| 主要英文缩写词 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-16页 |
| 第2章:河南省有偿供血者HIV-1 外膜蛋白env基因序列分析 | 第16-28页 |
| ·材料 | 第16-17页 |
| ·菌株及质粒 | 第16页 |
| ·工具酶和试剂 | 第16页 |
| ·引物合成 | 第16页 |
| ·细胞和样品 | 第16页 |
| ·实验中的仪器 | 第16-17页 |
| ·方法 | 第17-18页 |
| ·样品处理 | 第17页 |
| ·HIV-1 env 基因的扩增 | 第17页 |
| ·扩增片段的回收、纯化及连接pGEM-T载体 | 第17页 |
| ·阳性克隆的筛选及鉴定 | 第17页 |
| ·序列测定 | 第17页 |
| ·核苷酸序列分析 | 第17-18页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第18页 |
| ·共有序列的获得和人类密码子的优化 | 第18页 |
| ·结果与讨论 | 第18-26页 |
| ·基因亚型的鉴定及系统进化树分析 | 第18-20页 |
| ·推导的氨基酸序列分析 | 第20-25页 |
| ·V3 环四肽序列特征 | 第25页 |
| ·Gp120/Gp41 剪切位点 | 第25-26页 |
| ·b12、2F5 及4E10 中和抗体识别位点 | 第26页 |
| ·本章小结 | 第26-28页 |
| 第3章:含HIV-1 env基因的质粒DNA疫苗,重组腺病毒疫苗的构建和免疫效果研究 | 第28-50页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·菌株和质粒 | 第28页 |
| ·细胞 | 第28页 |
| ·工具酶和试剂 | 第28页 |
| ·血清与抗体 | 第28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28-29页 |
| ·实验动物 | 第29页 |
| ·引物合成 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-35页 |
| ·env 共有基因序列的获得,优化和全基因合成 | 第29页 |
| ·优化基因的测序鉴定和Western Blot 法鉴定 | 第29-30页 |
| ·质粒DNA疫苗pVR-mod.gp160 构建及鉴定 | 第30-31页 |
| ·穿梭质粒pDC316-mod.gp160 的构建,鉴定和重组腺病毒的包装 | 第31页 |
| ·重组腺病毒的传代和大量扩增 | 第31-32页 |
| ·重组腺病毒的鉴定 | 第32页 |
| ·重组腺病毒滴度的测定 | 第32-33页 |
| ·小鼠免疫 | 第33页 |
| ·血清和脾脏淋巴细胞的采集 | 第33-34页 |
| ·酶联免疫斑点法(ELISPOT)筛选肽库和检测细胞免疫反应 | 第34-35页 |
| ·ELISA法检测体液免疫反应 | 第35页 |
| ·结果 | 第35-46页 |
| ·HIV-1gp160 基因共有序列的获得,优化和鉴定 | 第35-39页 |
| ·Western Blot鉴定质粒pcDNA3.1-mod.gp160 中gp160 基因的表达 | 第39-40页 |
| ·pVR-mod.gp160 和pDC316-mod.gp160 真核表达质粒的鉴定 | 第40-41页 |
| ·重组腺病毒的鉴定结果 | 第41-43页 |
| ·重组腺病毒滴度的测定 | 第43页 |
| ·肽库的筛选和细胞免疫反应 | 第43-45页 |
| ·ELISA法检测体液免疫反应 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| ·共有序列的获得和优化 | 第46-47页 |
| ·疫苗载体的选择 | 第47页 |
| ·免疫效果和免疫方案的分析 | 第47-48页 |
| ·本章小结 | 第48-50页 |
| 第4章:HIV-1 C亚型Gp120 蛋白表达、纯化及其抗体制备的研究 | 第50-58页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·菌株和质粒 | 第50页 |
| ·工具酶和试剂 | 第50页 |
| ·细胞和样品 | 第50页 |
| ·实验中的仪器 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-52页 |
| ·pET-30a-gp120 重组表达体的构建及鉴定 | 第50-51页 |
| ·重组蛋白的表达及鉴定 | 第51页 |
| ·表达产物的纯化及定量检测 | 第51页 |
| ·C亚型HIV-1 Ggp120 多克隆抗体的制备 | 第51页 |
| ·抗体滴度的测定 | 第51-52页 |
| ·多抗的特异性检测 | 第52页 |
| ·结果 | 第52-54页 |
| ·重组表达载体的构建及鉴定 | 第52-53页 |
| ·C亚型Gp120 蛋白的小量表达及产物鉴定 | 第53页 |
| ·C亚型gp120 蛋白大量表达后纯化和鉴定 | 第53页 |
| ·抗体滴度的测定 | 第53-54页 |
| ·C亚型Gp120 多抗的特异性检测 | 第54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| ·本章小结 | 第56-58页 |
| 结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 附录 | 第64-71页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |