| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 英文缩写与中文对照 | 第14-16页 |
| 第一章 MK在肿瘤检测和治疗中应用的研究进展 | 第16-28页 |
| 1. Midkine(MK)的结构及生物学功能 | 第16-17页 |
| 2 MK在肿瘤中的表达及作用 | 第17-18页 |
| 3 MK作为基因治疗的新靶点 | 第18页 |
| 4 单链抗体SCFV在肿瘤诊疗中的运用 | 第18-20页 |
| ·单链抗体SCFV概念 | 第18-19页 |
| ·单链抗体的特点 | 第19页 |
| ·单链抗体的及其在肿瘤诊疗中的研究 | 第19-20页 |
| 5. NKG2D配体MICA/B在肿瘤免疫中的作用 | 第20-23页 |
| 6 结束语 | 第23页 |
| 参考文献 | 第23-28页 |
| 第二章 人中期因子(Midkine)单克隆抗体和ELISA检测试剂盒的研发 | 第28-40页 |
| 1 研究背景 | 第28页 |
| 2 材料和方法 | 第28-33页 |
| ·试验材料 | 第28-29页 |
| ·试剂配制 | 第29页 |
| ·动物免疫 | 第29页 |
| ·血清效价测定 | 第29页 |
| ·细胞融合与阳性孔的筛选及其克隆 | 第29-31页 |
| ·单细胞克隆 | 第31页 |
| ·单抗亚型的鉴定和抗体亲和力的测定 | 第31页 |
| ·抗体制备 | 第31-32页 |
| ·抗体的纯化 | 第32页 |
| ·抗体的标记 | 第32页 |
| ·MK夹心ELISA法检测试剂盒的制备 | 第32-33页 |
| ·Western-bloting验证抗体的特异性 | 第33页 |
| 3 结果 | 第33-37页 |
| ·血清效价 | 第33页 |
| ·单克隆抗体亚类鉴定和三株抗体亲和力的比较 | 第33-34页 |
| ·抗体的纯化 | 第34页 |
| ·酶标抗体的效价 | 第34-35页 |
| ·ELISA反应体系构建 | 第35-36页 |
| ·血清样本检测 | 第36页 |
| ·Western blot和免疫组织化学分析 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-40页 |
| 第三章 MK上调MIC A/B参与肿瘤的免疫逃逸 | 第40-56页 |
| 1 研究背景 | 第40-41页 |
| 2 材料和方法 | 第41-44页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-44页 |
| 3 结果 | 第44-53页 |
| ·稳定表达MK细胞克隆的建立 | 第44页 |
| ·肿瘤细胞模型中MICA/B与MK的相关性分析 | 第44-46页 |
| ·肿瘤患者血清中MK与MIC A/B的相关性分析 | 第46-47页 |
| ·可溶性MIC A/B对NK杀伤活性的影响 | 第47-50页 |
| ·CHOP/AP-1组合参与MIC A/B的转录调控 | 第50-52页 |
| ·MK通过P38信号通路参与CHOP/AP-1调节MIC A/B的表达 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-56页 |
| 第四章 MK特异的SCFV-DOX靶向抑制肿瘤生长 | 第56-72页 |
| 1 前言 | 第56页 |
| 2 实验材料和方法 | 第56-61页 |
| ·实验材料 | 第56-57页 |
| ·实验方法 | 第57-61页 |
| 3 实验结果 | 第61-67页 |
| ·SCFV的构建、表达和纯化 | 第61页 |
| ·SCFV-DOX免疫连接物的构建、纯化和分析 | 第61-63页 |
| ·SCFV-DOX体外细胞毒性 | 第63-64页 |
| ·SCFV-DOX体内毒性 | 第64-67页 |
| 4 讨论 | 第67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 全文总结 | 第72-73页 |
| 附录 试剂配方 | 第73-76页 |
| 科研成果 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
