| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第17-29页 |
| 1.1 概述 | 第17页 |
| 1.2 Exosome | 第17-22页 |
| 1.2.1 Exosome的生成和分泌 | 第17-18页 |
| 1.2.2 Exosome的来源和结构 | 第18页 |
| 1.2.3 Exosome与肿瘤 | 第18-22页 |
| 1.3 长链非编码RNAs | 第22-25页 |
| 1.3.1 LncRNAs的定义和分类 | 第22页 |
| 1.3.2 LncRNAs的生物学功能和作用模式 | 第22-23页 |
| 1.3.3 肿瘤中lncRNAs的表达及功能 | 第23-25页 |
| 1.4 线粒体RNA处理核糖核酸内切酶RNA组分概述 | 第25-26页 |
| 1.5 研究目的、方法、实验方案和意义 | 第26-29页 |
| 1.5.1 研究目的 | 第26页 |
| 1.5.2 研究方法 | 第26页 |
| 1.5.3 实验方案 | 第26-28页 |
| 1.5.4 研究意义 | 第28-29页 |
| 第二章 胃癌患者血清exosome内RMRP的检测及临床意义 | 第29-43页 |
| 2.1 材料 | 第29-31页 |
| 2.1.1 临床标本 | 第29-30页 |
| 2.1.2 细胞株 | 第30页 |
| 2.1.3 主要试剂和耗材 | 第30-31页 |
| 2.1.4 主要实验仪器 | 第31页 |
| 2.2 方法 | 第31-35页 |
| 2.2.1 血清标本收集 | 第31页 |
| 2.2.2 血清exosome提取 | 第31-32页 |
| 2.2.3 细胞复苏和冻存 | 第32页 |
| 2.2.4 细胞培养和上清收集 | 第32-33页 |
| 2.2.5 细胞上清exosome提取 | 第33页 |
| 2.2.6 透射电镜检测exosome形态 | 第33页 |
| 2.2.7 纳米颗粒跟踪分析仪Zeta View检测exosome大小 | 第33页 |
| 2.2.8 Western blot检测exosome表面标志物 | 第33-34页 |
| 2.2.9 血清和细胞上清exosome总RNA提取 | 第34页 |
| 2.2.10 血清和细胞上清exosome总RNA逆转录 | 第34页 |
| 2.2.11 实时荧光定量PCR | 第34-35页 |
| 2.2.12 统计学分析 | 第35页 |
| 2.3 结果 | 第35-40页 |
| 2.3.1 透射电子显微镜鉴定血清来源的exosome | 第35-36页 |
| 2.3.2 纳米颗粒跟踪分析仪Zeta View鉴定血清来源的exosome | 第36页 |
| 2.3.3 Western blot鉴定血清来源exosome的表面标志物 | 第36-37页 |
| 2.3.4 胃癌血清来源exosome中lncRNA表达水平筛选 | 第37-39页 |
| 2.3.5 血清来源exosome中RMRP表达水平检测及其诊断效能 | 第39-40页 |
| 2.4 讨论 | 第40-43页 |
| 第三章 RMRP在胃癌发展中的作用 | 第43-57页 |
| 3.1 材料 | 第43-44页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第43页 |
| 3.1.2 实验动物 | 第43页 |
| 3.1.3 主要试剂和耗材 | 第43-44页 |
| 3.1.4 主要实验仪器 | 第44页 |
| 3.2 方法 | 第44-48页 |
| 3.2.1 细胞冻存和复苏 | 第44页 |
| 3.2.2 细胞培养 | 第44页 |
| 3.2.3 RMRP干扰 | 第44-45页 |
| 3.2.4 平板克隆形成实验 | 第45页 |
| 3.2.5 Transwell迁移实验 | 第45页 |
| 3.2.6 细胞总RNA提取 | 第45-46页 |
| 3.2.7 细胞总蛋白提取 | 第46页 |
| 3.2.8 RNA逆转录和实时荧光定量PCR | 第46-47页 |
| 3.2.9 Western blot | 第47页 |
| 3.2.10 构建裸鼠皮下致瘤模型 | 第47-48页 |
| 3.2.11 免疫组织化学检测 | 第48页 |
| 3.2.12 统计学分析 | 第48页 |
| 3.3 结果 | 第48-55页 |
| 3.3.1 胃癌细胞株中RMRP敲减效率验证 | 第48-50页 |
| 3.3.2 RMRP低表达抑制胃癌细胞增殖能力 | 第50-51页 |
| 3.3.3 RMRP低表达抑制胃癌细胞迁移能力 | 第51-53页 |
| 3.3.4 RMRP低表达抑制胃癌细胞体内成瘤能力 | 第53-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-57页 |
| 第四章 胃癌细胞exosome内RMRP在胃癌发展中的作用 | 第57-71页 |
| 4.1 材料 | 第57-58页 |
| 4.1.1 细胞株和实验动物 | 第57页 |
| 4.1.2 主要试剂和耗材 | 第57页 |
| 4.1.3 主要实验仪器 | 第57-58页 |
| 4.2 方法 | 第58-59页 |
| 4.2.1 细胞处理 | 第58页 |
| 4.2.2 成像流式细胞术检测exosome细胞内定位 | 第58页 |
| 4.2.3 平板克隆形成实验 | 第58页 |
| 4.2.4 Transwell迁移实验 | 第58页 |
| 4.2.5 细胞总RNA提取、RNA逆转录和实时荧光定量PCR | 第58页 |
| 4.2.6 细胞总蛋白提取和Western blot | 第58页 |
| 4.2.7 构建裸鼠皮下致瘤模型 | 第58-59页 |
| 4.2.8 免疫组织化学检测 | 第59页 |
| 4.3 结果 | 第59-68页 |
| 4.3.1 低表达RMRP胃癌细胞来源exosome内RMRP表达水平检测 | 第59页 |
| 4.3.2 胃癌细胞内化RMRP低表达exosome | 第59-60页 |
| 4.3.3 RMRP低表达exosome抑制胃癌细胞增殖和迁移能力 | 第60-65页 |
| 4.3.4 RMRP低表达exosome抑制胃癌细胞体内成瘤能力 | 第65-68页 |
| 4.4 讨论 | 第68-71页 |
| 第五章 结论与展望 | 第71-73页 |
| 5.1 结论 | 第71页 |
| 5.2 展望 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文及参加会议 | 第85-86页 |
| 一、发表论文 | 第85-86页 |
| 二、参加会议 | 第86页 |
| 三、获奖情况 | 第86页 |
