| 摘要 | 第3-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 前言 | 第17-21页 |
| 附图 | 第21-22页 |
| 第一章 脓毒症休克小鼠RAGE缺失的肺脏差异蛋白质组图谱的建立及生物信息学分析 | 第22-63页 |
| 1.1 材料 | 第22-28页 |
| 1.1.1 主要试剂和试剂盒 | 第22-23页 |
| 1.1.2 主要配制的试剂 | 第23-26页 |
| 1.1.3 实验动物 | 第26页 |
| 1.1.4 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 1.1.5 主要数据库及生物信息学网站 | 第27-28页 |
| 1.2 方法 | 第28-35页 |
| 1.2.1 C57/BL6小鼠脓毒症休克模型的制备 | 第28-29页 |
| 1.2.2 小鼠肺脏组织蛋白质的提取 | 第29页 |
| 1.2.3 小鼠肺脏组织蛋白质的纯化 | 第29页 |
| 1.2.4 小鼠肺脏组织蛋白质的定量 | 第29-30页 |
| 1.2.5 RAGE基因缺失的Western blotting验证 | 第30页 |
| 1.2.6 CyDye染料标记 | 第30-31页 |
| 1.2.7 双向凝胶电泳 | 第31-32页 |
| 1.2.8 分析胶的成像 | 第32页 |
| 1.2.9 制备胶的制作 | 第32-33页 |
| 1.2.10 制备胶的胶体考马斯亮蓝染色以及扫描 | 第33页 |
| 1.2.11 用分析软件匹配差异点并进行挖胶 | 第33-34页 |
| 1.2.12 考染胶粒的胶内酶解 | 第34页 |
| 1.2.13 样品纯化浓缩、点靶 | 第34页 |
| 1.2.14 质谱鉴定 | 第34-35页 |
| 1.2.15 差异蛋白的亚细胞定位分析 | 第35页 |
| 1.3 结果 | 第35-60页 |
| 1.3.1 蛋白定量结果 | 第35-36页 |
| 1.3.2 RAGE基因缺失的Western blotting验证 | 第36页 |
| 1.3.3 分析胶荧光扫描图像 | 第36-39页 |
| 1.3.4 制备胶染色图像 | 第39-40页 |
| 1.3.5 DeCyder 2D软件分析蛋白差异点 | 第40-41页 |
| 1.3.6 差异蛋白质的质谱鉴定 | 第41-44页 |
| 1.3.7 蛋白质亚细胞定位分析 | 第44-60页 |
| 1.4 讨论 | 第60-63页 |
| 第二章 RAGE相关的差异蛋白质Krt7的初步功能探讨 | 第63-76页 |
| 2.1 材料 | 第63-67页 |
| 2.1.1 主要试剂和耗材 | 第63-64页 |
| 2.1.2 主要配制的试剂 | 第64-65页 |
| 2.1.3 质粒、菌株和细胞株 | 第65-66页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第66-67页 |
| 2.2 方法 | 第67-71页 |
| 2.2.1 Western blotting检测Krt7的蛋白表达变化 | 第67页 |
| 2.2.2 Real-time PCR观察Krt7 mRNA水平上的表达变化 | 第67-69页 |
| 2.2.3 Krt7真核重组质粒的构建 | 第69-70页 |
| 2.2.4 细胞免疫化学荧光检测外源性Krt7的表达与定位 | 第70页 |
| 2.2.5 统计学分析 | 第70-71页 |
| 2.3 结果 | 第71-74页 |
| 2.3.1 Western blotting检测Krt7的蛋白表达变化 | 第71页 |
| 2.3.2 Real-time PCR观察Krt7 mRNA水平上的表达变化 | 第71-72页 |
| 2.3.3 Krt7真核重组质粒的构建 | 第72-73页 |
| 2.3.4 细胞免疫化学检测外源性Krt7的表达与定位 | 第73-74页 |
| 2.4 讨论 | 第74-76页 |
| 第三章 全文小结 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-81页 |
| 在读硕士期间发表的论文 | 第81-82页 |
| 缩略词表 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
