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古菌中LysM结构域基因的挖掘及功能初探

致谢第5-6页
摘要第6-7页
abstract第7-8页
1 文献综述第11-16页
    1.1 古菌概述与其研究意义第11-12页
        1.1.1 古菌概述第11-12页
        1.1.2 古菌的研究意义第12页
    1.2 LysM结构域研究进展第12-16页
        1.2.1 LysM结构域结构特征概述第12-13页
        1.2.2 LysM结构域功能概述第13-14页
        1.2.3 LysM结构域与植物免疫防御第14-16页
2 引言第16-18页
    2.1 研究目的与意义第16-17页
    2.2 本研究的技术路线第17-18页
3 材料和方法第18-34页
    3.1 材料第18-21页
        3.1.1 实验材料第18页
        3.1.2 实验菌株与载体第18页
        3.1.3 试剂耗材与仪器设备第18-19页
        3.1.4 实验中相关试剂配制方法第19-21页
    3.2 方法第21-34页
        3.2.1 古菌基因组序列获得方法第21页
        3.2.2 古菌LysM结构域基因序列发掘方法第21-22页
        3.2.3 古菌LysM结构域蛋白氨基酸序列分析方法第22页
        3.2.4 原核表达第22-24页
        3.2.5 蛋白的纯化与浓缩方法第24-25页
        3.2.6 Westernblot方法第25-26页
        3.2.7 蛋白质含量测定方法第26页
        3.2.8 几丁质-多糖结合鉴定方法第26页
        3.2.9 几丁质酶活测定方法第26-27页
        3.2.10 植物表达载体构建方法第27-29页
        3.2.11 农杆菌侵染拟南芥转基因方法第29-30页
        3.2.12 转基因阳性植株鉴定方法第30-33页
        3.2.13 病原真菌侵染拟南芥鉴定方法第33-34页
4 结果与分析第34-46页
    4.1 古菌基因组序列的获得第34页
    4.2 古菌LysM结构域基因序列的获得第34-35页
    4.3 古菌LysM结构域基因的序列比对与系统进化树构建第35-37页
    4.4 HnLysM基因的生物信息学分析第37-39页
    4.5 HnLysM蛋白的原核表达第39-40页
    4.6 pET-HnLysM重组蛋白的纯化与Westernblot分析第40-42页
    4.7 HnLysM蛋白的几丁质结合活性及几丁质酶活活性鉴定第42-43页
    4.8 HnLysM在拟南芥中异源表达分析第43-46页
        4.8.1 HnLysM基因的植物表达载体构建第43-44页
        4.8.2 拟南芥转基因及阳性植株筛选第44-45页
        4.8.3 HnLysM基因的真菌防御功能分析第45-46页
5 讨论第46-48页
6 结论第48-49页
7 参考文献第49-53页
作者简介第53页

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