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RNA干扰livin基因对肿瘤细胞电离辐射生物效应的影响

内容提要第1-9页
英文缩写第9-10页
第一章 绪论第10-27页
 1.凋亡抑制蛋白 (inhibitor of apoptosis protein) IPA第10-11页
 2.Livin 的生物学特性第11-13页
 3. Livin 的功能及作用机制第13-15页
 4. Livin 与肿瘤第15-20页
 5. RNAi 技术与应用第20-27页
第二章 材料与方法第27-45页
 1. 主要试剂及器材第27-30页
   ·试剂第27-29页
   ·器材第29-30页
 2. 主要仪器第30-31页
 3. 细胞株第31页
 4. 细胞生物学实验方法第31-37页
   ·培养液配制第31-32页
   ·小牛血清制备第32页
   ·胰酶配制第32页
   ·细胞培养第32页
   ·细胞冻存第32页
   ·细胞转染第32-33页
   ·照射条件第33页
   ·Western Blot 检测细胞蛋白表达第33-36页
   ·FCM 检测细胞周期第36页
   ·FCM 检测细胞凋亡第36-37页
 5. 细菌培养技术第37-40页
   ·菌种第37页
   ·细菌LB 培养基的配制第37页
   ·细菌复苏第37页
   ·细菌培养第37页
   ·细菌冻存第37-38页
   ·感受态菌的制备第38页
   ·细菌转化第38页
   ·质粒提取第38-40页
   ·质粒纯化法第40页
 6. 分子生物学实验方法第40-44页
   ·载体的构建第40-42页
   ·含pSilence13.1-H1 neo 的阳性克隆DNA 测序鉴定第42页
   ·RT-PCR第42-44页
 7. 统计学方法第44-45页
第三章 实验结果第45-65页
 1. X 射线对LIVIN 蛋白表达水平的影响第45-46页
   ·不同剂量X 射线照射对HeLa 细胞livin 蛋白表达的影响第45页
   ·4.0 Gy X 射线照射对HeLa 细胞livin 蛋白表达的影响第45-46页
 2. X射线对LIVIN 基因转录水平的影响第46-48页
   ·不同剂量照射对HeLa 细胞livin 基因转录水平的影响第46-47页
   ·4.0Gy X 射线照射HeLa 细胞对livin 基因转录水平的影响第47-48页
 3. X 射线照射对HELA 细胞周期进程的影响第48-50页
   ·不同剂量X 射线照射对HeLa 细胞周期进程的影响第48-49页
   ·4.0 Gy X 射线照射对HeLa 细胞周期进程的影响第49-50页
 4 X 射线对HELA 细胞凋亡的影响第50-51页
   ·不同剂量照射HeLa 细胞对细胞凋亡变化的影响第50页
   ·4.0 Gy X 射线照射HeLa 细胞对细胞凋亡变化的影响第50-51页
 5 重组干扰载体PSILENCER3.1-H1 NEO-LIVIN 的构建及鉴定第51-55页
   ·pSilence13.1-H1 neo-livin 干扰质粒的构建第51-52页
   ·pSilence13.1-H1 neo-livin 干扰质粒的鉴定第52-53页
   ·重组干扰载体干扰效率检测第53-55页
 6 X 射线对稳定转染SHRNA 的HELA 细胞LIVIN 基因转录水平影响第55-58页
   ·稳定转染shRNA 的HeLa 细胞给予4.0 Gy X 射线照射后12 h ,livin 基因转录水平的变化第55-56页
   ·稳定转染shRNA 的HeLa 细胞给予4.0 Gy X 射线照射后24 h ,livin 基因转录水平的变化第56-57页
   ·稳定转染shRNA 的HeLa 细胞给予4.0 Gy X 射线照射后48h,livin 基因转录水平的变化第57-58页
 7 X 射线对转染SHRNA 的HELA 细胞LIVIN 蛋白表达的影响第58-61页
   ·稳定转染shRNA 的HeLa 细胞给予4.0 Gy X 射线照射后12h livin 蛋白表达的变化第58-59页
   ·稳定转染shRNA 的HeLa 细胞给予4.0 Gy X 射线照射后24h,livin 蛋白表达的变化第59-60页
   ·稳定转染shRNA 的HeLa 细胞给予4.0 Gy X 射线照射后48h,livin 蛋白表达的变化第60-61页
 8 X 射线对稳定转染SHRNA 的HELA 细胞周期分布的影响第61-63页
   ·稳定转染shRNA 的HeLa 细胞给予4.0 Gy X 射线照射后12h 细胞周期变化第61-62页
   ·稳定转染shRNA 的HeLa 细胞给予4.0 Gy X 射线照射后24h 细胞周期变化第62页
   ·稳定转染shRNA 的HeLa 细胞给予4.0 Gy X 射线照射后48h 细胞周期变化第62-63页
 9 X 射线对转染SHRNA 的HELA 细胞凋亡的影响第63-65页
第四章 讨论第65-72页
 1. 电离辐射与 livin 表达第66-67页
 2. 干扰载体与干扰效率第67-68页
 3. Livin 在细胞周期调控中的作用第68-69页
 4. Livin 在细胞凋亡中的作用第69-71页
 5. 研究展望第71-72页
结论第72-73页
参考文献第73-82页
攻博期间发表的学术论文第82页
攻博期间出版的专著第82-83页
致谢第83-84页
中文摘要第84-88页
ABSTRACT第88-91页

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