花生抗黄曲霉相关基因的分离与表达
| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-18页 |
| ·国内外研究动态 | 第11-17页 |
| ·花生在我国发展状况 | 第11-13页 |
| ·黄曲霉与黄曲霉毒素 | 第13-14页 |
| ·花生黄曲霉抗性的研究进展 | 第14-15页 |
| ·花生抗黄曲霉研究进展 | 第15-17页 |
| ·研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-30页 |
| ·实验材料 | 第18-21页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·菌种与质粒 | 第18页 |
| ·试剂 | 第18页 |
| ·培养基和缓冲液的配制 | 第18-19页 |
| ·仪器与设备 | 第19页 |
| ·引物设计 | 第19-21页 |
| ·实验方法 | 第21-30页 |
| ·基因芯片数据分析 | 第21页 |
| ·黄曲霉菌种培养 | 第21页 |
| ·花生样品的处理及取样 | 第21-22页 |
| ·目的基因的实时荧光定量PCR检测 | 第22-24页 |
| ·目的基因全长的获得 | 第24-25页 |
| ·目的基因表达载体的构建及原核表达 | 第25-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-51页 |
| ·基因芯片的BLAST分析 | 第30-33页 |
| ·目的基因的实时荧光定量PCR检测 | 第33-41页 |
| ·总RNA提取及cDNA第一链的合成 | 第33页 |
| ·RT-PCR对引物的检测 | 第33-35页 |
| ·目的基因实时荧光定量PCR检测 | 第35-41页 |
| ·目的基因全长克隆 | 第41-43页 |
| ·目的基因的5'RACE | 第41-42页 |
| ·目的基因的3'RACE | 第42-43页 |
| ·目的基因原核表达载体的构建及蛋白表达 | 第43-45页 |
| ·表达载体的构建 | 第43-45页 |
| ·原核表达及产物电泳 | 第45页 |
| ·目的基因的生物信息学分析 | 第45-51页 |
| ·核酸序列的基本分析 | 第46页 |
| ·AW86基因的氨基酸分析 | 第46页 |
| ·AW86基因ORF分析 | 第46页 |
| ·AW86基因编码蛋白的同源性分析 | 第46-49页 |
| ·AW86基因的分子进化分析 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| ·花生种皮RNA提取优化 | 第51页 |
| ·基因芯片及定量PCR在研究基因差异表达上的应用 | 第51-52页 |
| ·基因全长的获得及生物学信息的分析 | 第52页 |
| ·克隆基因原核表达条件的优化 | 第52-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 附录 | 第59-61页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第61页 |
