中文摘要 | 第3-4页 |
英文摘要 | 第4-5页 |
中英文对照及英文缩写词表 | 第5-9页 |
一 引言 | 第9-16页 |
1 Warburg效应 | 第9-10页 |
2 丙酮酸激酶(PK) | 第10-12页 |
2.1 PK的功能、亚型及分布 | 第10页 |
2.2 PKM2促进Warburg效应 | 第10-11页 |
2.3 PKM2的活性受翻译后修饰的调控 | 第11-12页 |
3 O-Glc NAc糖基化 | 第12-14页 |
3.1 O-Glc NAc的调节酶 | 第12页 |
3.2 O-Glc NAc的供体UDP-Glc NAc | 第12-13页 |
3.3 O-Glc NAc促进肿瘤发生 | 第13-14页 |
4 表皮生长因子(EGF)及其调控的信号通路 | 第14-15页 |
5 立题依据与研究思路 | 第15-16页 |
二 材料与方法 | 第16-25页 |
1. 实验试剂 | 第16-17页 |
1.1 抗体 | 第16页 |
1.2 其它试剂 | 第16-17页 |
2. 实验材料 | 第17-18页 |
2.1 细胞株及菌株 | 第17页 |
2.2 真核表达载体 | 第17-18页 |
3. 实验仪器 | 第18页 |
4. 实验方法 | 第18-25页 |
4.1 细胞培养 | 第18页 |
4.2 RNA提取 | 第18-19页 |
4.3 RT-PCR | 第19-20页 |
4.4 质粒构建 | 第20-21页 |
4.5 瞬时转染法 | 第21页 |
4.6 蛋白样品制备 | 第21页 |
4.7 免疫共沉淀法(Co-IP) | 第21-22页 |
4.8 免疫印迹法(Western blot) | 第22-23页 |
4.9 O-GlcNAc 的检测 | 第23-25页 |
三 实验结果 | 第25-33页 |
1. EGF促进MCF-7 细胞中PKM2 O-Glc NAc的发生 | 第25页 |
2. U0126抑制EGF介导的PKM2 O-Glc NAc的发生 | 第25-26页 |
3. MEK1Q56P促进PKM2 O-Glc NAc的发生 | 第26-30页 |
3.1 MEK1与MEK1Q56P真核表达载体的构建 | 第26-30页 |
3.2 MEK1Q56P的过表达促进PKM2 O-Glc NAc的发生 | 第30页 |
4. EGF活化的MEK-ERK信号未能促进OGT的表达 | 第30-31页 |
5. EGF活化的MEK-ERK信号可能促进OGT的磷酸化 | 第31-33页 |
四 讨论 | 第33-35页 |
1. EGF活化的MEK-ERK信号通路介导PKM2 O-Glc NAc的发生 | 第33页 |
2. OGT的磷酸化可能促进PKM2 O-Glc NAc的发生。 | 第33-35页 |
五 结论 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-42页 |
致谢 | 第42页 |