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EGF介导的信号通路对MCF-7细胞PKM2 O-GlcNAc修饰调控的研究

中文摘要第3-4页
英文摘要第4-5页
中英文对照及英文缩写词表第5-9页
一 引言第9-16页
    1 Warburg效应第9-10页
    2 丙酮酸激酶(PK)第10-12页
        2.1 PK的功能、亚型及分布第10页
        2.2 PKM2促进Warburg效应第10-11页
        2.3 PKM2的活性受翻译后修饰的调控第11-12页
    3 O-Glc NAc糖基化第12-14页
        3.1 O-Glc NAc的调节酶第12页
        3.2 O-Glc NAc的供体UDP-Glc NAc第12-13页
        3.3 O-Glc NAc促进肿瘤发生第13-14页
    4 表皮生长因子(EGF)及其调控的信号通路第14-15页
    5 立题依据与研究思路第15-16页
二 材料与方法第16-25页
    1. 实验试剂第16-17页
        1.1 抗体第16页
        1.2 其它试剂第16-17页
    2. 实验材料第17-18页
        2.1 细胞株及菌株第17页
        2.2 真核表达载体第17-18页
    3. 实验仪器第18页
    4. 实验方法第18-25页
        4.1 细胞培养第18页
        4.2 RNA提取第18-19页
        4.3 RT-PCR第19-20页
        4.4 质粒构建第20-21页
        4.5 瞬时转染法第21页
        4.6 蛋白样品制备第21页
        4.7 免疫共沉淀法(Co-IP)第21-22页
        4.8 免疫印迹法(Western blot)第22-23页
        4.9 O-GlcNAc 的检测第23-25页
三 实验结果第25-33页
    1. EGF促进MCF-7 细胞中PKM2 O-Glc NAc的发生第25页
    2. U0126抑制EGF介导的PKM2 O-Glc NAc的发生第25-26页
    3. MEK1Q56P促进PKM2 O-Glc NAc的发生第26-30页
        3.1 MEK1与MEK1Q56P真核表达载体的构建第26-30页
        3.2 MEK1Q56P的过表达促进PKM2 O-Glc NAc的发生第30页
    4. EGF活化的MEK-ERK信号未能促进OGT的表达第30-31页
    5. EGF活化的MEK-ERK信号可能促进OGT的磷酸化第31-33页
四 讨论第33-35页
    1. EGF活化的MEK-ERK信号通路介导PKM2 O-Glc NAc的发生第33页
    2. OGT的磷酸化可能促进PKM2 O-Glc NAc的发生。第33-35页
五 结论第35-36页
参考文献第36-42页
致谢第42页

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