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花生(Arachis hypogaea L.)未成熟种子cDNA文库的构建与花生Arachin基因cDNA克隆的初步筛选

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
符号说明第7-8页
第一部分 综述第8-21页
 一、 植物贮藏蛋白研究进展第8-17页
 二、 基于cDNA文库的基因克隆方法第17-20页
 三、 本工作意义第20-21页
第二部分 花生未成熟种子文库的构建第21-39页
 一、 材料与方法第21-32页
  1 实验材料第21-23页
  2 实验方法第23-32页
   ·花生未成熟种子总RNA的提取第23-24页
   ·mRNA的分离第24-25页
   ·双链cDNA的合成第25-27页
   ·cDNA的分级分离第27-28页
   ·连接第28-30页
   ·包装第30页
   ·未扩增文库质量的检测第30-31页
   ·文库的扩增第31页
   ·扩增文库的滴度测定与保存第31-32页
 二、 结果与分析第32-37页
  1 总RNA提取结果第32页
  2 mRNA的分离第32页
  3 cDNA的合成第32-33页
  4 cDNA两端的修饰第33页
  5 未扩增文库的鉴定第33-35页
  6 扩增文库的鉴定第35-37页
 三、 讨论第37-39页
第三部分 花生Arachin基因cDNA克隆的初步筛选第39-48页
 一、 材料与方法第39-44页
  1 实验材料第39-40页
  2 实验方法第40-44页
   ·探针的制备--大豆球蛋白基因cDNA片段的克隆、测序与分析第40-43页
     ·大豆未成熟种子总RNA的提取第40页
     ·大豆Glycinin基因cDNA片段的克隆第40-42页
     ·重组克隆的验证及序列分析第42页
     ·标记DNA探针第42-43页
   ·Arachin基因cDNA克隆的初步筛选第43-44页
     ·噬菌斑的印记吸印第43-44页
     ·杂交及放射自显影第44页
 二、 结果与分析第44-48页
  1 总RNA提取结果第44-45页
  2 大豆Glycinin基因cDNA片段的克隆及测序分析第45-47页
  3 以大豆Glycinin基因为探针筛选文库中花生的同源基因第47-48页
参考文献第48-53页
致谢第53-54页
攻读学位期间发表的学术论文第54页

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