| 致谢 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 目录 | 第12-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 第一部分 文献综述 | 第17-34页 |
| 第1章 绪论 | 第18-34页 |
| 前言 | 第18-19页 |
| 1 昆虫抗菌肽的分类 | 第19-21页 |
| ·天蚕素类抗菌肽(cecropins) | 第19页 |
| ·防御素(defensins) | 第19-20页 |
| ·富含脯氨酸的抗菌肽(proline-rich peptides) | 第20页 |
| ·富含甘氨酸的抗菌肽(glycine-rich peptides) | 第20-21页 |
| 2 昆虫抗菌肽的结构 | 第21-24页 |
| ·昆虫抗菌肽的一级结构 | 第21页 |
| ·昆虫抗菌肽的二级结构和三级结构 | 第21-24页 |
| 3 昆虫抗菌肽的生物活性 | 第24-26页 |
| ·抗细菌活性 | 第24-25页 |
| ·抗真菌活性 | 第25页 |
| ·抗肿瘤细胞能力 | 第25页 |
| ·抗原虫和病毒能力 | 第25-26页 |
| 4 昆虫抗菌肽的作用机制 | 第26-28页 |
| 5 昆虫抗菌肽的应用 | 第28-31页 |
| ·在植物转基因工程中的应用 | 第28-29页 |
| ·在动物转基因工程中的应用 | 第29页 |
| ·在医疗领域的应用 | 第29-31页 |
| ·在食品、饲料中的应用 | 第31页 |
| 6 抗菌肽应用中亟待解决的问题 | 第31-34页 |
| ·产量较低,成本较高 | 第31-32页 |
| ·活力有限 | 第32页 |
| ·生物稳定性问题 | 第32-34页 |
| 第二部分 试验研究 | 第34-68页 |
| 第2章 蝶蛹金小蜂毒腺CDNA文库的构建 | 第35-43页 |
| 前言 | 第35页 |
| 1 材料 | 第35-36页 |
| ·组织样品 | 第35页 |
| ·质粒和菌种 | 第35-36页 |
| ·酶及试剂盒 | 第36页 |
| ·其他试剂 | 第36页 |
| 2 方法 | 第36-40页 |
| ·cDNA文库的制备与筛选流程图 | 第36-37页 |
| ·cDNA文库的制备 | 第37-38页 |
| ·cDNA文库的鉴定 | 第38-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-41页 |
| ·cDNA文库的构建 | 第40-41页 |
| ·cDNA文库的质量鉴定和评价 | 第41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 第3章 蝶蛹金小蜂毒腺抗菌肽基因的筛选 | 第43-55页 |
| 前言 | 第43-44页 |
| 1 材料 | 第44-45页 |
| ·供试cDNA文库和菌种 | 第44页 |
| ·试剂及其他材料 | 第44页 |
| ·培养基 | 第44-45页 |
| 2 方法 | 第45-49页 |
| ·cDNA文库筛选及验证流程图 | 第45页 |
| ·cDNA文库的筛选 | 第45-46页 |
| ·阳性克隆涂板法验证 | 第46-47页 |
| ·抗菌活性验证 | 第47-48页 |
| ·序列分析 | 第48-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-53页 |
| ·cDNA文库的筛选 | 第49页 |
| ·阳性克隆生长比较 | 第49-50页 |
| ·初步抗菌活性分析 | 第50-52页 |
| ·序列分析 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 第4章 阳性克隆在原核细胞中的表达 | 第55-68页 |
| 前言 | 第55页 |
| 1 材料 | 第55-58页 |
| ·菌种和载体 | 第55-56页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第56页 |
| ·其它试剂 | 第56页 |
| ·试剂的配制 | 第56-58页 |
| 2 方法 | 第58-61页 |
| ·蝶蛹金小蜂毒腺抗菌肽PP2基因的克隆 | 第58-59页 |
| ·PP2重组表达载体的构建 | 第59-60页 |
| ·外源蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第60页 |
| ·融合蛋白的SDS-PAGE及Western印迹分析 | 第60-61页 |
| ·融合蛋白的杀菌活性检测 | 第61页 |
| 3 结果与分析 | 第61-67页 |
| ·PP2a和PP2b的克隆 | 第61-62页 |
| ·重组质粒的构建 | 第62-64页 |
| ·PP2a和PP2b基因在大肠杆菌中的表达 | 第64-66页 |
| ·PP2a和PP2b表达产物的Western检测 | 第66页 |
| ·融合蛋白杀菌活性测定 | 第66-67页 |
| 4 讨论 | 第67-68页 |
| 第三部分 总结 | 第68-71页 |
| 第5章 总结 | 第69-71页 |
| 1 本研究结果 | 第69-70页 |
| 2 本研究的特色和创新点 | 第70页 |
| 3 不足之处及今后研究的方向 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-81页 |
| 作者简介 | 第81页 |
