| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 1 绪论 | 第7-14页 |
| 1.1 盐胁迫对植物的影响 | 第7-8页 |
| 1.2 重金属胁迫对植物的影响 | 第8-9页 |
| 1.3 真核生物起始因子5A(eIF5A)概述 | 第9页 |
| 1.4 真核生物起始因子5A的研究现状 | 第9-11页 |
| 1.4.1 eIF5A基因在起始蛋白质合成与核质转运中的作用 | 第10页 |
| 1.4.2 eIF5A基因促进细胞增殖 | 第10-11页 |
| 1.4.3 eIF5A基因调控细胞衰老、细胞死亡以及抵抗环境胁迫 | 第11页 |
| 1.5 植物中真核生物起始因子5A的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.6 小黑杨的研究状况及意义 | 第12-13页 |
| 1.6.1 杨树的介绍 | 第12页 |
| 1.6.2 杨树的非生物胁迫抗性研究的意义 | 第12-13页 |
| 1.7 研究内容及技术路线 | 第13-14页 |
| 2 杨树PsneIF5A2/4基因序列及表达模式特征研究 | 第14-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第14页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第14页 |
| 2.1.2 菌株与载体 | 第14页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第14页 |
| 2.2 试验方法 | 第14-21页 |
| 2.2.1 小黑杨PsneIF5A基因的克隆及序列分析 | 第14-18页 |
| 2.2.2 各种胁迫下PsneIF5A基因在小黑杨叶片中的表达 | 第18页 |
| 2.2.3 PsneIF5A基因的亚细胞定位 | 第18-21页 |
| 2.3 结果与分析 | 第21-30页 |
| 2.3.1 小黑杨RNA的提取及基因克隆 | 第21页 |
| 2.3.2 PsneIF5A基因的生物信息学分析 | 第21-25页 |
| 2.3.3 PsneIF5A基因在小黑杨不同组织中的表达模式 | 第25-26页 |
| 2.3.4 PsneIF5A基因在不同胁迫下的表达模式 | 第26-29页 |
| 2.3.5 PsneIF5A的亚细胞定位 | 第29-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-32页 |
| 3 PsneIF5A2/4基因的抗逆功能分析 | 第32-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第32-34页 |
| 3.1.1 菌株和载体 | 第32页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第32-34页 |
| 3.2 试验方法 | 第34-37页 |
| 3.2.1 酵母表达载体pYES2-PsneIF5A2/4的构建 | 第34-35页 |
| 3.2.2 重组质粒(pYES2-eIF5A2/4)和空质粒(pYES2)的酵母转化 | 第35-36页 |
| 3.2.3 酵母RNA的提取 | 第36页 |
| 3.2.4 Northern blot鉴定 | 第36-37页 |
| 3.2.5 重组酵母INVScl(pYES2-eIF5A2/4)的胁迫试验 | 第37页 |
| 3.3 结果与分析 | 第37-40页 |
| 3.3.1 酵母表达载体的构建及验证 | 第37-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-42页 |
| 4 PsneIF5A2基因转拟南芥及其抗逆功能分析 | 第42-56页 |
| 4.1 实验材料 | 第42页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第42页 |
| 4.1.2 菌株和载体 | 第42页 |
| 4.1.3 酶及试剂盒 | 第42页 |
| 4.1.4 培养基 | 第42页 |
| 4.2 实验方法 | 第42-47页 |
| 4.2.1 植物表达载体pROK Ⅱ-PsneIF5A2的构建 | 第42-44页 |
| 4.2.2 冻融法转化农杆菌 | 第44页 |
| 4.2.3 拟南芥的遗传转化 | 第44-45页 |
| 4.2.4 转PsneIF5A2基因拟南芥分子水平的鉴定 | 第45-46页 |
| 4.2.5 转基因拟南芥的抗性分析 | 第46-47页 |
| 4.3 结果与分析 | 第47-54页 |
| 4.3.1 植物表达载体pROKⅡ-PsneIF5A2的构建及拟南芥的遗传转化 | 第47-48页 |
| 4.3.2 转基因拟南芥的分子鉴定 | 第48-50页 |
| 4.3.3 转基因拟南芥的抗性分析 | 第50-54页 |
| 4.4 讨论 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
