| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第11-18页 |
| 1.1 中国大豆的需求与生产现状 | 第11-12页 |
| 1.1.1 中国对大豆的需求 | 第11页 |
| 1.1.2 中国大豆生产现状 | 第11-12页 |
| 1.2 丛枝菌根(AM)真菌简介 | 第12-13页 |
| 1.2.1 菌根概述 | 第12页 |
| 1.2.2 丛枝菌根对生态学的意义 | 第12-13页 |
| 1.2.3 AM真菌对根际土壤环境的改善作用 | 第13页 |
| 1.3 AM真菌改善大豆连作障碍的研究现状 | 第13-15页 |
| 1.3.1 连作障碍的产生原因 | 第13页 |
| 1.3.2 大豆连作障碍 | 第13-14页 |
| 1.3.3 AM真菌对大豆连作障碍拮抗作用的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.4 NESTED-PCR-DGGE技术 | 第15-16页 |
| 1.4.1 DGGE简介 | 第15页 |
| 1.4.2 Nested-PCR简介 | 第15-16页 |
| 1.4.3 PCR-DGGE技术在生物多样性分析中的应用 | 第16页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第16-17页 |
| 1.6 本研究的技术路线 | 第17-18页 |
| 第2章 材料与方法 | 第18-28页 |
| 2.1 试验材料 | 第18-22页 |
| 2.1.1 试验样地 | 第18页 |
| 2.1.2 大豆品种 | 第18页 |
| 2.1.3 菌株及质粒载体 | 第18-19页 |
| 2.1.4 主要试剂及培养基的配制 | 第19-20页 |
| 2.1.5 培养基及试剂盒 | 第20-21页 |
| 2.1.6 试验所需PCR引物 | 第21页 |
| 2.1.7 主要仪器设备 | 第21-22页 |
| 2.2 试验设计 | 第22页 |
| 2.3 试验方法 | 第22-27页 |
| 2.3.1 样品采集及处理 | 第22-23页 |
| 2.3.2 大豆根系侵染率测定 | 第23页 |
| 2.3.3 根样及根际土壤样品中DNA的提取 | 第23-25页 |
| 2.3.4 Nested-PCR | 第25页 |
| 2.3.5 PCR产物纯化回收 | 第25-26页 |
| 2.3.6 DGGE条件的优化及检测 | 第26-27页 |
| 2.3.7 DGGE条带的回收、克隆、测序及序列分析 | 第27页 |
| 2.4 侵染率的统计及DGGE图谱分析 | 第27-28页 |
| 2.4.1 侵染率的统计 | 第27页 |
| 2.4.2 DGGE图谱分析 | 第27-28页 |
| 第3章 结果与分析 | 第28-72页 |
| 3.1 菌根形态观察及侵染率测定 | 第28-31页 |
| 3.1.1 菌根形态观察 | 第28页 |
| 3.1.2 侵染率的测定 | 第28-31页 |
| 3.2 DNA样品提取 | 第31-32页 |
| 3.3 NESTED-PCR | 第32-35页 |
| 3.4 DGGE条件优化 | 第35-38页 |
| 3.4.1 DGGE凝胶变性剂梯度的确定 | 第35-36页 |
| 3.4.2 DGGE上样样品的确定 | 第36-37页 |
| 3.4.3 电泳时间的确定 | 第37-38页 |
| 3.5 DGGE图谱 | 第38-40页 |
| 3.6 DGGE条带分析 | 第40-45页 |
| 3.6.1 回收DGGE条带样品DNA扩增 | 第40-41页 |
| 3.6.2 转化结果扩增检测 | 第41-42页 |
| 3.6.3 DGGE条带测序及亲缘分析 | 第42-43页 |
| 3.6.4 系统发育分析 | 第43-45页 |
| 3.7 DGGE图谱分析 | 第45-72页 |
| 3.7.1 苗期HN37DGGE图谱分析 | 第45-49页 |
| 3.7.2 分枝期HN37DGGE图谱分析 | 第49-53页 |
| 3.7.3 连作年限对HN37根系土壤环境中的AM真菌菌群结构影响 | 第53页 |
| 3.7.4 苗期HN44DGGE图谱分析 | 第53-57页 |
| 3.7.5 分枝期HN44DGGE图谱分析 | 第57-61页 |
| 3.7.6 连作年限对HN44根系土壤环境中的AM真菌菌群结构影响 | 第61页 |
| 3.7.7 苗期HN48DGGE图谱分析 | 第61-65页 |
| 3.7.8 分枝期HN48DGGE图谱分析 | 第65-69页 |
| 3.7.9 连作年限对HN48根系土壤环境中的AM真菌菌群结构影响 | 第69页 |
| 3.7.10 连作对不同大豆品种根系土壤环境中的AM真菌菌群结构影响 | 第69-72页 |
| 第4章 讨论 | 第72-76页 |
| 4.1 课题背景 | 第72页 |
| 4.2 连作对AM真菌的菌群结构及侵染大豆根系效率的影响 | 第72-73页 |
| 4.3 不同属AM真菌对于连作常见病特异性抗性的探讨 | 第73页 |
| 4.4 基因组提取对后续试验的影响 | 第73-74页 |
| 4.5 DGGE的局限性 | 第74-76页 |
| 4.5.1 DGGE上样品的限制 | 第74-75页 |
| 4.5.2 DGGE图谱的重复性较差 | 第75页 |
| 4.5.3 DGGE对优势种群的限制 | 第75-76页 |
| 第5章 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第84-85页 |
