| 前 言 | 第1-12页 |
| 中文摘要 | 第12-15页 |
| 文献综述 | 第15-47页 |
| 大熊猫成纤维细胞体外培养与异质克隆胚构建 | 第15-47页 |
| 第一章 大熊猫繁殖生物学研究进展 | 第15-23页 |
| 一． 大熊猫濒临灭绝的原因 | 第15-16页 |
| 二． 拯救大熊猫的对策和措施 | 第16-17页 |
| 三． 大熊猫繁殖生物学研究进展 | 第17-23页 |
| （一） 性成熟与性周期 | 第17-18页 |
| （二） 排卵 | 第18-19页 |
| （三） 受精 | 第19-20页 |
| （四） 妊娠与产仔 | 第20-21页 |
| （五） 育幼 | 第21-23页 |
| 第二章 动物细胞培养研究进展 | 第23-32页 |
| 一． 动物细胞培养的发展简史 | 第23-25页 |
| 二． 细胞系的种类和用途 | 第25-27页 |
| 三． 细胞增殖与细胞周期调控 | 第27-29页 |
| 四． DNA损伤与细胞周期 | 第29-32页 |
| 第三章 异种动物细胞核移植研究进展 | 第32-47页 |
| 一． 异种动物核移植研究简况 | 第33-34页 |
| 二． 哺乳动物核移植基本原理 | 第34-45页 |
| （一） 卵母细胞成熟分裂调节机制 | 第34-42页 |
| 1． MPF在卵母细胞成熟中的作用 | 第34-38页 |
| 2． 蛋白激酶/蛋白磷酸酶在卵母细胞成熟中的作用 | 第38-41页 |
| 3． 其它与卵母细胞成熟相关的因素 | 第41-42页 |
| （二） 核质互作对重组胚发育的影响 | 第42-43页 |
| （三） 核移胚的重新编程与合子基因表达 | 第43-45页 |
| 三． 异种动物核移植应用前景和存在问题 | 第45-47页 |
| 实验研究 | 第47-87页 |
| 第四章 山羊和牛皮肤成纤维细胞体外培养 | 第47-57页 |
| 一． 材料和方法 | 第47-48页 |
| （一） 取材与原材料的保存 | 第47页 |
| （二） 原代细胞培养及培养液的筛选 | 第47页 |
| （三） 细胞传代及成纤维细胞的纯化 | 第47-48页 |
| （四） 传代细胞培养液筛选 | 第48页 |
| （五） 细胞冻存与解冻 | 第48页 |
| 二． 结果 | 第48-53页 |
| （一） 济宁青山羊皮肤成纤维细胞的体外培养 | 第48-51页 |
| 1． 实验材料的保存 | 第48页 |
| 2． 原代细胞培养液的筛选 | 第48-49页 |
| 3． 细胞传代与纯化 | 第49-50页 |
| 4． 传代细胞培养液筛选 | 第50-51页 |
| 5． EGF、FGF、胰岛素对细胞生长的影响 | 第51页 |
| 6． 青山羊皮肤成纤维细胞冻存 | 第51页 |
| （二） 安哥拉山羊、布尔山羊、黑白花奶牛皮肤成纤维细胞的原代培养 | 第51-53页 |
| 三． 讨论 | 第53-54页 |
| 四． 小结 | 第54-57页 |
| 第五章 大熊猫皮肤细胞的原代培养及建系 | 第57-67页 |
| 一． 材料和方法 | 第57-58页 |
| （一） 细胞来源： | 第57页 |
| （二） 原代细胞培养 | 第57页 |
| （三） 成纤维细胞的纯化与培养液的筛选 | 第57-58页 |
| （四） 血清浓度及生长因子对传代细胞的影响 | 第58页 |
| （五） 细胞冻存与解冻 | 第58页 |
| （六） 生长曲线与分裂指数 | 第58页 |
| （七） 染色体制备 | 第58页 |
| 二． 结果 | 第58-64页 |
| （一） 不同基础培养液对细胞原代培养的作用 | 第58-59页 |
| （二） 消化酶对贴壁率的影响 | 第59-60页 |
| （三） 基本培养液的筛选 | 第60页 |
| （四） 血清浓度对细胞生长的影响 | 第60-61页 |
| （五） TGF、EGF、insulin对细胞生长的影响 | 第61页 |
| （六） 细胞冻存 | 第61-62页 |
| （七） 生长曲线 | 第62页 |
| （八） 分裂指数 | 第62-63页 |
| （九） 染色体组型分析 | 第63-64页 |
| 三． 讨论 | 第64-65页 |
| 四． 小结 | 第65-67页 |
| 第六章 大熊猫皮肤成纤维细胞永生化传代培养 | 第67-77页 |
| 一． 材料和方法 | 第67-68页 |
| （一） 传代细胞培养 | 第67页 |
| （二） 细胞诱变 | 第67页 |
| （三） 生长曲线与群体倍增时间 | 第67页 |
| （四） 电镜样本的制做与观察 | 第67-68页 |
| （五） 染色体标本制做 | 第68页 |
| （六） 生瘤性实验操作 | 第68页 |
| （七） 细胞表面抗原检测 | 第68页 |
| 二． 结果 | 第68-73页 |
| （一） 传代细胞培养 | 第68-69页 |
| （二） 永生化细胞系的建立 | 第69页 |
| （三） 永生化前后光镜形态学 | 第69页 |
| （四） PFY细胞系的电镜形态 | 第69-71页 |
| （五） 生长曲线与分裂指数 | 第71-72页 |
| （六） 染色体分析 | 第72页 |
| （七） 生瘤性实验 | 第72页 |
| （八） 细胞表面抗原的变化 | 第72-73页 |
| 三． 讨论 | 第73-76页 |
| 四． 小结 | 第76-77页 |
| 第七章 大熊猫成纤维细胞与牛卵母细胞构建克隆胚 | 第77-87页 |
| 一． 材料与方法 | 第77-79页 |
| （一） 牛卵母细胞体外成熟 | 第77-78页 |
| （二） 卵母细胞去核与供体细胞的准备 | 第78页 |
| （三） 核移植 | 第78页 |
| （四） 重组胚体外培养 | 第78页 |
| （五） 重组胚染色体检查 | 第78页 |
| （六） 重组胚卵裂球表面抗原检查 | 第78-79页 |
| 二． 结果 | 第79-83页 |
| （一） 牛卵母细胞体外成熟 | 第79-80页 |
| （二） 牛卵母细胞去核 | 第80-81页 |
| （三） 电融合参数对融合率及胚胎发育的影响 | 第81-82页 |
| （四） 核质异构胚染色体检查 | 第82页 |
| （五） 核质异构胚细胞表面抗原特性 | 第82-83页 |
| 三． 讨论 | 第83-86页 |
| 四． 小结 | 第86-87页 |
| 附录 1 主要仪器设备 | 第87-88页 |
| 附录 2 主要实验耗材 | 第88-89页 |
| 附录 3 主要试剂 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-111页 |
| 英文摘要 | 第111-115页 |