| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-23页 |
| ·植物病毒检测研究进展 | 第10-18页 |
| ·生物学测定 | 第10页 |
| ·病毒粒子特性测定 | 第10页 |
| ·电子显微镜技术 | 第10-11页 |
| ·血清学方法 | 第11-13页 |
| ·分子生物学方法 | 第13-18页 |
| ·烟草环斑病毒概况 | 第18-21页 |
| ·TRSV 分布及寄主范围 | 第18-19页 |
| ·TRSV 主要鉴别特征 | 第19页 |
| ·TRSV 的传播途径 | 第19-20页 |
| ·TRSV 的经济危害 | 第20页 |
| ·TRSV 的防治 | 第20页 |
| ·TRSV 检测技术 | 第20-21页 |
| ·展望 | 第21页 |
| ·研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 第二章 烟草环斑病毒检测方法 | 第23-36页 |
| ·材料与设备 | 第23-24页 |
| ·试验材料 | 第23页 |
| ·试验所用仪器及试剂 | 第23-24页 |
| ·试验方法 | 第24-28页 |
| ·病毒接种（机械接种） | 第24页 |
| ·DAS-ELISA 检测 | 第24-25页 |
| ·胶体金免疫层析法检测 | 第25页 |
| ·引物及探针的设计 | 第25页 |
| ·病毒RNA 的提取 | 第25-26页 |
| ·病毒粗提液制备及紫外检测 | 第26页 |
| ·引物对TRSV-F/R-1 的 RT-PCR 检测体系的建立 | 第26-27页 |
| ·TRSV-F/R-2 的 RT-PCR 检测 | 第27页 |
| ·巢式PCR 检测 | 第27页 |
| ·TRSV-5P/ 3P real-time RT-PCR 检测 | 第27页 |
| ·TRSV-F/R-1、TRSV-F/R-2、TRSV-5P/3P 特异性试验 | 第27页 |
| ·不同检测方法的灵敏度试验 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-34页 |
| ·生物学接种 | 第28页 |
| ·DAS-ELISA 检测 | 第28页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条检测 | 第28-29页 |
| ·病毒提纯 | 第29页 |
| ·TRSV-F/R-1 的RT-PCR 检测体系的建立 | 第29页 |
| ·TRSV-F/-R-2 的RT-PCR 检测 | 第29-30页 |
| ·巢式PCR 检测 | 第30-31页 |
| ·Real-time PCR 检测 | 第31页 |
| ·不同引物的特异性试验 | 第31-32页 |
| ·不同检测体系灵敏度比较试验 | 第32-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 烟草环斑病毒CP 基因片段原核表达 | 第36-49页 |
| ·材料与设备 | 第36页 |
| ·试验材料 | 第36页 |
| ·试验所用的仪器及试剂 | 第36页 |
| ·试验方法 | 第36-43页 |
| ·引物设计 | 第36-37页 |
| ·RNA 提取 | 第37页 |
| ·RT-PCR 扩增目的片段 | 第37页 |
| ·PCR 产物的克隆及酶切 | 第37-40页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第40-41页 |
| ·融合蛋白表达、纯化及鉴定 | 第41-43页 |
| ·多克隆抗体的制备及效价测定 | 第43页 |
| ·多抗血清效价及特异性的测定 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-47页 |
| ·TRSV-CP 基因的RT-PCR 扩增 | 第43-44页 |
| ·目的片段的克隆及鉴定 | 第44页 |
| ·TRSV-CP 基因序列测定及同原性比较 | 第44页 |
| ·重组原核表达载体的构建 | 第44-45页 |
| ·原核蛋白表达与鉴定 | 第45-46页 |
| ·多抗血清的制备及检测 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-60页 |
| 附录 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
