摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
符号说明 | 第7-8页 |
第一部分 综述 | 第8-21页 |
一、 植物贮藏蛋白研究进展 | 第8-17页 |
二、 基于cDNA文库的基因克隆方法 | 第17-20页 |
三、 本工作意义 | 第20-21页 |
第二部分 花生未成熟种子文库的构建 | 第21-39页 |
一、 材料与方法 | 第21-32页 |
1 实验材料 | 第21-23页 |
2 实验方法 | 第23-32页 |
·花生未成熟种子总RNA的提取 | 第23-24页 |
·mRNA的分离 | 第24-25页 |
·双链cDNA的合成 | 第25-27页 |
·cDNA的分级分离 | 第27-28页 |
·连接 | 第28-30页 |
·包装 | 第30页 |
·未扩增文库质量的检测 | 第30-31页 |
·文库的扩增 | 第31页 |
·扩增文库的滴度测定与保存 | 第31-32页 |
二、 结果与分析 | 第32-37页 |
1 总RNA提取结果 | 第32页 |
2 mRNA的分离 | 第32页 |
3 cDNA的合成 | 第32-33页 |
4 cDNA两端的修饰 | 第33页 |
5 未扩增文库的鉴定 | 第33-35页 |
6 扩增文库的鉴定 | 第35-37页 |
三、 讨论 | 第37-39页 |
第三部分 花生Arachin基因cDNA克隆的初步筛选 | 第39-48页 |
一、 材料与方法 | 第39-44页 |
1 实验材料 | 第39-40页 |
2 实验方法 | 第40-44页 |
·探针的制备--大豆球蛋白基因cDNA片段的克隆、测序与分析 | 第40-43页 |
·大豆未成熟种子总RNA的提取 | 第40页 |
·大豆Glycinin基因cDNA片段的克隆 | 第40-42页 |
·重组克隆的验证及序列分析 | 第42页 |
·标记DNA探针 | 第42-43页 |
·Arachin基因cDNA克隆的初步筛选 | 第43-44页 |
·噬菌斑的印记吸印 | 第43-44页 |
·杂交及放射自显影 | 第44页 |
二、 结果与分析 | 第44-48页 |
1 总RNA提取结果 | 第44-45页 |
2 大豆Glycinin基因cDNA片段的克隆及测序分析 | 第45-47页 |
3 以大豆Glycinin基因为探针筛选文库中花生的同源基因 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第54页 |