| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-20页 |
| 1.1 黄连概述 | 第14页 |
| 1.2 黄连的化学成分 | 第14-15页 |
| 1.2.1 生物碱类 | 第14页 |
| 1.2.2 其他 | 第14-15页 |
| 1.3 黄连的药理作用 | 第15-17页 |
| 1.3.1 黄连的抗菌作用 | 第15页 |
| 1.3.2 黄连的抗病毒作用 | 第15页 |
| 1.3.3 黄连的抗氧化作用 | 第15页 |
| 1.3.4 黄连的抗炎作用 | 第15-16页 |
| 1.3.5 黄连抗肿瘤作用 | 第16页 |
| 1.3.6 黄连对心血管疾病的改善作用 | 第16页 |
| 1.3.7 黄连对脑血管疾病的改善作用 | 第16页 |
| 1.3.8 黄连对血糖血压的改善作用 | 第16-17页 |
| 1.4 黄连碱的研究进展 | 第17页 |
| 1.5 肝癌的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.5.1 肝癌概述 | 第17页 |
| 1.5.2 肝癌的致病因素 | 第17-18页 |
| 1.5.3 肝癌的治疗方法 | 第18页 |
| 1.5.4 肝癌相关机制 | 第18页 |
| 1.6 MicroRNAs的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.7 急性肝损伤的研究进展 | 第19-20页 |
| 第2章 引言 | 第20-22页 |
| 2.1 研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 2.2 研究内容 | 第21-22页 |
| 第3章 黄连碱的安全性评价 | 第22-27页 |
| 3.1 黄连碱对HepG2、Huh7和L02细胞进行MTT实验 | 第22页 |
| 3.2 主要材料与仪器 | 第22页 |
| 3.3 实验方法 | 第22-23页 |
| 3.3.1 溶液的配置 | 第22-23页 |
| 3.3.2 HepG2、Huh7和L02细胞的复苏和培养,传代和冻存 | 第23页 |
| 3.3.3 MTT实验 | 第23页 |
| 3.4 实验结果 | 第23-25页 |
| 3.5 讨论与小结 | 第25-27页 |
| 第4章 黄连碱抗肝癌活性体外实验 | 第27-38页 |
| 4.1 黄连碱对HepG2、Huh7和L02细胞增殖、迁移、凋亡和miR-122的影响 | 第27页 |
| 4.2 主要材料与仪器 | 第27页 |
| 4.3 实验方法 | 第27-30页 |
| 4.3.1 COP对细胞增殖的影响：MTT、集落形成实验 | 第27-28页 |
| 4.3.2 COP对细胞迁移影响：划痕愈合实验、miR-122转染实验 | 第28页 |
| 4.3.3 COP对细胞凋亡的影响：Hoechst33258、流式细胞术 | 第28-29页 |
| 4.3.4 COP对细胞miR-122表达的影响：RT-qPCR | 第29-30页 |
| 4.4 实验结果 | 第30-36页 |
| 4.4.1 黄连碱在体外实验抑制肝癌细胞的增殖 | 第30页 |
| 4.4.2 黄连碱在体外实验抑制肝癌细胞的迁移 | 第30-33页 |
| 4.4.3 黄连碱在体外实验促进肝癌细胞的凋亡,miR-122促进肝癌细胞的凋亡 | 第33-35页 |
| 4.4.4 黄连碱在体外实验对miR-122表达的影响 | 第35-36页 |
| 4.5 讨论与小结 | 第36-38页 |
| 第5章 黄连碱抗肝癌活性体内实验 | 第38-52页 |
| 5.1 黄连碱对荷瘤BALB/c裸小鼠的抑瘤作用 | 第38页 |
| 5.2 主要材料与仪器 | 第38-39页 |
| 5.3 实验方法 | 第39-42页 |
| 5.3.1 COP剂量的设计 | 第39页 |
| 5.3.2 肝癌模型的建立以及实验动物的分组 | 第39页 |
