工创造植物雄性不育系的研究

第一章 文献综述第1-36页
 1 利用基因工程创造雄性不育系的研究进展第17-21页
   ·花药特异性表达的基因及其启动子第17-19页
     ·Osg6B基因及其启动子第17页
     ·TA系列基因及其启动子第17-18页
     ·CHI基因及其启动子P_(A1)、P_(A2)、P_B第18页
     ·A3、A6、A8、A9基因及其启动子第18-19页
   ·花粉特异性表达的基因及其启动子第19-21页
     ·Bp4基因家族及其启动子第19-20页
     ·TUA1基因及其启动子第20页
     ·LAT51、LAT52、LAT58、LAT59基因及其启动子第20-21页
     ·Zm13、Zm30、Zm401基因及其启动子第21页
 2 创造雄性不育系的技术途径第21-25页
   ·创造雄性核不育系的技术途径第22-23页
     ·细胞通过毒素基因的特异空间表达创造雄性不育系第22页
     ·通过影响小孢子发育可导致雄性不育系第22-23页
     ·借助反义基因获得植物雄性不育系第23页
     ·通过破坏胼胝质壁而获得雄性不育系第23页
     ·通过转座子突变创造雄性不育系第23页
     ·通过组成型表达获得植物雄性不育系第23页
   ·创造细胞质雄性不育系的技术途径第23-24页
     ·扰乱线粒体功能创造细胞质雄性不育系第24页
     ·导入与细胞质雄性不育相关的基因创造雄性不育系第24页
   ·其他途径第24-25页
 3 反义RNA及其在植物基因工程领域的应用第25-31页
   ·反义RNA的作用原理第26-27页
     ·原核生物细胞中的反义作用第26页
     ·真核生物细胞中的反义作用第26-27页
     ·其它作用第27页
   ·反义RNA的应用第27-31页
     ·反义RNA抑制果实成熟第27-28页
     ·在植物抗病方面第28页
     ·反向筛选标记基因第28-29页
     ·花色控制第29页
     ·控制植物淀粉的合成第29-30页
     ·控制油料植物种子中脂肪酸的合成第30页
     ·控制雄性不育第30页
     ·其他方面的应用第30-31页
 4 HSP70在植物领域中的研究进展第31-35页
   ·HSP70作用的分子机理第31-32页
   ·在植物中热激蛋白HSP70的功能第32-35页
     ·热激蛋白具有分子伴侣作用第32-33页
     ·HSP70与植物的耐热能力第33页
     ·热激蛋白HSP70与植物的抗冷性第33-34页
     ·HSP70与植物育性的关系第34-35页
 5 本论文立题依据及研究目标第35-36页
第二章 HSP70正、反义片段表达载体的构建第36-44页
 1 材料和方法第36-40页
   ·菌株和质粒第36页
   ·方法第36-40页
     ·培养基第36页
     ·质粒DNA的制备第36-39页
     ·酶切第39页
     ·DNA片段的回收第39-40页
     ·DNA片段的连接第40页
     ·转化子的鉴定第40页
 2 结果与分析第40-44页
   ·正反义片段的人工合成第40-41页
   ·人工合成产物的连接转化和重组子的鉴定第41-44页
     ·连接产物的转化第41页
     ·重组子的鉴定第41-42页
     ·片段的回收纯化及650和651的构建第42页
     ·HSP70正、反义片段表达载体的构建第42-44页
第三章 转基因植株的获得第44-60页
 1 实验材料第44页
   ·实验材料第44页
     ·植物材料第44页
     ·质粒、基因与菌种第44页
 2 实验方法第44-51页
   ·培养基第44-45页
   ·外植体的培养第45页
   ·质粒DNA的制备第45页
   ·农杆菌转化第45-46页
   ·基因枪转化第46页
   ·转化子的筛选第46-47页
   ·植物总DNA的提取第47-48页
   ·转化植株的PCR分析第48页
   ·DNA分子杂交第48-50页
   ·转基因植株的生根和移栽第50页
   ·GUS组织化学染色第50页
   ·花药线粒体蛋白的提取和含量测定第50-51页
   ·烟草石蜡切片第51页
   ·统计分析第51页
 3 结果与分析第51-55页
   ·转化植株的获得第51-53页
   ·GUS染色第53-54页
   ·PCR分析第54页
   ·DNA点杂交第54-55页
 4 讨论第55-60页
   ·HSP70正、反义片段与植物育性的关系第55-57页
   ·转基因植物生态环境的安全性第57-58页
     ·转基因植物成为杂草第57-58页
     ·转基因植物导致新的病虫害和威胁生物多样性第58页
     ·转基因植物作为食品的安全性第58页
   ·反义RNA技术第58-60页
第四章 转基因植株田间观察与育性机理分析第60-66页
 1 转基因植株田间观察第60-63页
   ·形态学观察第60-62页
   ·花粉粒I_2-KI染色第62页
   ·结实情况观察第62-63页
 2 育性机理分析第63-65页
   ·花药显微观察与分析第63-64页
   ·热激蛋白含量的测定第64-65页
 3 讨论第65-66页
   ·植物转基因雄性不育机理的探索第65页
   ·线粒体热激蛋白的含量与植物育性的关系第65-66页
结论第66-67页
4 本文下一步开展工作的设想第67-68页
参考文献第68-79页
附录第79-89页
致谢第89-90页
作者简介第90页

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