| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 前言 | 第12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-26页 |
| ·脂联素基因研究进展 | 第12-19页 |
| ·脂联素的发现及其存在形式 | 第12-14页 |
| ·脂联素受体 | 第14页 |
| ·脂联素基因表达与调控 | 第14-15页 |
| ·脂联素对糖和脂肪代谢的调控作用 | 第15-16页 |
| ·脂联素主要生物学功能 | 第16-17页 |
| ·脂联素基因的结构及其变异 | 第17-19页 |
| ·家畜分子遗传标记技术 | 第19-21页 |
| ·SNP 作为遗传标记的优势 | 第19-20页 |
| ·SNP 检测方法 | 第20-21页 |
| ·重组PCR 技术的发展及应用 | 第21-23页 |
| ·重组PCR 技术的创立和发展 | 第21-22页 |
| ·重组PCR 技术的用途 | 第22页 |
| ·Overlap PCR 技术 | 第22-23页 |
| ·大肠杆菌体外高效表达系统研究进展 | 第23-24页 |
| ·研究目的、意义和内容 | 第24-26页 |
| 第二章 脂联素基因遗传多样性研究 | 第26-55页 |
| ·试验材料 | 第26-28页 |
| ·试验动物样本来源 | 第26页 |
| ·试验数据的收集 | 第26页 |
| ·试验主要试剂 | 第26-27页 |
| ·仪器设备 | 第27-28页 |
| ·主要试剂和溶液的配制 | 第28页 |
| ·试验方法 | 第28-33页 |
| ·血样的采集 | 第28页 |
| ·牛全血基因组DNA 的提取 | 第28-29页 |
| ·PCR 反应所用引物的设计 | 第29-30页 |
| ·DNA 质量的检测、纯化及浓度计算 | 第30-31页 |
| ·样品的PCR 扩增 | 第31-32页 |
| ·扩增产物的PCR-SSCP 检测 | 第32页 |
| ·图像分析 | 第32-33页 |
| ·测序 | 第33页 |
| ·资料的统计与分析 | 第33-34页 |
| ·基因频率和基因型频率的计算 | 第33页 |
| ·基因频率和基因型频率的差异显著性检验（χ~2 独立性检验） | 第33页 |
| ·位点遗传纯合度（Ho）、杂合度（He）和有效等位基因数（Ne） | 第33-34页 |
| ·多态信息含量（polymorphism information content，PIC） | 第34页 |
| ·关联分析统计模型 | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-39页 |
| ·牛基因组DNA 样品的检测 | 第34-35页 |
| ·脂联素基因多态性检测 | 第35-37页 |
| ·脂联素基因启动子区多态性检测 | 第37-38页 |
| ·脂联素基因启动子区插入缺失检测 | 第38-39页 |
| ·脂联素基因多态基因座的群体遗传学分析 | 第39-43页 |
| ·I3 基因座 | 第39-40页 |
| ·3-U 基因座 | 第40-41页 |
| ·P1 基因座插入突变位点 | 第41-42页 |
| ·P3 基因座缺失突变位点 | 第42-43页 |
| ·脂联素基因启动子区P1 和P3 基因座转录因子结合位点预测与插入缺失序列分析 | 第43-47页 |
| ·脂联素基因单倍型分析 | 第47页 |
| ·脂联素基因多态基因座与秦川牛、南阳牛和郏县红牛生长性状的关联分析 | 第47-55页 |
| ·I3 多态基因座与生长性状的关联分析 | 第47-49页 |
| ·3-U 多态基因座与生长性状的关联分析 | 第49-51页 |
| ·P1 基因座插入突变位点与生长性状的关联分析 | 第51-52页 |
| ·P3 基因座缺失突变位点与生长性状的关联分析 | 第52-55页 |
| 第三章 脂联素基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 | 第55-63页 |
| ·材料与方法 | 第55-60页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·方法 | 第56-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-63页 |
| ·Overlap-PCR 扩增脂联素基因CDS 区 | 第60-61页 |
| ·脂联素基因大肠杆菌表达载体pAcrp-32 的构建与鉴定 | 第61页 |
| ·重组蛋白的表达与可溶性分析 | 第61-62页 |
| ·目的蛋白的大量表达和纯化 | 第62-63页 |
| 第四章 讨论 | 第63-69页 |
| ·关于本研究中的突变与N.S.Morsci 研究中的突变的讨论 | 第63-64页 |
| ·突变检测序列的选择 | 第63页 |
| ·突变位点的位置比较 | 第63-64页 |
| ·脂联素基因的保守性分析 | 第64页 |
| ·关于Intron2 的突变位点的讨论 | 第64页 |
| ·关于3-UTR 的突变位点的讨论 | 第64-65页 |
| ·关于启动子区的突变位点的讨论 | 第65页 |
| ·关于P1 基因座的插入突变的讨论 | 第65页 |
| ·关于P3 基因座的缺失突变的讨论 | 第65页 |
| ·关于启动子区的转录因子结合位点的讨论 | 第65-67页 |
| ·关于预测的转录因子的功能的讨论 | 第65-66页 |
| ·关于插入和缺失的序列的讨论及其对启动子活性的影响 | 第66-67页 |
| ·关于脂联素基因多态性及其与生长性状的关联性的讨论 | 第67页 |
| ·关于Overlap-PCR 克隆基因的讨论 | 第67-68页 |
| ·关于脂联素基因在大肠杆菌中的表达的讨论 | 第68-69页 |
| 第五章 结论与创新点 | 第69-70页 |
| ·结论 | 第69页 |
| ·创新点 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 作者简介 | 第78页 |
