| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 符号说明 | 第12-13页 |
| 文献综述 | 第13-32页 |
| 一、禽致病性大肠杆菌相关毒力基因 | 第13-18页 |
| ·毒力岛 | 第13页 |
| ·菌毛 | 第13-14页 |
| ·摄铁系统 | 第14-15页 |
| ·毒素 | 第15页 |
| ·细菌抗宿主杀伤因子 | 第15-16页 |
| ·管家基因 | 第16-17页 |
| ·结论 | 第17-18页 |
| 二、Red 同源重组技术研究进展 | 第18-25页 |
| ·Red 重组系统的结构及其重组机制 | 第18-19页 |
| ·Red 同源重组类型 | 第19-21页 |
| ·常用Red 同源重组系统相关质粒介绍 | 第21-23页 |
| ·Red 同源重组基因敲除的策略及技术难点 | 第23-24页 |
| ·Red 重组技术的应用前景展望 | 第24-25页 |
| 参考文献 | 第25-32页 |
| 研究一、致鹅卵黄性腹膜炎大肠杆菌cya、crp 双基因缺失突变株的构建 | 第32-47页 |
| 摘要 | 第32-34页 |
| 1. 材料 | 第34-35页 |
| ·菌株、质粒 | 第34页 |
| ·培养基和主要试剂 | 第34-35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| 2. 方法 | 第35-40页 |
| ·PCR 引物的设计 | 第35-36页 |
| ·融合PCR 产物的制备和纯化 | 第36-37页 |
| ·感受态细胞的制备及转化 | 第37页 |
| ·电转化 | 第37-38页 |
| ·质粒pKD46 的消除 | 第38页 |
| ·第一次同源重组菌△cya::Cat 的PCR 鉴定 | 第38-39页 |
| ·FLP 位点专一性重组 | 第39页 |
| ·第二次重组菌△cya 的鉴定 | 第39-40页 |
| ·禽致病性大肠杆菌△cya 突变株中crp 基因的缺失 | 第40页 |
| 3. 结果 | 第40-44页 |
| ·融合PCR 产物的制备 | 第40页 |
| ·第一次同源重组菌△cya::Cat 、△cya△crp::Cat 的PCR 鉴定 | 第40-42页 |
| ·第二次重组菌△cya、△cya△crp 的鉴定 | 第42-43页 |
| ·鉴定引物P3、P4；P7、P8 扩增△cya、△cya△crp 菌株染色体上序列分析 | 第43-44页 |
| 4. 讨论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-47页 |
| 研究二、致鹅卵黄性腹膜炎大肠杆菌△cya△crp 双基因缺失突变株的相关功能性分析 | 第47-59页 |
| 摘要 | 第47-48页 |
| 1. 材料 | 第48-49页 |
| ·菌株 | 第48页 |
| ·实验动物 | 第48页 |
| ·培养基 | 第48页 |
| ·主要试剂及配制 | 第48-49页 |
| ·仪器设备 | 第49页 |
| 2. 方法 | 第49-51页 |
| ·细菌的生化鉴定 | 第49页 |
| ·细菌生长曲线测定 | 第49页 |
| ·突变株对鸡的致病力研究 | 第49-51页 |
| 3. 结果 | 第51-55页 |
| ·细菌的生化鉴定 | 第51页 |
| ·突变株的生长曲线测定 | 第51-53页 |
| ·动物实验 | 第53-55页 |
| 4. 讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