| 5.3.3 肿瘤体积的监测 | 第39页 |
| 5.3.4 裸小鼠体重、肝重和瘤重以及肝体比、肾体比、脾体比和抑瘤率 | 第39页 |
| 5.3.5 肝脏和肿瘤病理组织切片 | 第39-40页 |
| 5.3.6 WesternBlot检测肝脏和肿瘤中Bcl2、BAX、ADAM10、MMP9蛋白表达的影响 | 第40-42页 |
| 5.3.7 肝脏miR-122的表达水平的检测 | 第42页 |
| 5.3.8 数据统计分析 | 第42页 |
| 5.4 实验结果 | 第42-49页 |
| 5.4.1 黄连碱在体外实验抑制肝癌细胞的增殖 | 第42-44页 |
| 5.4.2 COP对HepG2荷瘤裸小鼠体重、瘤重、脏器重、脏体比、抑制率的影响 | 第44-46页 |
| 5.4.3 H&E染色观察COP对HepG2荷瘤裸小鼠肝和肿瘤组织的形态影响 | 第46-47页 |
| 5.4.4 WesternBlot检测肝脏和肿瘤中Bcl2、BAX、ADAM10、MMP9蛋白表达 | 第47-48页 |
| 5.4.5 COP提高BALB/c裸小鼠肝脏miR-122的表达 | 第48-49页 |
| 5.5 讨论与小结 | 第49-52页 |
| 第6章 黄连碱肝保护作用体外实验 | 第52-62页 |
| 6.1 黄连碱和内毒素对HepG2、L02细胞增殖、凋亡和miR-122的影响 | 第52页 |
| 6.2 主要材料与仪器 | 第52页 |
| 6.3 实验方法 | 第52-53页 |
| 6.3.1 COP和LPS对HepG2、L02细胞增殖的影响 | 第52页 |
| 6.3.2 COP和LPS对HepG2、L02细胞miR-122的影响 | 第52页 |
| 6.3.3 流式细胞术定性定量HepG2、L02细胞的凋亡 | 第52页 |
| 6.3.4 WesternBlot分析HepG2、L02细胞的凋亡蛋白的变化 | 第52-53页 |
| 6.4 实验结果 | 第53-60页 |
| 6.4.1 黄连碱、LPS造模浓度的选择 | 第53-54页 |
| 6.4.2 黄连碱对HepG2和L02细胞miR-122表达的影响 | 第54-55页 |
| 6.4.3 黄连碱对HepG2和L02细胞凋亡的影响 | 第55-58页 |
| 6.4.4 黄连碱对HepG2和L02细胞凋亡相关蛋白的影响 | 第58-60页 |
| 6.5 讨论与小结 | 第60-62页 |
| 第7章 黄连碱肝保护作用体内实验 | 第62-70页 |
| 7.1 黄连碱对LPS/D-GalN诱导的小鼠急性肝损伤肝脏的保护作用 | 第62页 |
| 7.2 主要材料与仪器 | 第62页 |
| 7.3 实验方法 | 第62-63页 |
| 7.3.1 COP剂量的设计 | 第62页 |
| 7.3.2 急性肝损伤模型的建立以及实验动物的分组 | 第62页 |
| 7.3.3 动物的管理与给药 | 第62-63页 |
| 7.3.4 血清和肝脏生化指标 | 第63页 |
| 7.3.5 组织学分析和免疫组化 | 第63页 |
| 7.3.6 肝脏miR-122的表达水平的检测 | 第63页 |
| 7.4 实验结果 | 第63-68页 |
| 7.4.1 LPS/D-GalN联用诱导小鼠急性肝损伤 | 第63-64页 |
| 7.4.2 黄连碱对肝脏形态学上的影响 | 第64-66页 |
| 7.4.3 黄连碱对LPS/D-GalN肝损伤小鼠相关生化指标的影响 | 第66-67页 |
| 7.4.4 黄连碱对LPS/D-GalN肝损伤小鼠miR-122表达的影响 | 第67页 |
| 7.4.5 黄连碱对LPS/D-GalN肝损伤小鼠凋亡蛋白表达的影响 | 第67-68页 |
| 7.5 讨论与小结 | 第68-70页 |
| 结论 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-80页 |
| 中英文缩略语表 | 第80-82页 |
| 硕士期间参与发表的论文 | 第82页 |
