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水稻根特异性表达基因OsMADS27的功能研究

中文摘要第3-5页
英文摘要第5-7页
缩略词表第11-12页
1 绪论第12-24页
    1.1 引言第12页
    1.2 水稻根系的形态建成第12-13页
    1.3 水稻根系的生理功能第13-14页
    1.4 外界因素对水稻根系的影响第14页
    1.5 植物激素与水稻根系的研究第14-19页
        1.5.1 脱落酸对水稻根系发育的影响第15-18页
        1.5.2 生长素调控植物根系发育第18页
        1.5.3 赤霉素对水稻根系发育的影响第18-19页
    1.6 MADS-box转录因子的研究第19-21页
        1.6.1 植物MADS-box的结构第19页
        1.6.2 植物MADS-box的功能研究第19-20页
        1.6.3 OsMADS27在水稻中的功能第20-21页
    1.7 课题研究的目的及意义第21页
    1.8 研究内容第21页
    1.9 创新之处第21-24页
2 材料与方法第24-42页
    2.1 材料第24页
        2.1.1 实验材料第24页
        2.1.2 分子生物学试剂第24页
        2.1.3 主要仪器设备第24页
    2.2 培养基及储存液配方第24-27页
        2.2.1 10mMKNO3的MS培养基(1L)(固/液):第24-25页
        2.2.2 LB培养基(1L)第25页
        2.2.3 YPDA培养基(1L)第25-26页
        2.2.4 SD培养基(1L)第26页
        2.2.5 10×Dropout母液第26页
        2.2.6 亚甲基蓝染色液配方第26-27页
        2.2.7 植物基因组DNA和总RNA提取液配方第27页
        2.2.8 胁迫及激素处理所用试剂第27页
        2.2.9 酵母双杂交所用试剂第27页
    2.3 OsMADS27超表达植株的表型鉴定第27-29页
        2.3.1 转基因植株阳性检测第28-29页
        2.3.2 T1代植株的种植第29页
    2.4 OsMADS27基因在NO_3~-诱导的水稻根系形成中的功能研究第29-35页
        2.4.1 水稻总RNA的提取及反转录第30-31页
        2.4.2 荧光定量PCR(qPCR)反应体系及反应程序第31-32页
        2.4.3 ABA含量测定(HPLC法)第32-33页
        2.4.4 NO_3~-含量测定第33-34页
        2.4.5 亚甲基蓝染色第34-35页
    2.5 OsMADS27在ABA信号途径中的功能研究第35-40页
        2.5.1 野生型及转基因水稻的培养及表型观察第35页
        2.5.2 ABA含量测定第35页
        2.5.3 活性氧信号途径相关基因表达量检测第35-36页
        2.5.4 酵母互作实验第36-40页
            2.5.4.1 酵母双杂交相关载体的构建第36-39页
            2.5.4.2 OsMADS27、OsABI5及OsSLR1的转录激活和互作检测第39-40页
    2.6 ABA在OsMADS27通过NO_3~-信号途径调节根系发育过程中的功能研究第40页
        2.6.1 ABA含量测定第40页
        2.6.2 ABA相关基因的定量分析第40页
    2.7 OsMADS27对逆境的响应研究第40-41页
        2.7.1 PEG及NaCl处理第40-41页
        2.7.2 活性氧相关基因的定量分析第41页
    2.8 农艺性状的统计第41-42页
        2.8.1 水稻分蘖相关基因的定量分析第41页
        2.8.2 农艺性状调查第41-42页
3 实验结果第42-60页
    3.1 超表达OsMADS27促进水稻幼苗侧根的生长,同时抑制主根和地上部的生长第42-44页
        3.1.1 超表达水稻的株系筛选第42页
        3.1.2 野生型及超表达植株的表型分析第42页
        3.1.3 超表达OsMADS27对水稻种子萌发率的影响第42-44页
    3.2 OsMADS27在NO_3~-诱导的水稻侧根形成中的功能研究第44-49页
        3.2.1 OsMADS27通过参与NO_3~-信号途径调节侧根发育第45页
        3.2.2 OsMADS27影响内源NO_3~-的含量第45-49页
    3.3 OsMADS27超表达植株对ABA的响应第49-52页
        3.3.1 超表达OsMADS27增加植株对ABA的敏感性第49页
        3.3.2 OsMADS27与OsABI5间接互作第49页
        3.3.3 OsMADS27超表达对ABA处理下活性氧相关基因的影响第49-52页
    3.4 OsMADS27、NO_3~-及ABA共同调节水稻根系的生长第52-54页
        3.4.1 ABA在OsMADS27通过NO_3~-信号途径调节根系发育的过程中起重要作用第52页
        3.4.2 ABA合成和代谢相关基因的定量分析第52-54页
    3.5 OsMADS27参与水稻对逆境的响应第54-57页
        3.5.1 超表达OsMADS27增加水稻对PEG和NaCl的耐性第54-55页
        3.5.2 活性氧相关基因的定量分析第55-57页
    3.6 农艺性状的调查第57-60页
4 讨论第60-64页
    4.1 OsMADS27影响水稻生长的多个方面第60页
    4.2 OsMADS27通过参与NO_3~-信号途径调控根系发育第60-61页
    4.3 OsMADS27参与ABA信号途径调控水稻对逆境的响应第61-62页
    4.4 OsMADS27与激素信号和NO_3~-协同调节植株生长第62-64页
5 总结和展望第64-66页
致谢第66-68页
参考文献第68-78页
附录第78页
    A.作者攻读硕士学位期间发表的论文目录第78页
    B.OsMADS27基因序列(locus_tag=Os02g0579600)第78页

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