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三七总皂苷及其单体20(S)-PPD抗动脉粥样硬化作用及调控caveolae/Cav1的机制研究

缩略词表第9-10页
中文摘要第10-12页
Abstract第12-13页
引言第14-16页
第一部分 PNS及 PPD对 Apo E~(-/-)小鼠AS相关病变的影响第16-32页
    材料与方法第16-21页
        1.实验动物与饲养条件第16页
        2.试剂及仪器第16-17页
            2.1 主要试剂第16页
            2.2 仪器和耗材第16-17页
            2.3 药物及试剂配制第17页
        3.实验方法第17-21页
            3.1 动物分组、给药第17页
            3.2 取材第17-18页
            3.3 小鼠外耳廓及心脏表面血流监测第18页
            3.4 血脂检测第18页
            3.5 脾脏指数计算第18页
            3.6 动脉血管油红O染色第18页
            3.7 主动脉瓣膜区石蜡包埋、切片及苏木素-伊红(HE)染色第18-19页
            3.8 酶联免疫双抗夹心法(ELISA)检测血清VEGF、LOX-1 水平第19页
            3.9 统计学分析第19-21页
    结果第21-28页
        1.动物一般情况第21页
        2.主动脉血管脂质斑块沉积情况第21-23页
        3.小鼠血脂水平第23-24页
        4.HE染色观察主动脉窦管腔斑块情况第24-25页
        5.小鼠体表及心脏微循环血流灌注量第25-26页
        6.小鼠血清VEGF、LOX-1 水平第26-28页
    分析与讨论第28-32页
        1.中医学对AS的认识第28页
        2.干预药物和动物模型的选择第28-29页
        3.PNS及 PPD对 AS相关病理改变的影响第29-31页
            3.1 PNS及 PPD对 AS模型脂代谢的影响第29-30页
            3.2 PNS及 PPD对 AS模型斑块病理进程的影响第30页
            3.3 PNS及 PPD对 AS模型VEGF的影响第30-31页
            3.4 PNS及 PPD对 AS模型微循环灌注的影响第31页
        4.小结第31-32页
第二部分 PNS及 PPD对 HUVECs作用的机制研究第32-53页
    材料与方法第32-41页
        1.实验细胞第32页
        2.试剂及仪器第32-34页
            2.1 主要试剂第32-33页
            2.2 仪器和耗材第33-34页
            2.3 药物及试剂配制第34页
        3.实验方法第34-41页
            3.1 细胞培养第34页
            3.2 CCK8 法检测HUVECs活力第34-35页
            3.3 透射电镜观察各组细胞caveolae结构变化第35页
            3.4 免疫荧光法检测各组细胞神经节苷酯GM1变化第35-36页
            3.5 免疫荧光法检测各组细胞Cav1及其磷酸化蛋白变化情况第36-37页
            3.6 HUVECs总蛋白及胞浆蛋白的提取与制备第37页
            3.7 Western Blot法检测HUVECs总蛋白及胞浆蛋白的表达第37-38页
            3.8 RT-PCR检测细胞Cav1、VEGF、ICAM-1 mRNA相对表达量第38-39页
            3.9 Fluo-4 AM检测细胞内钙离子浓度第39-40页
            3.10 统计学处理第40-41页
    结果第41-50页
        1.细胞用药浓度及用药时间的选择第41-42页
            1.1 不同浓度的PNS及 PPD作用HUVECs24h对细胞活力的影响第41页
            1.2 100μmol/L PPD作用HUVECs不同时间对细胞活力的影响第41页
            1.3 胆固醇耗竭剂MβCD使用的最佳作用浓度测定第41-42页
            1.4 MβCD预处理细胞后PNS及 PPD对 HUVECs细胞活力的影响第42页
        2.PNS单体成分对caveolae及其关键蛋白定位及表达的影响第42-48页
            2.1 PPD作用HUVECs不同时间对caveolae形态结构的影响第42-43页
            2.2 PNS不同单体成分对caveolae神经节苷酯GM1定位的影响第43-44页
            2.3 PPD对caveolae关键蛋白Cav1及pCav1细胞内定位的影响第44-45页
            2.4 PPD对 HUVECs Cav1 表达的影响第45-46页
            2.5 PPD对 HUVECs钙离子通道的影响第46-48页
        3.PNS及 PPD对 HUVECs VEGF、ICAM-1、ox-LDLR mRNA表达的影响第48-50页
    分析与讨论第50-53页
        1.Caveolae/Cav1 的概述第50页
        2.PNS单体成分影响HUVECs caveolae/Cav1 的结构和表达第50-51页
        3.PNS及单体成分通过调控caveolae/Cav1 抑制细胞增殖第51-52页
        4.小结第52-53页
结论第53-54页
致谢第54-55页
参考文献第55-62页
附录第62-80页
    附录一:文献综述第62-68页
        参考文献第65-68页
    附录二:在校期间发表学术论文第68-80页
    附录三:参加学术会议情况第80页

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