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猪肺炎支原体P97 C末端蛋白抗原表位分析及抗原捕捉ELISA方法初步研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 引言第14-26页
   ·猪肺炎支原体的研究概况第14-16页
     ·病原学第14-15页
     ·流行病学第15页
     ·发病机制第15页
     ·临床症状及病理变化第15-16页
     ·猪支原体肺炎免疫学研究第16页
   ·猪肺炎支原体的基因组结构及主要蛋白第16-19页
     ·猪肺炎支原体的基因组结构第16页
     ·P97 黏附因子第16-17页
     ·P102 蛋白第17页
     ·P46 蛋白第17-18页
     ·P159 蛋白第18页
     ·P65 蛋白第18页
     ·Dnak 蛋白第18页
     ·P36 蛋白第18-19页
   ·抗原表位及猪肺炎支原体抗原表位研究概况第19-21页
     ·抗原表位研究方法第19-20页
     ·抗原表位研究的意义第20页
     ·抗原表位应用前景第20页
     ·猪肺炎支原体抗原表位的研究进展第20-21页
   ·Mhp 诊断方法的研究进展第21-23页
     ·病原学诊断方法第21页
     ·血清学诊断方法第21-22页
     ·分子生物学诊断方法第22-23页
   ·猪肺炎支原体的防治第23-25页
     ·国外疫苗研究进展第23页
     ·国内疫苗研究进展第23-24页
     ·基因工程疫苗第24-25页
   ·本研究的目的和意义第25-26页
第二章 猪肺炎支原体 P97 C 末端蛋白表位分析第26-42页
   ·材料和方法第26-33页
     ·材料第26-29页
     ·实验方法第29-33页
   ·结果第33-39页
     ·Mhp P97 C 末端蛋白表位预测及短肽设计第33-34页
     ·Mhp P97 C 末端蛋白表达第34-35页
     ·抗原表位的初步筛选第35页
     ·ELISA 初步筛选抗原表位第35-36页
     ·Pepscan 技术确定最小抗原决定簇第36页
     ·表位多肽免疫原性检测第36-37页
     ·表位多肽反应原性检测第37-38页
     ·表位序列保守性及同源性分析第38-39页
     ·生长抑制实验第39页
   ·讨论第39-42页
第三章 抗原捕捉 ELISA 方法的初步研究第42-62页
   ·材料第42-43页
     ·主要试剂第42页
     ·样本和菌株第42-43页
     ·实验设备第43页
   ·方法第43-47页
     ·单抗腹水的纯化第43页
     ·单抗浓度的测定第43-44页
     ·12% SDS-PAGE 凝胶电泳检测单抗纯度第44页
     ·简易过碘酸钠法 HRP 标记单抗第44页
     ·单抗标记效果的测定第44页
     ·抗原的制备第44页
     ·AC-ELISA 方法的建立及条件优化第44-46页
     ·AC-ELISA 方法的评估第46-47页
   ·实验结果第47-59页
     ·纯化后单抗的纯度及浓度确定第47-48页
     ·单抗标记效果的测定第48页
     ·AC-ELISA 方法的建立及条件优化第48-56页
     ·AC-ELISA 方法的评估第56-59页
   ·讨论第59-62页
     ·配对抗体的选择第59页
     ·单抗的纯化及酶标记第59-60页
     ·ELISA 的特异性及敏感性第60页
     ·AC-ELISA 的反应时间第60页
     ·AC-ELISA 的判定标准第60页
     ·ELISA 的临床应用第60-61页
     ·保存期试验第61-62页
第四章 全文结论第62-63页
参考文献第63-69页
致谢第69-70页
作者简历第70页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第70页

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