摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
1 前言 | 第12-24页 |
·问题的提出 | 第12-13页 |
·植物成花诱导综述 | 第13-22页 |
·成花诱导概述 | 第13-14页 |
·光周期途径 | 第14-18页 |
·春化途径 | 第18-20页 |
·自主途径 | 第20-21页 |
·赤霉素途径 | 第21-22页 |
·木本植物的童期调控 | 第22-23页 |
·本研究的内容和意义 | 第23-24页 |
2 材料和方法 | 第24-37页 |
·实验材料 | 第24-26页 |
·供试植物材料及基因 | 第24页 |
·供试农杆菌菌株和质粒 | 第24-25页 |
·实验主要试剂和引物 | 第25页 |
·培养基配方 | 第25-26页 |
·实验方法 | 第26-37页 |
·早实枳播种 | 第26页 |
·早实枳各种处理 | 第26页 |
·早实枳处理材料的采样 | 第26页 |
·各种处理后早实枳叶片总RNA提取 | 第26-27页 |
·RNA质量检测 | 第27页 |
·提取RNA的纯化 | 第27页 |
·RNA的反转录 | 第27页 |
·反转录产物的PCR检测 | 第27-28页 |
·PtTFL1和PtTFL2的定量分析 | 第28页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第28页 |
·载体的构建 | 第28-33页 |
·质粒DNA的提取 | 第33页 |
·农杆菌感受态转化 | 第33-34页 |
·转化外植体材料的准备 | 第34页 |
·农杆菌介导的转化 | 第34-37页 |
·烟草转化实验 | 第34-35页 |
·转基因烟草的分子生物学检测 | 第35-36页 |
·转基因烟草阳性苗的移栽 | 第36页 |
·早实枳转化实验 | 第36-37页 |
·转基因早实枳苗的移栽 | 第37页 |
3 结果与分析 | 第37-51页 |
·PtTFL1和PtTFL2的序列分析 | 第37-41页 |
·PtTFL1和PtTFL2的全序列分析 | 第37-38页 |
·TFL1的系统进化树 | 第38页 |
·PtTFL1和PtTFL2同源性分析 | 第38-39页 |
·PtTFL1和PtTFL2保守位点分析 | 第39-41页 |
·PtTFL1和PtTFL2的表达模式 | 第41-43页 |
·PtTFL1和PtTFL2的转化实验 | 第43-51页 |
·载体构建的PCR及酶切检测 | 第43页 |
·农杆菌中目的基因的检测 | 第43-44页 |
·N.Tabacum Linn.的叶片对HygB的敏感性 | 第44-45页 |
·N.nudicaulis的根对HygB的敏感性 | 第45-46页 |
·转基因N.nudicaulis的PCR检测 | 第46-47页 |
·转基因N.nudicaulis的RT-PCR检测 | 第47-48页 |
·转基因N.nudicaulis的表型分析 | 第48-49页 |
·转基因N.tabacum Linn.的表型分析 | 第49-50页 |
·早实枳对HygB的敏感性实验 | 第50-51页 |
·早实枳的生根及微芽嫁接 | 第51页 |
4 讨论 | 第51-56页 |
·PtTFL1和PtTFL2在进化上具有高度保守性 | 第51-52页 |
·PtTFL1和PtTFL2基因的表达模式 | 第52页 |
·烟草对HygB的敏感性 | 第52-53页 |
·转化PtTFL1和PtTFL2两种烟草的T_0代植株表型明显 | 第53-54页 |
·实验过程中出现的问题及解决方法 | 第54-55页 |
·本研究可以开展的下一步工作 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-66页 |
附录 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |