摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 前言 | 第12-20页 |
1.1 ABA调控种子成熟和休眠的研究进展 | 第12-14页 |
1.1.1 种子发育期ABA的积累过程 | 第12-13页 |
1.1.2 种子发育过程中的转录调控 | 第13-14页 |
1.2 ABA调控种子萌发的研究进展 | 第14-17页 |
1.2.1 内源ABA代谢对种子萌发的调控 | 第15页 |
1.2.2 ABA信号对种子萌发的调控 | 第15-17页 |
1.3 植物钙调素结合蛋白的研究进展 | 第17-19页 |
1.3.1 Ca~(2+)/CaM信号 | 第17页 |
1.3.2 CaMBP与IQM蛋白家族 | 第17-19页 |
1.4 研究目的与意义 | 第19-20页 |
第二章 IQM4调节ABA积累对种子休眠的影响 | 第20-46页 |
2.1 材料 | 第20-21页 |
2.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.2 试剂 | 第20页 |
2.1.3 溶液与培养基配制 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-27页 |
2.2.1 拟南芥常规培养 | 第21页 |
2.2.2 种子消毒处理 | 第21页 |
2.2.3 种子内源激素含量测定 | 第21-22页 |
2.2.4 种子萌发实验 | 第22页 |
2.2.5 基于RNA-Seq的转录组测序 | 第22-24页 |
2.2.6 RNA提取 | 第24-25页 |
2.2.7 RT-qPCR反应 | 第25页 |
2.2.8 IQM4表达谱分析 | 第25-26页 |
2.2.9 ABA合成和代谢酶基因的表达分析 | 第26页 |
2.2.10 种子成熟调控因子的表达分析 | 第26-27页 |
2.3 结果与分析 | 第27-45页 |
2.3.1 种子内源激素含量 | 第27-29页 |
2.3.2 种子休眠程度分析 | 第29-30页 |
2.3.3 转录组分析 | 第30-39页 |
2.3.4 IQM4表达谱分析 | 第39-41页 |
2.3.5 种子成熟期ABA合成和代谢酶基因的表达分析 | 第41-43页 |
2.3.6 种子成熟调节因子的表达分析 | 第43-45页 |
2.4 小结与讨论 | 第45-46页 |
第三章 IQM4突变对ABA抑制种子萌发的影响 | 第46-53页 |
3.1 材料 | 第46-47页 |
3.1.1 植物材料 | 第46页 |
3.1.2 试剂 | 第46页 |
3.1.3 溶液与培养基配制 | 第46-47页 |
3.2 实验方法 | 第47页 |
3.2.1 拟南芥常规培养 | 第47页 |
3.2.2 种子萌发率实验 | 第47页 |
3.2.3 RNA提取 | 第47页 |
3.2.4 ABA信号转导基因的表达分析 | 第47页 |
3.3 结果与分析 | 第47-51页 |
3.3.1 ABA对种子萌发率的影响 | 第47-49页 |
3.3.2 IQM4突变对种子萌发期ABA信号转导基因表达的影响 | 第49-51页 |
3.4 小结与讨论 | 第51-53页 |
第四章 IQM4蛋白表达的初步探究 | 第53-64页 |
4.1 材料 | 第53-55页 |
4.1.1 生物材料 | 第53页 |
4.1.2 试剂 | 第53页 |
4.1.3 溶液与培养基配制 | 第53-55页 |
4.2 实验方法 | 第55-58页 |
4.2.1 拟南芥常规培养 | 第55页 |
4.2.2 农杆菌侵染法构建拟南芥转基因植株 | 第55-56页 |
4.2.3 p35S:IQM4-HA纯合植株筛选 | 第56页 |
4.2.4 p35S:IQM4-HA纯合植株鉴定 | 第56-57页 |
4.2.5 拟南芥总蛋白的提取 | 第57页 |
4.2.6 蛋白质浓度测定 | 第57页 |
4.2.7 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第57页 |
4.2.8 WesternBlotting检测 | 第57-58页 |
4.3 结果与分析 | 第58-62页 |
4.3.1 p35S:IQM4-HA纯合株系筛选 | 第58-59页 |
4.3.2 p35S:IQM4-HA植株鉴定 | 第59-61页 |
4.3.3 转基因株系的IQM4-HA蛋白的检测 | 第61-62页 |
4.4 小结与讨论 | 第62-64页 |
第五章 结论与讨论 | 第64-69页 |
5.1 IQM4对种子休眠的调控 | 第64-66页 |
5.2 IQM4对种子萌发时ABA信号转导的调控 | 第66-67页 |
5.3 IQM4蛋白的表达 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-78页 |
附录 | 第78-82页 |
致谢 | 第82页 |