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赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)在细胞有丝分裂中的功能研究

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
第一章 绪论第8-18页
   ·组蛋白的修饰第8-9页
     ·组蛋白修饰概况第8页
     ·组蛋白的乙酰化修饰和磷酸化修饰第8页
     ·组蛋白的甲基化修饰第8-9页
   ·组蛋白去甲基化酶第9-14页
     ·组蛋白去甲基化酶的概况及分类第9-10页
     ·四羟酮醇依赖的去甲基化酶:LSD1第10-13页
     ·JHDM家族去甲基化蛋白第13-14页
   ·细胞周期第14-15页
     ·细胞周期概况第14页
     ·细胞周期的分子机制第14-15页
   ·纺锤体组装检验点第15-18页
     ·纺锤体组装检验点概况第15-16页
     ·当前关于脊椎动物纺锤体检验点的模型第16页
     ·微管和动粒间连接与张力的关系第16-17页
     ·纺锤体检验点缺陷与肿瘤发生的关系第17-18页
第二章 材料、仪器与方法第18-34页
   ·材料第18-21页
     ·实验材料第18-19页
     ·相关试剂、耗材第19-21页
   ·主要仪器第21-22页
   ·常用溶液的配置第22-24页
     ·细胞培养用培养基的配置第22页
     ·一般溶液的配置第22-23页
     ·IP实验试剂的配置第23页
     ·10×蛋白质裂解液的配置第23页
     ·IF实验试剂的配置第23-24页
     ·胞液分离萃取分析实验试剂的配置第24页
     ·染色质免疫沉淀实验试剂的配置第24页
   ·实验方法第24-34页
     ·贴壁细胞培养方法第24-25页
     ·HeLa细胞的同步化第25页
     ·胞液分离萃取分析(subcellular fractionation assays)第25-26页
     ·贴壁细胞总蛋白质的提取第26页
     ·免疫沉淀(IP)或免疫共沉淀实验(Co—IP)第26页
     ·蛋白修饰分析:磷酸酶CIP处理第26-27页
     ·蛋白质印迹实验(Western blot)第27页
     ·免疫荧光(IF)实验第27-28页
     ·细胞转染实验第28-29页
     ·RNA干扰抑制蛋白表达实验第29-30页
     ·微管再生实验(MT regrowth assay)第30-32页
       ·细胞流式分析前的收集与固定第30页
       ·流式分析细胞处于有丝分裂期比例的样品制备第30-32页
     ·启动子活性检测第32页
     ·染色质免疫沉淀(Chromatin immunoprecipitation,CHIP)第32-34页
第三章 结果第34-52页
   ·LSD1在Nocodazole同步化的HeLa细胞中被高度磷酸化第34-36页
   ·LSD1在细胞中的定位第36页
   ·LSD1在细胞有丝分裂中的功能第36-52页
     ·LSD1是有丝分裂过程中染色体正确分离所必需的第36-42页
     ·LSD1不参与纺锤体组装检验点的调控第42-44页
     ·LSD1不参与有丝分裂期微管的组装第44页
     ·LSD1能够活化MAD2和BubR1启动子第44-52页
第四章 讨论第52-54页
第五章 结论第54-55页
附录一 缩略词第55-56页
附录二 参考文献第56-62页
附录三 致谢第62-63页

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