第一章 文献综述 | 第1-36页 |
1 利用基因工程创造雄性不育系的研究进展 | 第17-21页 |
·花药特异性表达的基因及其启动子 | 第17-19页 |
·Osg6B基因及其启动子 | 第17页 |
·TA系列基因及其启动子 | 第17-18页 |
·CHI基因及其启动子P_(A1)、P_(A2)、P_B | 第18页 |
·A3、A6、A8、A9基因及其启动子 | 第18-19页 |
·花粉特异性表达的基因及其启动子 | 第19-21页 |
·Bp4基因家族及其启动子 | 第19-20页 |
·TUA1基因及其启动子 | 第20页 |
·LAT51、LAT52、LAT58、LAT59基因及其启动子 | 第20-21页 |
·Zm13、Zm30、Zm401基因及其启动子 | 第21页 |
2 创造雄性不育系的技术途径 | 第21-25页 |
·创造雄性核不育系的技术途径 | 第22-23页 |
·细胞通过毒素基因的特异空间表达创造雄性不育系 | 第22页 |
·通过影响小孢子发育可导致雄性不育系 | 第22-23页 |
·借助反义基因获得植物雄性不育系 | 第23页 |
·通过破坏胼胝质壁而获得雄性不育系 | 第23页 |
·通过转座子突变创造雄性不育系 | 第23页 |
·通过组成型表达获得植物雄性不育系 | 第23页 |
·创造细胞质雄性不育系的技术途径 | 第23-24页 |
·扰乱线粒体功能创造细胞质雄性不育系 | 第24页 |
·导入与细胞质雄性不育相关的基因创造雄性不育系 | 第24页 |
·其他途径 | 第24-25页 |
3 反义RNA及其在植物基因工程领域的应用 | 第25-31页 |
·反义RNA的作用原理 | 第26-27页 |
·原核生物细胞中的反义作用 | 第26页 |
·真核生物细胞中的反义作用 | 第26-27页 |
·其它作用 | 第27页 |
·反义RNA的应用 | 第27-31页 |
·反义RNA抑制果实成熟 | 第27-28页 |
·在植物抗病方面 | 第28页 |
·反向筛选标记基因 | 第28-29页 |
·花色控制 | 第29页 |
·控制植物淀粉的合成 | 第29-30页 |
·控制油料植物种子中脂肪酸的合成 | 第30页 |
·控制雄性不育 | 第30页 |
·其他方面的应用 | 第30-31页 |
4 HSP70在植物领域中的研究进展 | 第31-35页 |
·HSP70作用的分子机理 | 第31-32页 |
·在植物中热激蛋白HSP70的功能 | 第32-35页 |
·热激蛋白具有分子伴侣作用 | 第32-33页 |
·HSP70与植物的耐热能力 | 第33页 |
·热激蛋白HSP70与植物的抗冷性 | 第33-34页 |
·HSP70与植物育性的关系 | 第34-35页 |
5 本论文立题依据及研究目标 | 第35-36页 |
第二章 HSP70正、反义片段表达载体的构建 | 第36-44页 |
1 材料和方法 | 第36-40页 |
·菌株和质粒 | 第36页 |
·方法 | 第36-40页 |
·培养基 | 第36页 |
·质粒DNA的制备 | 第36-39页 |
·酶切 | 第39页 |
·DNA片段的回收 | 第39-40页 |
·DNA片段的连接 | 第40页 |
·转化子的鉴定 | 第40页 |
2 结果与分析 | 第40-44页 |
·正反义片段的人工合成 | 第40-41页 |
·人工合成产物的连接转化和重组子的鉴定 | 第41-44页 |
·连接产物的转化 | 第41页 |
·重组子的鉴定 | 第41-42页 |
·片段的回收纯化及650和651的构建 | 第42页 |
·HSP70正、反义片段表达载体的构建 | 第42-44页 |
第三章 转基因植株的获得 | 第44-60页 |
1 实验材料 | 第44页 |
·实验材料 | 第44页 |
·植物材料 | 第44页 |
·质粒、基因与菌种 | 第44页 |
2 实验方法 | 第44-51页 |
·培养基 | 第44-45页 |
·外植体的培养 | 第45页 |
·质粒DNA的制备 | 第45页 |
·农杆菌转化 | 第45-46页 |
·基因枪转化 | 第46页 |
·转化子的筛选 | 第46-47页 |
·植物总DNA的提取 | 第47-48页 |
·转化植株的PCR分析 | 第48页 |
·DNA分子杂交 | 第48-50页 |
·转基因植株的生根和移栽 | 第50页 |
·GUS组织化学染色 | 第50页 |
·花药线粒体蛋白的提取和含量测定 | 第50-51页 |
·烟草石蜡切片 | 第51页 |
·统计分析 | 第51页 |
3 结果与分析 | 第51-55页 |
·转化植株的获得 | 第51-53页 |
·GUS染色 | 第53-54页 |
·PCR分析 | 第54页 |
·DNA点杂交 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-60页 |
·HSP70正、反义片段与植物育性的关系 | 第55-57页 |
·转基因植物生态环境的安全性 | 第57-58页 |
·转基因植物成为杂草 | 第57-58页 |
·转基因植物导致新的病虫害和威胁生物多样性 | 第58页 |
·转基因植物作为食品的安全性 | 第58页 |
·反义RNA技术 | 第58-60页 |
第四章 转基因植株田间观察与育性机理分析 | 第60-66页 |
1 转基因植株田间观察 | 第60-63页 |
·形态学观察 | 第60-62页 |
·花粉粒I_2-KI染色 | 第62页 |
·结实情况观察 | 第62-63页 |
2 育性机理分析 | 第63-65页 |
·花药显微观察与分析 | 第63-64页 |
·热激蛋白含量的测定 | 第64-65页 |
3 讨论 | 第65-66页 |
·植物转基因雄性不育机理的探索 | 第65页 |
·线粒体热激蛋白的含量与植物育性的关系 | 第65-66页 |
结论 | 第66-67页 |
4 本文下一步开展工作的设想 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-79页 |
附录 | 第79-89页 |
致谢 | 第89-90页 |
作者简介 | 第90页 |