| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 引言 | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第10-21页 |
| 第一章 传染性法氏囊病毒基因工程疫苗研究进展 | 第10-14页 |
| 第二章 核酸疫苗 | 第14-21页 |
| 研究内容 | 第21-41页 |
| 第一章 传染性法氏囊病毒VP2基因真核表达重组质粒的构建与表达 | 第21-35页 |
| 摘要 | 第21-22页 |
| 一 材料与方法 | 第22-27页 |
| 1 材料 | 第22-23页 |
| 1．1 材料 | 第22页 |
| 1．2 质粒、菌种及细胞 | 第22页 |
| 1．3 试剂 | 第22页 |
| 1．4 病毒的鉴定 | 第22-23页 |
| 1．4．1 琼脂扩散试验 | 第22-23页 |
| 1．4．2 动物回归试验 | 第23页 |
| 2 方法 | 第23-27页 |
| 2．1 引物设计 | 第23页 |
| 2．2 传染性法氏囊病毒VP2基因的扩增 | 第23-24页 |
| 2．2．1 病毒核酸的提取 | 第23-24页 |
| 2．2．2 反转录 | 第24页 |
| 2．2．3 聚合酶链反应 | 第24页 |
| 2．3 传染性法氏囊病毒VP2基因的克隆与鉴定 | 第24页 |
| 2．3．1 PCR产物的克隆与回收 | 第24页 |
| 2．3．2 重组质粒的构建 | 第24页 |
| 2．3．2．1 DNA常规操作 | 第24页 |
| 2．3．2．2 VP2 PCR产物克隆入真核表达载体 | 第24页 |
| 2．4 VP2真核表达质粒在COS-7细胞中的表达 | 第24-26页 |
| 2．4．1 质粒的大量提取与纯化 | 第24-25页 |
| 2．4．1．1 大量提取质粒 | 第25页 |
| 2．4．1．2 聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA | 第25页 |
| 2．4．2 细胞转染 | 第25-26页 |
| 2．4．2．1 转染细胞的准备 | 第25页 |
| 2．4．2．2 FuGENE Transfection Reagent：DNA复合物的准备 | 第25-26页 |
| 2．4．2．3 转染细胞 | 第26页 |
| 2．5 VP2基因表达产物的鉴定 | 第26-27页 |
| 2．5．1 报道基因试验 | 第26页 |
| 2．5．2 免疫荧光试验 | 第26页 |
| 2．5．3 Dot-ELISA | 第26-27页 |
| 二 结果与讨论 | 第27-35页 |
| 2．1 动物回归实验结果 | 第27页 |
| 2．2 99J1株IBDV VP2基因的RT-PCR扩增 | 第27页 |
| 2．3 99J1株IBDV VP2基因的克隆与鉴定 | 第27页 |
| 2．4 重组质粒的大量提取与纯化 | 第27-28页 |
| 2．5 VP2基因表达产物的检测 | 第28-35页 |
| 2．5．1 报道基因的检测 | 第28页 |
| 2．5．2 间接荧光试验 | 第28页 |
| 2．5．3 Dot-ELISA | 第28-35页 |
| 第二章 传染性法氏囊病毒VP2基因真核表达重组质粒的免疫学试验 | 第35-41页 |
| 摘要 | 第35页 |
| 一 材料与方法 | 第35-37页 |
| 1 质粒与菌种 | 第35页 |
| 2 VP2基因重组质粒的制备 | 第35页 |
| 3 CpGODN | 第35页 |
| 4 试验动物分组及免疫 | 第35-36页 |
| 5 IBDV ELISA抗原浓度及血清最佳稀释度的方阵测定 | 第36页 |
| 6 ELISA抗体的检测 | 第36页 |
| 7 攻毒保护试验 | 第36-37页 |
| 二 结果 | 第37-38页 |
| 1 IBDV ELISA抗原浓度及血清最佳稀释度的方阵测定结果 | 第37页 |
| 2 ELISA检测结果 | 第37-38页 |
| 3 攻毒实验结果 | 第38页 |
| 三 讨论 | 第38-41页 |
| 参考文献 | 第41-48页 |
| 致谢 | 第48页 |
