| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-27页 |
| ·人胚胎干细胞的生物学特性 | 第11-16页 |
| ·人胚胎干细胞的概念及起源 | 第11-12页 |
| ·人胚胎干细胞的特征 | 第12-13页 |
| ·人胚胎干细胞体外培养体系的研究进展 | 第13-16页 |
| ·人胚胎干细胞体外定向诱导分化的研究概况 | 第16-24页 |
| ·人胚胎干细胞体外定向诱导分化的方法 | 第16-17页 |
| ·人胚胎干细胞体外定向诱导分化的类型 | 第17-24页 |
| ·胚胎干细胞在心血管疾病治疗方面的应用 | 第24-27页 |
| ·细胞移植的应用和三维心肌组织的构建 | 第24页 |
| ·心脏药理模型的建立 | 第24-25页 |
| ·生物起搏器的构建 | 第25-27页 |
| 第二章 引言 | 第27-29页 |
| 第三章 材料与方法 | 第29-45页 |
| ·实验材料 | 第29-31页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·主要材料 | 第29-30页 |
| ·主要抗体 | 第30页 |
| ·主要培养基及试剂配制 | 第30页 |
| ·主要细胞株 | 第30页 |
| ·主要质粒 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-45页 |
| ·心肌特异性重组慢病毒载体αMHC-Bla~r-2A-EGFP-Rex-neo的构建 | 第31-35页 |
| ·重组慢病毒的包装 | 第35-36页 |
| ·心肌特异性重组慢病毒转染人胚胎干细胞 | 第36-39页 |
| ·转染的人胚胎干细胞向心室、心房肌细胞的诱导分化 | 第39-40页 |
| ·诱导分化的心室、心房肌细胞的筛选鉴定 | 第40-45页 |
| 第四章 结果与分析 | 第45-53页 |
| ·重组慢病毒表达载体αMHC-Bla~r-2A-EGFP-Rex-neo的构建 | 第45-47页 |
| ·Bla~r-2A目的片段的获得 | 第45页 |
| ·PCR产物Bla~r-2A片段和载体αMHC-EGFP-Rex-neo的AgeⅠ酶切 | 第45-46页 |
| ·菌落PCR检测Bla~r-2A片段的插入方向 | 第46页 |
| ·重组质粒αMHC-Bla~r-2A-EGFP-Rex-neo的鉴定 | 第46-47页 |
| ·重组慢病毒的包装及转染人胚胎干细胞 | 第47-49页 |
| ·重组慢病毒的包装 | 第47页 |
| ·人胚胎干细胞的培养 | 第47-48页 |
| ·转染慢病毒的人胚胎干细胞系的建立 | 第48-49页 |
| ·人胚胎干细胞诱导分化的心室、心房肌细胞的筛选鉴定 | 第49-53页 |
| ·PCR检测aMHC在心室、心房肌细胞中的表达情况 | 第49-50页 |
| ·筛选纯化的心室、心房肌细胞EGFP表达情况的观察 | 第50-51页 |
| ·筛选纯化的心室、心房肌细胞原位免疫荧光染色 | 第51页 |
| ·FACS检测心室、心房肌细胞筛选纯化的效率 | 第51-52页 |
| ·筛选纯化的心室、心房肌细胞分子特征的分析 | 第52-53页 |
| 第五章 讨论 | 第53-57页 |
| 参考文献 | 第57-67页 |
| 致谢 | 第67-69页 |
| 发表论文及参加课题一览表 | 第69页 |
