| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| Ⅰ 文献综述 | 第9-23页 |
| 1 水稻耐热性研究进展 | 第9-14页 |
| ·高温对水稻的影响 | 第9-13页 |
| ·高温对水稻生长发育的影响 | 第9-10页 |
| ·高温对水稻产量的影响 | 第10-11页 |
| ·高温对水稻品质的影响 | 第11页 |
| ·高温对水稻生理机能的影响 | 第11-13页 |
| ·水稻耐热性的鉴定和评价 | 第13页 |
| ·水稻耐热性及育种研究 | 第13-14页 |
| 2 水稻转化受体系统 | 第14-15页 |
| ·原生质体再生系统 | 第14页 |
| ·愈伤组织再生系统 | 第14-15页 |
| ·幼嫩子房、花粉、卵细胞、幼胚 | 第15页 |
| 3 转基因方法 | 第15-18页 |
| ·基因枪法 | 第15页 |
| ·农杆菌介导法 | 第15-16页 |
| ·PEG转化法 | 第16页 |
| ·电激法 | 第16-17页 |
| ·花粉管通道法 | 第17页 |
| ·脂质体转化法 | 第17页 |
| ·激光微束介导转化法 | 第17页 |
| ·低能离子束介导法 | 第17-18页 |
| 4 水稻转基因研究存在的问题 | 第18-22页 |
| ·可利用的基因较少,大部分研究处于研究探索阶段 | 第18页 |
| ·转基因沉默 | 第18-19页 |
| ·位置效应 | 第18-19页 |
| ·转录水平的基因沉默 | 第19页 |
| ·转录后水平的基因沉默 | 第19页 |
| ·转基因植物的环境安全性问题 | 第19-22页 |
| ·转基因漂移及其生态风险 | 第20页 |
| ·对非靶标生物及生物多样性的影响 | 第20-21页 |
| ·转基因水稻本身"杂草化" | 第21页 |
| ·转基因食品的安全问题 | 第21-22页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| Ⅱ 材料和方法 | 第23-34页 |
| 1 实验材料 | 第23-26页 |
| ·供试品种 | 第23页 |
| ·质粒及菌种 | 第23页 |
| ·试剂的配制 | 第23-25页 |
| ·受体系统建立中的常用抗生素,激素及生长调节剂(表1) | 第23-24页 |
| ·水稻转化培养基 | 第24-25页 |
| ·细菌培养基 | 第25页 |
| ·重要试剂及溶液 | 第25-26页 |
| ·重要试剂 | 第25页 |
| ·重要溶液 | 第25-26页 |
| ·重要仪器设备 | 第26页 |
| 2 水稻转基因系统的建立 | 第26-31页 |
| ·外植体培养方法 | 第26-27页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第27-29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第27页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第27-28页 |
| ·质粒的提取 | 第28-29页 |
| ·水稻基因转化实验方法 | 第29-31页 |
| 3 转基因水稻苗的分子生物学检测 | 第31-34页 |
| ·再生植株DNA微量提取 | 第31页 |
| ·转基因水稻植株中hpt基因的PCR检测 | 第31-32页 |
| ·转基因水稻植株中TT1基因的PCR检测 | 第32-33页 |
| ·RNA的提取 | 第33页 |
| ·One Step RT-PCR的方法 | 第33-34页 |
| Ⅲ 结果与分析 | 第34-42页 |
| 1 日本晴种子不同成熟度对愈伤诱导的影响 | 第34页 |
| 2 日本晴不同外植体诱导的愈伤组织共培养时间及生长状况比较 | 第34-35页 |
| 3 共培养温度对抗性愈伤率的影响 | 第35-36页 |
| 4 潮霉素(Hyg)筛选压的确定 | 第36-37页 |
| 5 日本晴不同外植体愈伤组织经农杆菌介导转化后的稳定转化表现 | 第37-38页 |
| 6 转化植株的分子生物学检测结果 | 第38-40页 |
| ·对转化植株hpt基因和TT1基因的PCR分析 | 第38-39页 |
| ·对转化植株所含TT1基因进行RT-PCR分析 | 第39-40页 |
| 7 转化植株耐热性测试 | 第40-42页 |
| Ⅳ 讨论 | 第42-46页 |
| 1 水稻转基因体系的完善 | 第42-43页 |
| ·转化受体的选择 | 第42页 |
| ·共培养过程的优化 | 第42-43页 |
| 2 日本晴成熟胚和幼胚作为外植体的遗传转化比较 | 第43-44页 |
| 3 水稻植株耐热性评价 | 第44-46页 |
| ⅴ 附图 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
