| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 1 本项目的研究内容、研究目标和拟解决的关键问题 | 第12-13页 |
| ·研究内容 | 第12页 |
| ·研究目标 | 第12页 |
| ·拟解决的关键问题 | 第12-13页 |
| 2 本项目的特色和创新之处及立论依据 | 第13页 |
| 第一章 猪瘟综述 | 第13-21页 |
| 1 病原 | 第13-14页 |
| 2 病毒的生物学特征 | 第14-15页 |
| 3 流行病学 | 第15页 |
| ·传染源 | 第15页 |
| ·传播途径 | 第15页 |
| ·易感动物 | 第15页 |
| ·我国猪瘟的流行特点 | 第15页 |
| 4 临床症状 | 第15-16页 |
| ·典型猪瘟 | 第15-16页 |
| ·最急性型 | 第15页 |
| ·急性型 | 第15-16页 |
| ·亚急性型 | 第16页 |
| ·慢性型 | 第16页 |
| ·非典型猪瘟（温和型） | 第16页 |
| ·繁殖障碍型 | 第16页 |
| 5 临床诊断 | 第16-17页 |
| 6 实验室诊断 | 第17-18页 |
| ·荧光抗体试验(FAT) | 第17页 |
| ·间接血凝试验 | 第17-18页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第18页 |
| ·过氧化物酶联中和试验（NPLA） | 第18页 |
| ·反转录－聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第18页 |
| 7 猪瘟的防治 | 第18-21页 |
| ·猪瘟的预防 | 第18-19页 |
| ·加强饲养管理 | 第18-19页 |
| ·坚持自繁自养、全进全出的原则 | 第19页 |
| ·制定科学免疫程序,实施强化免疫，正确使用零时免疫 | 第19页 |
| ·淘汰严重传染猪和种猪 | 第19页 |
| ·猪瘟的治疗 | 第19-21页 |
| 第二章 猪繁殖与呼吸系统综合征综述 | 第21-26页 |
| 1 病原 | 第21页 |
| 2 分子生物学特征 | 第21-22页 |
| 3 流行病学 | 第22页 |
| 4 临床症状 | 第22-23页 |
| ·母猪临床症状 | 第23页 |
| ·仔猪临床症状 | 第23页 |
| ·育肥猪临床症状 | 第23页 |
| ·公猪临床症状 | 第23页 |
| 5 病理变化 | 第23-24页 |
| 6 实验室诊断 | 第24-25页 |
| ·免疫过氧化物酶单层试验(IPMA) | 第24页 |
| ·间接荧光抗体试验(IFA) | 第24页 |
| ·血清中和试验(SN) | 第24页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第24页 |
| ·反转录－聚合酶链反应RT-RCR 技术 | 第24-25页 |
| 7 PRRS 的防治 | 第25-26页 |
| ·PRRS 的预防 | 第25页 |
| ·疫苗免疫 | 第25页 |
| ·种源控制 | 第25页 |
| ·加强饲养管理 | 第25页 |
| ·加强猪瘟、口蹄疫等的免疫工作 | 第25页 |
| ·治疗 | 第25-26页 |
| 第三章 多重RT-PCR 一步法技术同时检测猪瘟病毒和蓝耳病病毒方法的建立以及初步应用 | 第26-36页 |
| 1 材料与方法 | 第27-30页 |
| ·病毒株 | 第27-28页 |
| ·试剂 | 第28页 |
| ·仪器 | 第28页 |
| ·引物设计与合成 | 第28页 |
| ·病毒核酸提取 | 第28-29页 |
| ·多重RT-PCR 一步法技术同时检测CSFV 和PRRSV 方法的建立 | 第29页 |
| ·最佳反应条件的测定 | 第29页 |
| ·敏感性测定 | 第29页 |
| ·特异性测定 | 第29页 |
| ·多重PCR 的初步应用 | 第29-30页 |
| ·已知样品的检测 | 第29页 |
| ·临床样品的检测 | 第29-30页 |
| 2 结果 | 第30-34页 |
| ·多重RT-PCR 一步法最佳反应条件的测定 | 第30-32页 |
| ·最佳引物浓度的测定 | 第30-31页 |
| ·最佳镁离子浓度的测定 | 第31页 |
| ·最佳退火温度的测定 | 第31-32页 |
| ·最佳循环次数的测定 | 第32页 |
| ·敏感性的测定 | 第32-33页 |
| ·特异性测定 | 第33页 |
| ·临床样品的检测结果 | 第33-34页 |
| 3 讨论 | 第34-35页 |
| 4 结论 | 第35-36页 |
| 第四章 SYBR GREEN I 实时荧光定量PCR 检测猪瘟病毒 | 第36-44页 |
| 1 材料和方法 | 第37-38页 |
| ·病毒 | 第37页 |
| ·试剂和仪器 | 第37页 |
| ·病毒RNA 的提取 | 第37页 |
| ·引物设计与合成 | 第37-38页 |
| ·反应最佳引物浓度的选择 | 第38页 |
| ·SYBR Green I PCR 检测 | 第38页 |
| ·灵敏度试验和标准曲线的建立 | 第38页 |
| ·特异性试验 | 第38页 |
| ·对临床样品的检测 | 第38页 |
| 2 结果 | 第38-42页 |
| ·反应最佳引物浓度的选择 | 第38-39页 |
| ·灵敏度试验 | 第39页 |
| ·标准曲线的建立 | 第39-40页 |
| ·特异性试验 | 第40-41页 |
| ·对临床样品的检测 | 第41页 |
| ·琼脂糖电泳 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-43页 |
| 4 结论 | 第43-44页 |
| 第五章 SYBR GREEN I 实时荧光定量PCR 检测猪繁殖与呼吸综合征病毒 | 第44-52页 |
| 1 材料和方法 | 第45-46页 |
| ·病毒 | 第45页 |
| ·试剂和仪器 | 第45页 |
| ·病毒RNA 的提取 | 第45页 |
| ·引物设计与合成 | 第45-46页 |
| ·反应最佳引物浓度的选择 | 第46页 |
| ·SYBR Green I PCR 检测 | 第46页 |
| ·灵敏度试验和标准曲线的建立 | 第46页 |
| ·特异性试验 | 第46页 |
| ·对临床样品的检测 | 第46页 |
| 2 结果 | 第46-50页 |
| ·引物浓度 | 第46-47页 |
| ·灵敏度试验 | 第47页 |
| ·标准曲线的建立 | 第47-48页 |
| ·特异性试验 | 第48-49页 |
| ·对临床样品的检测 | 第49页 |
| ·琼脂糖电泳 | 第49-50页 |
| 3 讨论 | 第50-51页 |
| 4 结论 | 第51-52页 |
| 第六章 斑点免疫金渗滤法同时检测猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征抗体的研究 | 第52-60页 |
| 1 材料 | 第53-54页 |
| ·试剂和仪器 | 第53页 |
| ·HCV 和PRRS 抗原 | 第53页 |
| ·猪抗HCV 和PRRS 的阳性血清 | 第53页 |
| ·待检猪血清 | 第53-54页 |
| 2 方法 | 第54-55页 |
| ·HCV 和PRRS 抗原提纯 | 第54页 |
| ·胶体金的制备 | 第54页 |
| ·SPA 胶体金的制备 | 第54页 |
| ·DIGFA 法 | 第54-55页 |
| ·反应盒的准备 | 第54-55页 |
| ·DIGFA 操作步骤 | 第55页 |
| 3 结果 | 第55-58页 |
| ·DIGFA 最适条件的选择 | 第55-58页 |
| ·NC 膜的选择 | 第55-56页 |
| ·HCV 和PRRS 最佳点样抗原浓度的选择 | 第56页 |
| ·封闭液的选择 | 第56-57页 |
| ·同时检测HCV 和PRRSV 的效果实验 | 第57-58页 |
| ·特异性试验 | 第58页 |
| ·重复性实验 | 第58页 |
| ·稳定性试验 | 第58页 |
| 4 讨论 | 第58-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 总结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
